摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
综述 | 第10-18页 |
1. 猪瘟(CSF)及猪瘟病毒(CSFV)的概述 | 第10-16页 |
1.1 猪瘟(CSF) | 第10页 |
1.2 猪瘟病毒(CSFV) | 第10-16页 |
2. 锤头状核酶(hammerhead ribozyme) | 第16页 |
3. 猪瘟疫苗的发展 | 第16-17页 |
4. 研究目的和意义 | 第17-18页 |
第一部分 猪瘟病毒疫苗株反向遗传学改造 | 第18-68页 |
1. 材料 | 第18-22页 |
1.1. 质粒、载体、菌株和细胞系 | 第18页 |
1.2. 主要试剂 | 第18-19页 |
1.3. 溶液配置 | 第19-21页 |
1.4. 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2. 方法 | 第22-52页 |
2.1. p MC18-CMV-HM-CSFV的构建 | 第22-34页 |
2.2 锤头状核酶的功能鉴定 | 第34-48页 |
2.3. 病毒的拯救 | 第48-50页 |
2.4. 酶切位点的消除 | 第50-52页 |
3. 结果 | 第52-66页 |
3.1 重组质粒p MC18-CMV-HM-CSFV的鉴定 | 第52-56页 |
3.2 锤头状核酶的功能鉴定 | 第56-63页 |
3.3. 病毒的拯救 | 第63-64页 |
3.4. 酶切位点的消除 | 第64-66页 |
4. 讨论 | 第66-68页 |
第二部分 猪瘟病毒C蛋白对其 5'UTR的调节 | 第68-87页 |
1. 材料 | 第68-70页 |
1.1. 载体、菌株和细胞系 | 第68页 |
1.2. 试剂 | 第68页 |
1.3. 溶液配置 | 第68-70页 |
1.4. 主要仪器设备 | 第70页 |
2. 方法 | 第70-79页 |
2.1. 引物设计及合成 | 第70页 |
2.2. 重组质粒p MIR-5'UTR-RLUC和p MIR -RLUC的构建 | 第70-76页 |
2.3. 猪瘟病毒C蛋白对 5'UTR的调节作用 | 第76-78页 |
2.4. 猪瘟病毒12个蛋白对 5'UTR的调节作用 | 第78-79页 |
3. 结果 | 第79-85页 |
3.1. 重组质粒p MIR-5'UTR-RLUC和p MIR-RLUC的鉴定 | 第79-82页 |
3.2. 猪瘟病毒C蛋白对 5'UTR的调节作用 | 第82-83页 |
3.3. 猪瘟病毒12个蛋白对 5'UTR的调节作用 | 第83-85页 |
4. 讨论 | 第85-87页 |
结论 | 第87-88页 |
附录 | 第88-92页 |
参考文献 | 第92-96页 |
致谢 | 第96页 |