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香雪兰类黄酮代谢相关bHLH转录因子基因的克隆及其功能鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
引言第10-18页
    1.颜色产生的机制第10页
    2.影响花色形成的因素第10-13页
        2.1 影响花色形成的色素类物质第10-13页
        2.2 影响花色形成的其它因素第13页
    3.类黄酮合成途径及关键基因第13-15页
        3.1 类黄酮合成途径及关键酶第13-15页
        3.2 类黄酮合成相关转录因子第15页
    4.调控类黄酮合成的bHLH转录因子第15-16页
    5.本研究目的意义与内容第16-18页
材料与方法第18-36页
    1.实验材料第18-24页
        1.1 植物材料及培养方法第18页
        1.2 质粒及菌种第18页
        1.3 主要试剂第18页
        1.4 主要试剂配制方法第18-20页
        1.5 主要仪器设备第20-21页
        1.6 引物合成第21-24页
    2.实验方法第24-36页
        2.1 基因克隆第24-28页
        2.2 生物信息学分析第28页
        2.3 花色苷及原花青素相对含量测定第28-29页
        2.4 转化拟南芥及转基因植株筛选第29-32页
        2.5 Real Time-qPCR及基因表达量分析第32-33页
        2.6 原生质体瞬时转染第33-36页
结果及分析第36-59页
    1.两个香雪兰bHLH转录因子基因的克隆及生物信息学分析第36-42页
        1.1 FhbHLHs基因的克隆第36-39页
        1.2 FhbHLHs的生物信息学分析第39-42页
    2.FhbHLHs基因表达模式与香雪兰花色苷及原花青素(PAs)积累模式相关性分析第42-45页
        2.1 红花、白花香雪兰盛开时期花朵总花色苷含量测定第42页
        2.2 红花香雪兰花朵发育不同时期花色苷及原花青素积累模式分析第42-43页
        2.3 红花香雪兰不同组织花色苷及原花青素积累模式分析第43-44页
        2.4 FhTT8L和FhGL3L基因在红花香雪兰中表达模式分析第44-45页
    3.过量表达FhGL3L基因影响拟南芥花色苷积累及拟南芥叶片表面表皮毛发生第45-50页
        3.1 过量表达载体的构建第45-46页
        3.2 植物转化及转基因阳性植株的筛选第46页
        3.3 过量表达FhGL3L基因影响拟南芥花色苷积累第46-48页
        3.4 过量表达FhGL3L基因影响拟南芥茎和叶面表皮毛发生第48-50页
    4.瞬时表达FhTT8L影响拟南芥花色苷及原花青素合成相关结构基因的表达第50-51页
        4.1 瞬时表达载体的构建及质粒的大量提取第50页
        4.2 瞬时表达FhTT8L及Real time-qPCR分析第50-51页
    5.FhTT8L、FhGL3L与AtMYBs互作第51-53页
        5.1 FhTT8L和FhGL3L转录激活能力验证第51-52页
        5.2 FhTT8L、FhGL3L与AtMYBs互作验证第52-53页
    6.FhTT8L、FhGL3L与AtPAP1共转启动AtDFR的表达第53-54页
    7.FhGL3L激活能力的丧失导致转基因拟南芥表皮毛的缺失第54-55页
    8.FhTT8L、FhGL3L截短区域功能验证第55-59页
        8.1 载体构建及激活能力验证第55-56页
        8.2 FhbHLHs N端保守结构域MIR与MYB互作第56-57页
        8.3 C端结构域参与形成同源二聚体第57-59页
讨论第59-64页
    1.FhGL3L和FhTT8L是香雪兰中的两个bHLHs转录因子第59-60页
    2.FhGL3L和FhTT8L参与调控类黄酮物质的合成第60-61页
    3.过表达FhGL3L抑制拟南芥茎与叶面表皮毛发生第61-62页
    4.FhGL3L和FhTT8L在转基因拟南芥中的作用模式第62-64页
结论与创新点第64-65页
参考文献第65-72页
致谢第72页

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