摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第10-18页 |
1.颜色产生的机制 | 第10页 |
2.影响花色形成的因素 | 第10-13页 |
2.1 影响花色形成的色素类物质 | 第10-13页 |
2.2 影响花色形成的其它因素 | 第13页 |
3.类黄酮合成途径及关键基因 | 第13-15页 |
3.1 类黄酮合成途径及关键酶 | 第13-15页 |
3.2 类黄酮合成相关转录因子 | 第15页 |
4.调控类黄酮合成的bHLH转录因子 | 第15-16页 |
5.本研究目的意义与内容 | 第16-18页 |
材料与方法 | 第18-36页 |
1.实验材料 | 第18-24页 |
1.1 植物材料及培养方法 | 第18页 |
1.2 质粒及菌种 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18页 |
1.4 主要试剂配制方法 | 第18-20页 |
1.5 主要仪器设备 | 第20-21页 |
1.6 引物合成 | 第21-24页 |
2.实验方法 | 第24-36页 |
2.1 基因克隆 | 第24-28页 |
2.2 生物信息学分析 | 第28页 |
2.3 花色苷及原花青素相对含量测定 | 第28-29页 |
2.4 转化拟南芥及转基因植株筛选 | 第29-32页 |
2.5 Real Time-qPCR及基因表达量分析 | 第32-33页 |
2.6 原生质体瞬时转染 | 第33-36页 |
结果及分析 | 第36-59页 |
1.两个香雪兰bHLH转录因子基因的克隆及生物信息学分析 | 第36-42页 |
1.1 FhbHLHs基因的克隆 | 第36-39页 |
1.2 FhbHLHs的生物信息学分析 | 第39-42页 |
2.FhbHLHs基因表达模式与香雪兰花色苷及原花青素(PAs)积累模式相关性分析 | 第42-45页 |
2.1 红花、白花香雪兰盛开时期花朵总花色苷含量测定 | 第42页 |
2.2 红花香雪兰花朵发育不同时期花色苷及原花青素积累模式分析 | 第42-43页 |
2.3 红花香雪兰不同组织花色苷及原花青素积累模式分析 | 第43-44页 |
2.4 FhTT8L和FhGL3L基因在红花香雪兰中表达模式分析 | 第44-45页 |
3.过量表达FhGL3L基因影响拟南芥花色苷积累及拟南芥叶片表面表皮毛发生 | 第45-50页 |
3.1 过量表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.2 植物转化及转基因阳性植株的筛选 | 第46页 |
3.3 过量表达FhGL3L基因影响拟南芥花色苷积累 | 第46-48页 |
3.4 过量表达FhGL3L基因影响拟南芥茎和叶面表皮毛发生 | 第48-50页 |
4.瞬时表达FhTT8L影响拟南芥花色苷及原花青素合成相关结构基因的表达 | 第50-51页 |
4.1 瞬时表达载体的构建及质粒的大量提取 | 第50页 |
4.2 瞬时表达FhTT8L及Real time-qPCR分析 | 第50-51页 |
5.FhTT8L、FhGL3L与AtMYBs互作 | 第51-53页 |
5.1 FhTT8L和FhGL3L转录激活能力验证 | 第51-52页 |
5.2 FhTT8L、FhGL3L与AtMYBs互作验证 | 第52-53页 |
6.FhTT8L、FhGL3L与AtPAP1共转启动AtDFR的表达 | 第53-54页 |
7.FhGL3L激活能力的丧失导致转基因拟南芥表皮毛的缺失 | 第54-55页 |
8.FhTT8L、FhGL3L截短区域功能验证 | 第55-59页 |
8.1 载体构建及激活能力验证 | 第55-56页 |
8.2 FhbHLHs N端保守结构域MIR与MYB互作 | 第56-57页 |
8.3 C端结构域参与形成同源二聚体 | 第57-59页 |
讨论 | 第59-64页 |
1.FhGL3L和FhTT8L是香雪兰中的两个bHLHs转录因子 | 第59-60页 |
2.FhGL3L和FhTT8L参与调控类黄酮物质的合成 | 第60-61页 |
3.过表达FhGL3L抑制拟南芥茎与叶面表皮毛发生 | 第61-62页 |
4.FhGL3L和FhTT8L在转基因拟南芥中的作用模式 | 第62-64页 |
结论与创新点 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
致谢 | 第72页 |