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犏牛雄性不育相关蛋白筛选研究

摘要第4-6页
Abstract第6-9页
1 绪论第14-21页
    1.1 犏牛的基本概况及其研究现状第14-17页
        1.1.1 犏牛的基本概况第14-15页
        1.1.2 犏牛雄性不育机制研究现状第15-17页
    1.2 蛋白质组学研究概况第17-20页
        1.2.1 蛋白质组学概念及主要研究内容第17页
        1.2.2 蛋白质组学主要技术第17-18页
        1.2.3 蛋白质组学研究的新技术第18页
        1.2.4 iTRAQ定量蛋白质组学原理第18-19页
        1.2.5 iTRAQ技术的优势第19-20页
    1.3 犏牛雄性不育研究目的和意义第20-21页
2 犏牛和牦牛睾丸解剖组织结构研究第21-27页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 动物样品的采集第21页
        2.1.2 主要仪器与设备第21-22页
        2.1.3 主要试剂及配制第22页
    2.2 方法第22-23页
    2.3 结果与分析第23-25页
    2.4 讨论第25-27页
3 犏牛与牦牛睾丸蛋白组学比较分析第27-65页
    3.1 实验材料第27-29页
        3.1.1 实验动物睾丸组织的采集第27页
        3.1.2 主要仪器设备第27-28页
        3.1.3 主要工具酶及试剂第28-29页
    3.2. 方法第29-36页
        3.2.1 睾丸组织蛋白提取第29-30页
        3.2.2 蛋白质浓度Bradford定量第30页
        3.2.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第30-31页
        3.2.4 蛋白质酶解第31页
        3.2.5 iTRAQ标记第31-32页
        3.2.6 强阳离子交换色谱(Strong Cation Exchange chromatographic, SCX)分离第32页
        3.2.7 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MSMS分析第32-33页
        3.2.8 标准生物信息分析流程第33-34页
        3.2.9 犏牛雄性不育相关蛋白表达水平的ELISA分析方法第34-36页
        3.2.10 ELISA实验数据处理第36页
    3.3 结果与分析第36-61页
        3.3.1 蛋白定量结果第36-38页
        3.3.2 显著差异蛋白统计第38页
        3.3.3 蛋质丰度分布结果第38-40页
        3.3.4 犏牛和牦牛睾丸组织中差异表达蛋白统计分析第40-47页
        3.3.5 差异表达蛋白的功能分析第47-49页
        3.3.6 差异表达蛋白GO分析第49-56页
        3.3.7 差异表达蛋白的Pathway富集分析第56-59页
        3.3.8 相关差异表达蛋白表达水平的ELISA分析第59-61页
    3.4 讨论第61-65页
        3.4.1 在犏牛睾丸中上调的蛋白质可能导致生精小管结构异常第61-62页
        3.4.2 直接参与精子生成过程的调节蛋白第62-63页
        3.4.3 一些可能与多种应激相关的差异蛋白第63页
        3.4.4 在精子发生过程中,有可能与生精细胞代谢缺陷相关的蛋白第63-64页
        3.4.5 相关差异表达蛋白的ELISA验证第64-65页
4 犏牛不同发育阶段(P1,P2,P3)的差异表达蛋白比较分析第65-78页
    4.1 实验材料第65页
        4.1.1 实验动物睾丸组织的采集第65页
        4.1.2 主要仪器与设备第65页
        4.1.3 主要工具酶及试剂第65页
    4.2 方法第65-66页
    4.3 结果与分析第66-75页
        4.3.1 不同发育阶段的差异表达蛋白第66-69页
        4.3.2 与P1相比,P2和P3阶段共同差异表达蛋白第69-72页
        4.3.3 与P1相比,在P2和P3阶段共同差异表达蛋白的功能分析第72-75页
    4.4 讨论第75-78页
结论第78-79页
致谢第79-80页
参考文献第80-88页
攻读学位期间发表的与学位论文内容相关的学术论文及研究成果第88页

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