摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
1 绪论 | 第14-21页 |
1.1 犏牛的基本概况及其研究现状 | 第14-17页 |
1.1.1 犏牛的基本概况 | 第14-15页 |
1.1.2 犏牛雄性不育机制研究现状 | 第15-17页 |
1.2 蛋白质组学研究概况 | 第17-20页 |
1.2.1 蛋白质组学概念及主要研究内容 | 第17页 |
1.2.2 蛋白质组学主要技术 | 第17-18页 |
1.2.3 蛋白质组学研究的新技术 | 第18页 |
1.2.4 iTRAQ定量蛋白质组学原理 | 第18-19页 |
1.2.5 iTRAQ技术的优势 | 第19-20页 |
1.3 犏牛雄性不育研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 犏牛和牦牛睾丸解剖组织结构研究 | 第21-27页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 动物样品的采集 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
2.1.3 主要试剂及配制 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-25页 |
2.4 讨论 | 第25-27页 |
3 犏牛与牦牛睾丸蛋白组学比较分析 | 第27-65页 |
3.1 实验材料 | 第27-29页 |
3.1.1 实验动物睾丸组织的采集 | 第27页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
3.1.3 主要工具酶及试剂 | 第28-29页 |
3.2. 方法 | 第29-36页 |
3.2.1 睾丸组织蛋白提取 | 第29-30页 |
3.2.2 蛋白质浓度Bradford定量 | 第30页 |
3.2.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
3.2.4 蛋白质酶解 | 第31页 |
3.2.5 iTRAQ标记 | 第31-32页 |
3.2.6 强阳离子交换色谱(Strong Cation Exchange chromatographic, SCX)分离 | 第32页 |
3.2.7 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MSMS分析 | 第32-33页 |
3.2.8 标准生物信息分析流程 | 第33-34页 |
3.2.9 犏牛雄性不育相关蛋白表达水平的ELISA分析方法 | 第34-36页 |
3.2.10 ELISA实验数据处理 | 第36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-61页 |
3.3.1 蛋白定量结果 | 第36-38页 |
3.3.2 显著差异蛋白统计 | 第38页 |
3.3.3 蛋质丰度分布结果 | 第38-40页 |
3.3.4 犏牛和牦牛睾丸组织中差异表达蛋白统计分析 | 第40-47页 |
3.3.5 差异表达蛋白的功能分析 | 第47-49页 |
3.3.6 差异表达蛋白GO分析 | 第49-56页 |
3.3.7 差异表达蛋白的Pathway富集分析 | 第56-59页 |
3.3.8 相关差异表达蛋白表达水平的ELISA分析 | 第59-61页 |
3.4 讨论 | 第61-65页 |
3.4.1 在犏牛睾丸中上调的蛋白质可能导致生精小管结构异常 | 第61-62页 |
3.4.2 直接参与精子生成过程的调节蛋白 | 第62-63页 |
3.4.3 一些可能与多种应激相关的差异蛋白 | 第63页 |
3.4.4 在精子发生过程中,有可能与生精细胞代谢缺陷相关的蛋白 | 第63-64页 |
3.4.5 相关差异表达蛋白的ELISA验证 | 第64-65页 |
4 犏牛不同发育阶段(P1,P2,P3)的差异表达蛋白比较分析 | 第65-78页 |
4.1 实验材料 | 第65页 |
4.1.1 实验动物睾丸组织的采集 | 第65页 |
4.1.2 主要仪器与设备 | 第65页 |
4.1.3 主要工具酶及试剂 | 第65页 |
4.2 方法 | 第65-66页 |
4.3 结果与分析 | 第66-75页 |
4.3.1 不同发育阶段的差异表达蛋白 | 第66-69页 |
4.3.2 与P1相比,P2和P3阶段共同差异表达蛋白 | 第69-72页 |
4.3.3 与P1相比,在P2和P3阶段共同差异表达蛋白的功能分析 | 第72-75页 |
4.4 讨论 | 第75-78页 |
结论 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
攻读学位期间发表的与学位论文内容相关的学术论文及研究成果 | 第88页 |