摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
·背景知识介绍 | 第9-11页 |
·线粒体功能简述 | 第11-12页 |
·SIRT3功能研究进展 | 第12-16页 |
·SIRT3多剪切体 | 第12-13页 |
·SIRT3蛋白功能总结 | 第13-16页 |
·SIRT4功能研究进展 | 第16页 |
·SIRT5功能研究进展 | 第16-17页 |
·SIRT3,4,5的功能总结 | 第17-18页 |
·NAD~+在线粒体中的代谢 | 第18-19页 |
·总结与展望 | 第19-20页 |
第二章 材料和方法 | 第20-29页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·入门载体的构建 | 第22-24页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·PCR及产物回收 | 第23-24页 |
·Entry反应 | 第24页 |
·转化及阳性克隆鉴定 | 第24页 |
·表达载体的构建 | 第24-25页 |
·转基因和筛选 | 第25-26页 |
·电转化 | 第25页 |
·转基因 | 第25-26页 |
·筛选 | 第26页 |
·种子萌发和表型观察 | 第26页 |
·幼苗高糖处理 | 第26页 |
·半定量检测mRNA表达 | 第26页 |
·葡萄糖含量的测定 | 第26-27页 |
·葡萄糖的提取 | 第26-27页 |
·葡萄糖含量的测定方法 | 第27页 |
·同工酶实验 | 第27-29页 |
·同工酶蛋白提取 | 第27页 |
·蛋白浓度测定 | 第27-28页 |
·非变性蛋白电泳 | 第28页 |
·凝胶显色 | 第28-29页 |
第三章 结果和分析 | 第29-40页 |
·AtSIRT1不同转录本及表达特点 | 第29-30页 |
·AtSIRT1各转录本的亚细胞定位及表达模式 | 第30-32页 |
·T-DNA突变体和过量表达株系鉴定 | 第32-35页 |
·AtSIRT1各株系表型观察分析 | 第35-37页 |
·种子萌发率比较 | 第35页 |
·幼苗表型观察分析 | 第35-37页 |
·部分AtSIRT1过量表达株系对高糖敏感 | 第37页 |
·AtSIRT1各株系葡萄糖含量的测定分析 | 第37-38页 |
·AtSIRT1各株系谷氨酸脱氢酶(GDH)的活性比较 | 第38-40页 |
第四章 讨论 | 第40-44页 |
参考文献 | 第44-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附录 | 第53-56页 |