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拟南芥AtSIRT1基因的功能初探

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-20页
   ·背景知识介绍第9-11页
   ·线粒体功能简述第11-12页
   ·SIRT3功能研究进展第12-16页
     ·SIRT3多剪切体第12-13页
     ·SIRT3蛋白功能总结第13-16页
   ·SIRT4功能研究进展第16页
   ·SIRT5功能研究进展第16-17页
   ·SIRT3,4,5的功能总结第17-18页
   ·NAD~+在线粒体中的代谢第18-19页
   ·总结与展望第19-20页
第二章 材料和方法第20-29页
   ·实验材料第20-22页
   ·入门载体的构建第22-24页
     ·引物设计第22-23页
     ·PCR及产物回收第23-24页
     ·Entry反应第24页
     ·转化及阳性克隆鉴定第24页
   ·表达载体的构建第24-25页
   ·转基因和筛选第25-26页
     ·电转化第25页
     ·转基因第25-26页
     ·筛选第26页
   ·种子萌发和表型观察第26页
   ·幼苗高糖处理第26页
   ·半定量检测mRNA表达第26页
   ·葡萄糖含量的测定第26-27页
     ·葡萄糖的提取第26-27页
     ·葡萄糖含量的测定方法第27页
   ·同工酶实验第27-29页
     ·同工酶蛋白提取第27页
     ·蛋白浓度测定第27-28页
     ·非变性蛋白电泳第28页
     ·凝胶显色第28-29页
第三章 结果和分析第29-40页
   ·AtSIRT1不同转录本及表达特点第29-30页
   ·AtSIRT1各转录本的亚细胞定位及表达模式第30-32页
   ·T-DNA突变体和过量表达株系鉴定第32-35页
   ·AtSIRT1各株系表型观察分析第35-37页
     ·种子萌发率比较第35页
     ·幼苗表型观察分析第35-37页
   ·部分AtSIRT1过量表达株系对高糖敏感第37页
   ·AtSIRT1各株系葡萄糖含量的测定分析第37-38页
   ·AtSIRT1各株系谷氨酸脱氢酶(GDH)的活性比较第38-40页
第四章 讨论第40-44页
参考文献第44-52页
致谢第52-53页
附录第53-56页

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