| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| ·链格孢菌研究概况 | 第11-16页 |
| ·链格孢菌的危害 | 第11-12页 |
| ·芸薹生链格孢菌的危害 | 第12页 |
| ·芸薹生链格孢菌病害的综合防治 | 第12-14页 |
| ·链格孢属真菌的致病性机制 | 第14-16页 |
| ·真菌蛋白激酶的研究现状 | 第16-19页 |
| ·蛋白激酶在信号转导途径中的作用与意义 | 第16页 |
| ·蛋白激酶的分类研究 | 第16-17页 |
| ·丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen Activated Protein Kinase, MAPK） | 第17页 |
| ·真菌MAPK信号转导途径的研究现状 | 第17-19页 |
| ·真菌MAPK信号转导途径三级激酶特异性互作机制 | 第19-24页 |
| ·支架蛋白的研究 | 第20-24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-44页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·供试菌株 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25页 |
| ·酶和主要的试剂 | 第25页 |
| ·仪器与设备 | 第25页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-44页 |
| ·基因组DNA的提取（CTAB/NaCl法） | 第26-27页 |
| ·cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·引物设计及Ste5基因克隆 | 第28-29页 |
| ·PCR产物回收及测序 | 第29-30页 |
| ·基因序列分析 | 第30-31页 |
| ·打靶载体的构建 | 第31-35页 |
| ·原生质体转化 | 第35-36页 |
| ·AbSte5转化子的筛选验证 | 第36-37页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的southern杂交 | 第37-40页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的性状功能研究 | 第40-41页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的互补研究 | 第41-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-60页 |
| ·A.brassicicola AbSte5基因的克隆 | 第44-46页 |
| ·A.brassicicola Ab Ste5基因的查找 | 第44-45页 |
| ·A.brassicicola蛋白激酶Ab Ste5基因的克隆 | 第45-46页 |
| ·基因序列分析 | 第46-47页 |
| ·AbSte5基因的保守区分析 | 第46页 |
| ·相似性比对 | 第46-47页 |
| ·AbSte5基因缺失突变载体（打靶载体）的构建及验证 | 第47-50页 |
| ·质粒的酶切 | 第48-49页 |
| ·打靶载体菌落PCR验证 | 第49-50页 |
| ·打靶片段的PCR扩增 | 第50页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的筛选和验证 | 第50-52页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的PCR验证 | 第50-51页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的RT-PCR验证 | 第51-52页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的Southern杂交 | 第52-53页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的互补体验证 | 第53-54页 |
| ·AbSte5全基因的克隆 | 第53页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的互补体验证 | 第53-54页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的生物学性状检测 | 第54-60页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的菌落表型观察 | 第54-57页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的分生孢子观察 | 第57-58页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的致病性检测 | 第58-59页 |
| ·AbSte5基因缺失突变体的黑色素定量分析 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| ·关于Ste5支架蛋白的研究 | 第60页 |
| ·菌体总RNA提取 | 第60页 |
| ·AbSte5基因的功能推测 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
