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利用RNAi技术抗棉蚜的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
缩略词及英汉对照第10-11页
第一章 文献综述第11-24页
   ·蚜虫简介及其危害第11-12页
   ·传统抗蚜方法第12页
     ·植物自身的抗生性机制第12页
     ·天敌的防治第12页
     ·药物防治第12页
   ·植物基因工程抗虫第12-15页
     ·Bt抗虫棉第13页
     ·蛋白酶抑制剂第13-15页
     ·外源凝集素第15页
   ·RNA技术抗虫第15-20页
     ·RNA干扰作用第15-18页
     ·RNAi的抗虫研究第18页
     ·RNAi作用的系统性第18-19页
     ·昆虫的dsRNA饲喂实验第19-20页
   ·利用RNAi培育具有抗虫性转基因植物的研究第20页
   ·转基因植物体内dsRNA的表达及其在昆虫体内的运输第20-24页
第二章 干扰载体的构建第24-39页
   ·干扰载体的基本组成及步骤介绍第24-25页
     ·干扰载体的组成第24页
     ·构建步骤第24-25页
     ·干扰基因的选择第25页
   ·材料与试剂第25页
     ·棉蚜第25页
     ·菌株与质粒第25页
     ·主要试剂第25页
   ·主要仪器设备第25-26页
   ·方法第26-32页
     ·棉蚜RNA的提取及cDNA的合成第26页
     ·棉蚜基因Cath5,R18,VA,VA2,DL干扰片段的克隆第26-27页
     ·ToMV病毒的起始组装序列(OAS)和CP蛋白基因以及NOST终止子序列的扩增第27-28页
     ·PCR扩增产物的回收第28-29页
     ·载体构建步骤第29-32页
     ·载体构建步骤第32页
   ·结果分析第32-39页
     ·干扰片段以及NOS-T、CP和OAS的扩增第32-34页
     ·中间表达载体的构建第34-38页
     ·干扰表达载体的构建第38-39页
第三章 农杆菌转化拟南芥及其鉴定第39-47页
   ·实验方法第39-41页
     ·农杆菌GV3101的电击转化第39页
     ·农杆菌转化子的鉴定第39页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第39-40页
     ·阳性转化子的筛选第40页
     ·阳性植株的鉴定第40-41页
   ·结果与分析第41-47页
     ·农杆菌转化第41-43页
     ·转基因拟南芥的获得和鉴定第43-47页
第四章 转基因拟南芥的表达分析第47-52页
   ·实验材料及试剂第47页
     ·实验材料第47页
     ·主要试剂第47页
   ·实验方法第47-50页
     ·RT-PCR第47-48页
     ·Northern检测RNA水平的表达第48-50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·RT-PCR第50-51页
     ·Northern检测分析第51-52页
第五章 转基因拟南芥的抗蚜效果检测第52-54页
   ·实验材料第52页
   ·实验方法第52页
   ·结果分析第52-54页
第六章 结果与讨论第54-55页
参考文献第55-60页
附录第60-63页
致谢第63-64页
作者简介第64-65页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第65页

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