| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 缩略词及英汉对照 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-33页 |
| ·稻瘟菌抗性及EDR1,EDR2作用研究进展 | 第16-24页 |
| ·稻瘟菌侵染过程 | 第16-17页 |
| ·稻瘟菌的主要防治方法 | 第17页 |
| ·植物对病害的防御系统 | 第17-19页 |
| ·参与植物防御的信号分子 | 第19-21页 |
| ·水稻对稻瘟菌抗性分子机制研究进展 | 第21页 |
| ·稻瘟菌与拟南芥互作 | 第21-22页 |
| ·EDR1作用机理 | 第22-23页 |
| ·EDR2作用机理 | 第23-24页 |
| ·模拟病斑突变体研究进展 | 第24-30页 |
| ·细胞程序性死亡 | 第25页 |
| ·模拟病斑突变体 | 第25-27页 |
| ·模拟病斑突变体研究进展 | 第27-30页 |
| ·拟南芥基因的图位克隆(map-based cloning)技术 | 第30-31页 |
| ·图位克隆原理 | 第30页 |
| ·图位克隆技术 | 第30-31页 |
| ·本课题意义 | 第31-33页 |
| 2 实验材料 | 第33-39页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株及质粒 | 第33页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·质粒 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·培养基、试剂配制 | 第34-37页 |
| ·MS培养基母液配制方法 | 第34-35页 |
| ·液体LB培养基 | 第35页 |
| ·固体LB培养基 | 第35页 |
| ·质粒提取溶液 | 第35页 |
| ·TE溶液 | 第35-36页 |
| ·X-gal(20mg/ml) | 第36页 |
| ·50×TAE | 第36页 |
| ·拟南芥总DNA提取缓冲液 | 第36页 |
| ·GUS染液 | 第36-37页 |
| ·所用网站及软件 | 第37页 |
| ·所用的软件 | 第37页 |
| ·所用的网站 | 第37页 |
| ·实验引物 | 第37-39页 |
| ·半定量PCR引物 | 第37-38页 |
| ·构建载体引物 | 第38-39页 |
| 3 实验方法 | 第39-56页 |
| ·拟南芥播种 | 第39页 |
| ·拟南芥生长条件 | 第39页 |
| ·拟南芥突变体的形态学观察 | 第39页 |
| ·转基因植株形态与生长观察 | 第39-40页 |
| ·稻瘟菌生长条件 | 第40页 |
| ·接种稻瘟 | 第40页 |
| ·观察表型 | 第40页 |
| ·DAB(二氨基联苯胺,Diaminobenzidine)染色,观察过氧化物积累 | 第40页 |
| ·苯胺蓝(aniline blue)染色,观察胼胝质积累 | 第40-41页 |
| ·台盼蓝染色 | 第41页 |
| ·水煮法提取拟南芥DNA | 第41页 |
| ·CTAB法提取拟南芥DNA | 第41页 |
| ·提取拟南芥RNA | 第41-42页 |
| ·反转录 | 第42页 |
| ·半定量PCR | 第42-43页 |
| ·白粉菌培养条件 | 第43页 |
| ·拟南芥抗白粉菌实验 | 第43页 |
| ·抗盐分析 | 第43-44页 |
| ·突变性状的遗传分析 | 第44页 |
| ·图位克隆群体的构建 | 第44-45页 |
| ·突变基因的初定位 | 第45-48页 |
| ·拟南芥共有5条染色体 | 第45页 |
| ·PCR扩增 | 第45-47页 |
| ·突变基因与已知分子标记连锁关系的确定 | 第47-48页 |
| ·突变基因的精细定位 | 第48-50页 |
| ·扩大F_2遗传群体 | 第48页 |
| ·精细定位分子标记 | 第48-49页 |
| ·dCAPs标记的引物的设计 | 第49页 |
| ·重组子的PCR及酶切结果检测 | 第49页 |
| ·突变体后代表型的验证 | 第49-50页 |
| ·测序,检测突变基因 | 第50-51页 |
| ·设计引物 | 第50页 |
| ·PCR扩增 | 第50页 |
| ·PCR产物纯化 | 第50-51页 |
| ·序列测定 | 第51页 |
| ·植物互补载体pKAMBIA2300的构建 | 第51-52页 |
| ·载体构建策略 | 第51页 |
| ·表达载体的PCR鉴定 | 第51-52页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第52页 |
| ·植物表达载体pMDC83-GFP的构建 | 第52-53页 |
| ·载体构建策略 | 第52页 |
| ·表达载体的PCR鉴定 | 第52-53页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第53页 |
| ·植物表达载体pMDC163-GUS的构建 | 第53-54页 |
| ·载体构建策略 | 第53-54页 |
| ·表达载体的PCR鉴定 | 第54页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第54页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第54页 |
| ·Dipping法转化 | 第54页 |
| ·转基因拟南芥植株筛选 | 第54-55页 |
| ·转基因植株形态与生长观察 | 第55页 |
| ·LIN2蛋白的亚细胞定位 | 第55页 |
| ·LIN2蛋白的组织定位 | 第55-56页 |
| 4 实验结果与分析 | 第56-83页 |
| ·EDR1,EDR2抗病分析 | 第56-64页 |
| ·拟南芥不同的生态型及突变体对于Y34的感病程度有差异 | 第56-57页 |
| ·鉴定SA途径单突在非宿主抗性中的作用 | 第57-58页 |
| ·双突接菌鉴定SA途径基因对于EDR1作用的影响 | 第58-60页 |
| ·双突接菌鉴定SA途径基因对于EDR2作用的影响 | 第60页 |
| ·DAB(diaminoben-zidine)染色,观察活性氧积累 | 第60页 |
| ·荧光染料苯胺蓝染色,观察胼胝质积累情况 | 第60-63页 |
| ·接菌后抗病基因的诱导表达情况 | 第63页 |
| ·台盼蓝染色,观察菌丝生长情况 | 第63-64页 |
| ·模拟病斑突变体表型观察 | 第64-66页 |
| ·突变体的形态学观察 | 第64-66页 |
| ·组织化学染色 | 第66页 |
| ·模拟病斑突变体的抗病、抗逆分析 | 第66-69页 |
| ·抗稻瘟菌实验 | 第66-67页 |
| ·抗白粉菌实验 | 第67-68页 |
| ·盐胁迫实验 | 第68-69页 |
| ·模拟病斑突变体基因定位 | 第69-74页 |
| ·突变性状的遗传分析 | 第69-70页 |
| ·克隆群体的构建 | 第70页 |
| ·突变基因初定位 | 第70-71页 |
| ·突变基因的精细定位 | 第71页 |
| ·设计引物,测序 | 第71-72页 |
| ·序列保守性分析 | 第72-74页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第74-78页 |
| ·互补表达载体pKAMBIA1300-HB的获得 | 第74页 |
| ·植物表达载体pKAMBIA1300-HB转化农杆菌GV3101 | 第74-75页 |
| ·表达载体pMDC83-GFP的获得 | 第75-76页 |
| ·植物表达载体pMDC83-GFP转化农杆菌GV3101 | 第76页 |
| ·表达载体pMDC163-GUS的获得 | 第76-77页 |
| ·植物表达载体pMDC163-GUS转化农杆菌GV3101 | 第77-78页 |
| ·遗传转化研究 | 第78-80页 |
| ·不同载体对拟南芥的转化及转基因植株的筛选 | 第78页 |
| ·F1代表型观察 | 第78页 |
| ·LIN2蛋白的亚细胞定位 | 第78-79页 |
| ·LIN2蛋白的组织定位 | 第79-80页 |
| ·结果分析 | 第80-83页 |
| ·EDR1、EDR2在拟南芥防御稻瘟菌过程中的作用分析 | 第80-81页 |
| ·模拟病斑突变体抗胁迫分析 | 第81-82页 |
| ·模拟病斑突变体基因定位分析 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 附录 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 简历 | 第94-95页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第95页 |
