| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1 体外表达系统 | 第10-11页 |
| ·原核表达系统 | 第10页 |
| ·真核表达系统 | 第10页 |
| ·无细胞表达系统 | 第10-11页 |
| 2 笛鲷属鱼类的研究 | 第11-12页 |
| ·笛鲷属鱼类的简介 | 第11页 |
| ·笛鲷属鱼类的研究进展 | 第11-12页 |
| 3 视蛋白 | 第12-15页 |
| ·视蛋白的简介 | 第12-14页 |
| ·视蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
| ·鱼类视蛋白的研究进展 | 第14页 |
| ·视蛋白的体外表达 | 第14-15页 |
| 4 本论文的内容和目标概述 | 第15-16页 |
| 第二章 红鳍笛鲷长波长敏感视蛋白的原核表达载体的构建 | 第16-28页 |
| 1 实验材料、试剂及仪器 | 第16-18页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·菌株和质粒 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第17页 |
| ·溶液及其配制方法 | 第17-18页 |
| ·培养基及其配制方法 | 第18页 |
| 2 实验方法 | 第18-22页 |
| ·红鳍笛鲷长波长敏感性视蛋白（LWS）原核表达载体的构建 | 第18-22页 |
| ·引物设计 | 第18页 |
| ·红鳍笛鲷视网膜cDNA的制备 | 第18-19页 |
| ·红鳍笛鲷长波长敏感性视蛋白（LWS）基因的克隆。 | 第19-21页 |
| ·重组LWS融合表达质粒的构建 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-27页 |
| ·红鳍笛鲷总RNA的提取 | 第22页 |
| ·红鳍笛鲷LWS基因编码区cDNA的扩增 | 第22-23页 |
| ·红鳍笛鲷ORF框克隆及测序 | 第23-24页 |
| ·表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·重组质粒测序结果分析 | 第26-27页 |
| 4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 红鳍笛鲷和金焰笛鲷长波长敏感性视蛋白（LWS）与视杆蛋白（RH）的真核表达 | 第28-51页 |
| 1 实验材料、试剂及仪器 | 第28-30页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·溶液及其配制方法 | 第29页 |
| ·培养基及其配制方法 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷LWS和RH真核表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷LWS和RH基因cDNA扩增与克隆 | 第30页 |
| ·巴斯德毕赤酵母感受态的制备 | 第30页 |
| ·重组质粒的线性化 | 第30-31页 |
| ·电击转化 | 第31页 |
| ·重组子筛选 | 第31-32页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷LWS和RH重组毕赤酵母的诱导表达 | 第32页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-50页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷视网膜RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·目的基因编码区cDNA的扩增 | 第34-36页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷LWS基因编码区cDNA的扩增 | 第34-35页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷RH基因编码区cDNA的扩增 | 第35-36页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷LWS基因重组质粒的构建 | 第36-40页 |
| ·重组质粒pPICZɑA-LWS-Ler和pPICZɑA-LWS-Lfu的构建 | 第36-38页 |
| ·重组质粒的测序结果分析 | 第38-40页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷RH基因重组质粒的构建 | 第40-45页 |
| ·重组质粒pPICZαA-RH-Ler和pPICZαA-RH-Lfu的构建 | 第40-42页 |
| ·重组质粒pPICZαA-LWS-Ler和pPICZαA-LWS-Lfu结果分析 | 第42-45页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷视蛋白LWS和RH表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷视蛋白LWS和RH的诱导表达 | 第46-50页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷视蛋白LWS的诱导表达 | 第46-48页 |
| ·红鳍笛鲷和金焰笛鲷视蛋白RH的诱导表达 | 第48-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-53页 |
| 1 G蛋白偶联受体体外表达 | 第51-52页 |
| ·G蛋白偶联受体 | 第51页 |
| ·GPCRs的体外表达系统选择 | 第51页 |
| ·视蛋白 | 第51-52页 |
| 2 红鳍笛鲷和金焰笛鲷视蛋白的表达 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 导师简介 | 第61页 |
