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热激胁迫下拟南芥Capping蛋白(AtCP)α、β亚基体内功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
缩写表第9-16页
第一章 文献综述第16-46页
 1. 植物抵御热激胁迫的研究进展第16-23页
   ·植物如何抵御非生物胁迫第16-17页
   ·植物抵御热激胁迫的分子机制研究及国内外研究进展第17-23页
     ·热激胁迫对植物生理生化的影响第17-18页
     ·植物耐热性及如何抵御热激胁迫的机制第18-23页
       ·热激蛋白第18-20页
       ·热转录因子第20-21页
       ·细胞信号传导与热激胁迫的关系第21-22页
       ·激素与热激胁迫的关系第22页
       ·热激胁迫对细胞膜结构的影响第22-23页
       ·其它与热激胁迫相关的因素第23页
 2. 植物细胞微丝骨架第23-28页
   ·微丝骨架介绍第23-26页
     ·细胞骨架概括第23-24页
     ·微丝骨架的结构和功能第24-26页
   ·肌动蛋白结合蛋白简介第26-27页
   ·微丝动态变化与非生物胁迫的关系第27-28页
 3. Capping蛋白的分子结构、生理功能以及调控机制第28-44页
   ·Capping蛋白生化特性第29-33页
     ·Capping蛋白的生化特性第29-30页
     ·Capping蛋白的生理活性第30页
     ·Capping蛋白在细胞中的研究第30-31页
     ·Capping蛋白的序列保守性和异型体第31-33页
   ·Capping蛋白与actin结合的机理第33-35页
     ·Capping蛋白结构研究第33-35页
     ·Capping蛋白C末端的移动性第35页
   ·Capping蛋白抑制因子与Capping蛋白的相互作用第35-39页
     ·多磷酸肌醇与Capping蛋白的相互作用第35-36页
     ·抑制因子与Capping蛋白结合的蛋白序列以及CARMIL,CKIP-1和CD2AP对Capping蛋白的抑制作用第36-37页
     ·间接作用于Capping蛋白的抑制因子第37-39页
     ·其它抑制因子第39页
   ·Capping蛋白在复杂细胞过程中的作用第39-42页
     ·基于肌动蛋白的质膜活力第39-40页
     ·Capping蛋白在横纹肌肌小节Z-line中的作用第40-41页
     ·Capping蛋白在果蝇的发育中的重要作用第41页
     ·Capping蛋白与动力蛋白的关系第41-42页
   ·植物中capping蛋白的研究进展第42-43页
   ·Capping蛋白研究展望第43-44页
 4. 本实验的研究目的和意义第44-46页
第二章 材料与方法第46-57页
 1. 实验材料第46-48页
   ·动植物材料第46页
   ·载体、菌株及工具酶第46页
   ·实验所需溶液第46-48页
 2. 实验方法第48-57页
   ·拟南芥植株的培养种植第48页
   ·植物总RNA的提取及cDNA的克隆第48-49页
     ·植物总RNA提取及反转录第48-49页
     ·PCR扩增第49页
   ·AtCP基因体内不同表达模式研究的相关方法第49-55页
     ·载体构建第49-50页
     ·Realtime PCR第50-51页
     ·蛋白纯化及抗体制备第51-53页
       ·蛋白纯化第51-52页
       ·多克隆抗体制备及校价检测第52-53页
     ·植物总蛋白提取、抗体制备及western blot分析第53-54页
       ·植物总蛋白提取第53页
       ·抗体纯化第53-54页
       ·Western blot分析第54页
     ·农杆菌介导的拟南芥植株转化及纯合体的筛选第54-55页
     ·GUS染色第55页
     ·亚细胞定位第55页
   ·植物基因组DNA提取第55页
   ·拟南芥幼苗热激处理第55-56页
   ·微丝荧光标记第56页
   ·图像处理和数据分析第56-57页
第三章 结果与分析第57-79页
 1. AtCPA、AtCPB全长CDS的克隆第57-58页
   ·拟南芥植株叶片总RNA的提取及质量鉴定第57页
   ·AtCPA全长CDS的克隆第57-58页
   ·AtCPB1、AtCPB2全长CDS的克隆第58页
 2. AtCPA、AtCPB在体内具有不同的表达模式第58-67页
   ·转录水平分析AtCPA、AtCPB在拟南芥植株不同组织中的表达量第60-61页
   ·蛋白水平分析验证AtCPA、AtCPB在拟南芥植株体内不同的表达模式第61-64页
     ·AtCPA、AtCPB重组蛋白纯化,多克隆抗体制备及效价检测第61-63页
     ·Western blot分析验证AtCPA、AtCPB在体内具有不同的表达模式第63-64页
   ·AtCPA、AtCPB启动子GUS活性的组织特异性分析第64-67页
     ·AtCPA、AtCPB启动子序列克隆第64-65页
     ·AtCPA、AtCPB启动子GUS活性的组织特异性分析第65-67页
   ·AtCPA、AtCPB的亚细胞定位第67页
 3. T-DNA插入突变体表型观察第67-71页
   ·纯合突变体鉴定第68-69页
   ·T-DNA插入突变体精确插入位点的确定第69-70页
   ·Realtime PCR检测T-DNA插入突变体植株第70-71页
   ·T-DNA插入突变体的表型观察第71页
 4. AtCPA、AtCPB在热激胁迫中的功能研究第71-76页
   ·生物信息学预测第71-73页
   ·热激处理下AtCPA、AtCPB的表达量变化第73-75页
   ·AtCPB T-DNA插入突变体植株具有增强的耐热性第75-76页
 5. AtCPA、AtCPB T-DNA插入突变体热激处理后的微丝变化第76-79页
第四章 讨论第79-83页
 1. 拟南芥中可能存在两种AtCPB的异型体第79-80页
 2. AtCPA和AtCPB在体内具有不同的表达模式第80-81页
 3. 微丝变化与热激的关系第81-83页
第五章 结论第83-85页
参考文献第85-93页
致谢第93-94页

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