摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-18页 |
1.立题依据及意义 | 第11-12页 |
2.文献综述 | 第12-18页 |
材料与方法 | 第18-38页 |
1. 实验材料 | 第18-22页 |
2. 试验设计 | 第22页 |
3. 实验方法 | 第22-38页 |
结果与分析 | 第38-61页 |
1. 产木聚糖酶工程菌的构建 | 第38-46页 |
·木聚糖酶基因的克隆 | 第38-43页 |
·木聚糖酶基因与表达载体 pPIC9K 连接 | 第43-44页 |
·工程菌的筛选 | 第44-46页 |
2. 重组工程菌产木聚糖酶条件的优化 | 第46-61页 |
·木糖标准曲线的制作 | 第46-47页 |
·重组木聚糖酶的酶学性质 | 第47-49页 |
·酶的最适反应 pH 及 pH 稳定性 | 第47-48页 |
·酶的最适反应温度及热稳定性 | 第48-49页 |
·单因素实验 | 第49-52页 |
·大豆蛋白胨的单因素实验 | 第49页 |
·酵母浸膏的单因素实验 | 第49-50页 |
·甲醇的单因素实验 | 第50页 |
·硫酸镁的单因素实验 | 第50-51页 |
·硫酸钙的单因素实验 | 第51页 |
·硫酸铵的单因素实验 | 第51页 |
·诱导初始 pH 的单因素实验 | 第51-52页 |
·Plackett-Burman 试验筛选影响产木聚糖酶酶的主要因素 | 第52-53页 |
·最陡爬坡实验 | 第53-54页 |
·响应面优化木聚糖发酵培养基 | 第54-58页 |
·Box-Behnken 设计 | 第54-55页 |
·回归方程的建立及分析 | 第55-56页 |
·响应面分析及最优培养基成分的确定 | 第56-58页 |
·模型验证 | 第58页 |
·工程菌株在优化前及优化后的发酵培养基中生长对比 | 第58-59页 |
·优化发酵培养基表达木聚糖酶 | 第59-61页 |
结论与讨论 | 第61-64页 |
1.木聚糖酶基因的全合成 | 第61页 |
2.构建高产木聚糖酶工程菌 | 第61页 |
3.木聚糖酶的酶学性质 | 第61-62页 |
4.响应面法优化发酵条件 | 第62页 |
5.SDS-PAGE 检测表达的蛋白 | 第62页 |
6.实验创新性 | 第62页 |
7.实验展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
致谢 | 第67页 |