英文缩略词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-18页 |
1 产肠毒素大肠杆菌性仔猪腹泻主要毒力因子研究进展 | 第10-12页 |
·粘附素 | 第10页 |
·肠毒素 | 第10-11页 |
·致病机理 | 第11页 |
·ETEC 的检测 | 第11-12页 |
2 大肠杆菌的耐药机制 | 第12-13页 |
·天然性耐药 | 第12页 |
·获得性耐药 | 第12-13页 |
3 大肠杆菌多重耐药性与整合子的研究 | 第13-18页 |
·大肠杆菌多重耐药耐药现状 | 第13页 |
·整合子-基因盒系统 | 第13-15页 |
·整合子介导的大肠埃希菌耐药 | 第15-16页 |
·整合子-基因盒系统的检测 | 第16-17页 |
·展望 | 第17-18页 |
第二部分 试验部分 | 第18-52页 |
试验一 猪产肠毒素性大肠杆菌多重 PCR 检测方法的建立 | 第18-31页 |
1 材料 | 第18-19页 |
·参考菌株 | 第18页 |
·病料来源 | 第18页 |
·主要培养基 | 第18页 |
·试剂 | 第18页 |
·仪器设备 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-22页 |
·引物设计与合成 | 第19页 |
·模板的制备 | 第19页 |
·PCR 扩增 | 第19-20页 |
·PCR 产物的纯化 | 第20页 |
·目的片段的连接与转化 | 第20页 |
·重组质粒的鉴定 | 第20-21页 |
·STa、LT 和 F4 单项 PCR 条件的优化 | 第21页 |
·STa、LT 和 F4 多重 PCR 条件的优化 | 第21-22页 |
3 结果 | 第22-29页 |
·单项 PCR 退火温度的确定 | 第22-23页 |
·单项 PCR 敏感性的确定 | 第23-25页 |
·单项 PCR 引物的特异性检测 | 第25-27页 |
·三重 PCR 退火温度的确定 | 第27页 |
·三重 PCR 扩增的灵敏性 | 第27-28页 |
·三重 PCR 扩增的特异性 | 第28页 |
·ETEC 标准菌 PCR 产物的测序结果 | 第28-29页 |
·临床分离菌株的检测 | 第29页 |
4 小结与讨论 | 第29-31页 |
试验二 江西产肠毒素大肠杆菌分离株的耐药性检测和分析 | 第31-40页 |
1 材料 | 第31页 |
·菌株与培养基 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
2 方法 | 第31页 |
3 结果与分析 | 第31-38页 |
·药敏试验结果 | 第31-33页 |
·产肠毒素大肠杆菌的耐药性分析 | 第33-34页 |
·产肠毒素大肠杆菌多重耐药分析 | 第34-37页 |
·交叉耐药分析 | 第37-38页 |
4 小结与讨论 | 第38-40页 |
试验三 整合子-基因盒系统的检测、定位与分析 | 第40-52页 |
1 材料 | 第40页 |
·菌株与培养基 | 第40页 |
·主要仪器与设备 | 第40页 |
·试剂 | 第40页 |
2 方法 | 第40-43页 |
·细菌总 DNA 模板的制备 | 第40页 |
·引物设计与合成 | 第40-41页 |
·PCR 扩增 | 第41-42页 |
·Ⅰ类整合子基因盒插入区 CS1 的测序 | 第42页 |
·Ⅰ型整合子-基因盒定位 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-50页 |
·产肠毒素大肠杆菌 Ⅰ 类和 Ⅱ 类整合酶基因的检测与分析 | 第43页 |
·qacE△ 1-sul1 基因的检测与分析 | 第43-44页 |
·整合子基因盒插入区 CS1 的分析 | 第44-46页 |
·菌株携带 Ⅰ 型整合子、耐药基因盒与耐药表型分析的关系 | 第46-48页 |
·Ⅰ 型整合子的定位 | 第48-50页 |
4 分析与讨论 | 第50-52页 |
全文总结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
致谢 | 第57页 |