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猪源产肠毒素大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及整合子介导的耐药性分析

英文缩略词表第1-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-10页
第一部分 文献综述第10-18页
 1 产肠毒素大肠杆菌性仔猪腹泻主要毒力因子研究进展第10-12页
   ·粘附素第10页
   ·肠毒素第10-11页
   ·致病机理第11页
   ·ETEC 的检测第11-12页
 2 大肠杆菌的耐药机制第12-13页
   ·天然性耐药第12页
   ·获得性耐药第12-13页
 3 大肠杆菌多重耐药性与整合子的研究第13-18页
   ·大肠杆菌多重耐药耐药现状第13页
   ·整合子-基因盒系统第13-15页
   ·整合子介导的大肠埃希菌耐药第15-16页
   ·整合子-基因盒系统的检测第16-17页
   ·展望第17-18页
第二部分 试验部分第18-52页
 试验一 猪产肠毒素性大肠杆菌多重 PCR 检测方法的建立第18-31页
  1 材料第18-19页
   ·参考菌株第18页
   ·病料来源第18页
   ·主要培养基第18页
   ·试剂第18页
   ·仪器设备第18-19页
  2 方法第19-22页
   ·引物设计与合成第19页
   ·模板的制备第19页
   ·PCR 扩增第19-20页
   ·PCR 产物的纯化第20页
   ·目的片段的连接与转化第20页
   ·重组质粒的鉴定第20-21页
   ·STa、LT 和 F4 单项 PCR 条件的优化第21页
   ·STa、LT 和 F4 多重 PCR 条件的优化第21-22页
  3 结果第22-29页
   ·单项 PCR 退火温度的确定第22-23页
   ·单项 PCR 敏感性的确定第23-25页
   ·单项 PCR 引物的特异性检测第25-27页
   ·三重 PCR 退火温度的确定第27页
   ·三重 PCR 扩增的灵敏性第27-28页
   ·三重 PCR 扩增的特异性第28页
   ·ETEC 标准菌 PCR 产物的测序结果第28-29页
   ·临床分离菌株的检测第29页
  4 小结与讨论第29-31页
 试验二 江西产肠毒素大肠杆菌分离株的耐药性检测和分析第31-40页
  1 材料第31页
   ·菌株与培养基第31页
   ·主要试剂第31页
  2 方法第31页
  3 结果与分析第31-38页
   ·药敏试验结果第31-33页
   ·产肠毒素大肠杆菌的耐药性分析第33-34页
   ·产肠毒素大肠杆菌多重耐药分析第34-37页
   ·交叉耐药分析第37-38页
  4 小结与讨论第38-40页
 试验三 整合子-基因盒系统的检测、定位与分析第40-52页
  1 材料第40页
   ·菌株与培养基第40页
   ·主要仪器与设备第40页
   ·试剂第40页
  2 方法第40-43页
   ·细菌总 DNA 模板的制备第40页
   ·引物设计与合成第40-41页
   ·PCR 扩增第41-42页
   ·Ⅰ类整合子基因盒插入区 CS1 的测序第42页
   ·Ⅰ型整合子-基因盒定位第42-43页
  3 结果与分析第43-50页
   ·产肠毒素大肠杆菌 Ⅰ 类和 Ⅱ 类整合酶基因的检测与分析第43页
   ·qacE△ 1-sul1 基因的检测与分析第43-44页
   ·整合子基因盒插入区 CS1 的分析第44-46页
   ·菌株携带 Ⅰ 型整合子、耐药基因盒与耐药表型分析的关系第46-48页
   ·Ⅰ 型整合子的定位第48-50页
  4 分析与讨论第50-52页
全文总结第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57页

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