| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 图和附表清单 | 第13-17页 |
| 主要符号对照表 | 第17-19页 |
| 第一章 引言 | 第19-47页 |
| 第一节 选题背景及意义 | 第19-23页 |
| 第二节 冠状病毒的研究简史、分类和引发的疾病 | 第23-28页 |
| ·冠状病毒的研究简史 | 第23页 |
| ·冠状病毒的分类 | 第23-26页 |
| ·冠状病毒引起的疾病 | 第26-27页 |
| ·冠状病毒引起的疾病的防治 | 第27-28页 |
| 第三节 冠状病毒的研究概况 | 第28-40页 |
| ·冠状病毒的基因组结构 | 第28-30页 |
| ·冠状病毒的生活周期 | 第30-33页 |
| ·冠状病毒的复制转录机制 | 第33-35页 |
| ·冠状病毒RTC的组成 | 第35-40页 |
| 第四节 MERS-CoV nsp5的研究意义 | 第40-45页 |
| ·冠状病毒nsp5的研究意义 | 第40-42页 |
| ·冠状病毒nsp5的研究现状 | 第42-43页 |
| ·冠状病毒nsp5抑制剂的研究现状 | 第43页 |
| ·冠状病毒nsp5及其抑制剂研究过程中的注意点 | 第43-45页 |
| ·MERS-CoV nsp5与N3复合物结构的研究意义 | 第45页 |
| 第五节 本课题的研究内容与意义 | 第45-46页 |
| 第六节 论文结构安排 | 第46-47页 |
| 第二章 MERS-CoV nsp5与抑制剂N3的复合物晶体制备 | 第47-69页 |
| 第一节 MERS-CoV nsp5的基本信息 | 第47-50页 |
| ·MERS-CoV nsp5的基因序列 | 第47页 |
| ·MERS-CoV nsp5的生物化学信息 | 第47-48页 |
| ·MERS-CoV nsp5折叠情况预测 | 第48-49页 |
| ·MERS-CoV nsp5的同源蛋白分析 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第二节 MERS-CoV nsp5基因的克隆与表达载体的优化 | 第50-54页 |
| ·MERS-CoV nsp5基因的获取 | 第50页 |
| ·表达系统的选择 | 第50页 |
| ·表达载体的选择 | 第50-52页 |
| ·重组质粒的构建 | 第52-54页 |
| 第三节 MERS-CoV nsp5重组蛋白的表达与纯化 | 第54-62页 |
| ·MERS-CoV nsp5重组蛋白的表达 | 第54-55页 |
| ·MERS-CoV nsp5重组蛋白的纯化 | 第55-62页 |
| 第四节 MERS-CoV nsp5蛋白的晶体生长与初步数据收集 | 第62-69页 |
| ·蛋白质结晶的基本原理 | 第62-65页 |
| ·MERS-CoV nsp5结晶条件的初步筛选和优化尝试 | 第65-66页 |
| ·MERS-CoV nsp5与N3复合物晶体的生长与优化 | 第66-69页 |
| 第三章 MERS-CoV nsp5-N3复合物的结构功能研究 | 第69-99页 |
| 第一节 结构解析原理简介 | 第69-74页 |
| ·相位问题的存在 | 第69-70页 |
| ·常用结构解析方法简介 | 第70-74页 |
| 第二节 MERS-CoV nsp5-N3复合物的结构解析 | 第74-81页 |
| ·数据收集和处理 | 第74-75页 |
| ·结构解析过程 | 第75-81页 |
| 第三节 MERS-CoV nsp5与N3复合物的结构分析 | 第81-94页 |
| ·MERS-CoV nsp5与N3的总体结构 | 第81-83页 |
| ·MERS-CoV nsp5与N3的结合情况分析 | 第83-94页 |
| 第四节 N3分子抑制MERS-CoV nsp5的酶活验证实验 | 第94-99页 |
| ·MERS-CoV nsp5的活性检测原理 | 第94页 |
| ·MERS-CoV nsp5的酶活实验方法 | 第94-96页 |
| ·N3对MERS-CoV nsp5的抑制活性 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-99页 |
| 第四章 SARS-CoV nsp13的晶体学研究 | 第99-121页 |
| 第一节 SARS-CoV nsp13的研究进展及意义 | 第99-101页 |
| ·SARS-CoV nsp13的功能研究进展 | 第99-100页 |
| ·SARS-CoV nsp13结构生物学研究的意义 | 第100-101页 |
| 第二节 SARS-CoV nsp13重组质粒的构建 | 第101-104页 |
| ·SARS-CoV nsp13基本信息分析 | 第101页 |
| ·SARS-CoV nsp13表达载体的选择 | 第101-102页 |
| ·SARS-CoV nsp13表达载体的构建 | 第102-104页 |
| 第三节 pGEX-6p-1-nsp13克隆的蛋白表达、纯化与结晶尝试 | 第104-107页 |
| ·pGEX-6p-1-nsp13克隆的蛋白表达与纯化 | 第104-106页 |
| ·pGEX-6p-1-nsp13野生型和突变体蛋白结晶尝试 | 第106-107页 |
| 第四节 pET-28a-nsp13克隆的蛋白表达、纯化与结晶 | 第107-111页 |
| ·pET-28a-nsp13克隆的蛋白表达与纯化 | 第107-109页 |
| ·pET-28a-nsp13蛋白的结晶 | 第109-111页 |
| 第五节 pET-28a'-nsp13克隆的蛋白表达、纯化与结晶 | 第111-114页 |
| ·pET-28a'-nsp13克隆的蛋白表达与纯化 | 第111-113页 |
| ·pET-28a'-nsp13蛋白的结晶 | 第113-114页 |
| 第六节 pET-28a-6×His-nsp13克隆的蛋白晶体制备与数据收集 | 第114-121页 |
| ·pET-28a-6×His-nsp13克隆的蛋白表达与纯化 | 第114-116页 |
| ·pET-28a-6×His-nsp13蛋白的结晶 | 第116-118页 |
| ·pET-28a-6×His-nsp13蛋白质晶体的数据收集和处理 | 第118-121页 |
| 第五章 结论 | 第121-122页 |
| 附录A MERS-CoV nsp5的编码碱基与氨基酸序列 | 第122-124页 |
| 附录B SARS-CoV nsp13的编码碱基与氨基酸序列 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第134页 |
