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抗虫基因对大豆遗传转化及转基因株系安全性评价

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
第1章 前言第13-25页
   ·研究目的及意义第13-14页
   ·文献综述第14-23页
     ·Bt 基因在作物抗虫转基因育种中的应用第14-18页
     ·大豆转基因育种研究进展第18-20页
     ·转基因大豆安全性评价研究进展第20-23页
   ·主要研究内容及技术路线第23-25页
     ·主要研究内容第23-24页
     ·技术路线第24-25页
第2章 cry1Iem 基因对大豆的遗传转化及转基因株系的培育第25-51页
   ·材料试剂及仪器第25-29页
     ·材料第25页
     ·试剂第25-28页
     ·仪器第28-29页
   ·试验方法第29-43页
     ·试剂盒法对大肠杆菌质粒提取第29-30页
     ·根癌农杆菌感受态细胞制备第30页
     ·PCR 及 RT-PCR 引物的设计第30页
     ·pCMBA 植物表达载体对农杆菌转化子的 PCR 检测第30-31页
     ·cry1Iem 基因对大豆的遗传转化第31-33页
     ·大豆植株基因组 DNA 提取第33-34页
     ·转 cry1Iem 基因大豆植株大豆植株 PCR 检测第34-35页
     ·转 cry1Iem 基因大豆植株 Southern Blot 检测第35-39页
     ·转 cry1Iem 基因大豆植株 RT-PCR 及 qPCR 检测第39-43页
   ·实验结果第43-50页
     ·植物表达载体 pCMBA 对农杆菌转化子的鉴定第43-45页
     ·大豆抗性植株的获得第45页
     ·转 cry1Iem 基因大豆株系的获得第45-47页
     ·cry1Iem 基因整合到转基因大豆基因组中拷贝数的确定第47-48页
     ·cry1Iem 基因在转大豆基因组中表达水平分析第48-50页
   ·本章小结第50-51页
第3章 转 cry2Aa9m 基因大豆株系遗传稳定性分析及安全性评价第51-64页
   ·试验材料第51-52页
     ·植物材料第51页
     ·植物表达载体图谱第51-52页
   ·试验方法第52-56页
     ·转 cry2Aa9m 基因植株 PCR 检测第52-53页
     ·转 cry2Aa9m 基因植株 RT-PCR 检测第53-54页
     ·转 cry2Aa9m 基因株系农艺性状调查第54-55页
     ·转 cry2Aa9m 基因株系环境适应能力与生存竞争能力调查第55页
     ·转 cry2Aa9m 基因大豆株系大豆食心虫抗性检测第55-56页
   ·试验结果第56-62页
     ·cry2Aa9m 基因在转基因大豆植株体内遗传稳定性分析第56-57页
     ·cry2Aa9m 基因在转基因大豆植株体内表达稳定性分析第57-58页
     ·转 cry2Aa9m 基因大豆株系农艺性状调查第58-60页
     ·转 cry2Aa9m 基因大豆株系环境适应能力及生存竞争性调查第60-61页
     ·转 cry2Aa9m 基因大豆株系大豆食心虫抗性检测第61-62页
   ·本章小结第62-64页
第4章 转 cry6Aa2m 基因大豆株系遗传稳定性分析及安全性评价第64-71页
   ·试验材料第64-65页
     ·植物材料第64页
     ·植物表达载体图谱第64-65页
   ·试验方法第65-67页
     ·转 cry6Aa2m 基因植株 PCR 检测第65-66页
     ·转 cry6Aa2m 基因植株 RT-PCR 检测第66页
     ·转 cry6Aa2m 基因株系农艺性状调查第66-67页
     ·转 cry6Aa2m 基因株系环境适应能力与生存竞争能力调查第67页
   ·试验结果第67-70页
     ·cry6Aa2m 基因在转基因大豆植株体内遗传稳定性分析第67-68页
     ·cry6Aa2m 基因在转基因大豆植株体内表达稳定性分析第68页
     ·转 cry6Aa2m 基因大豆株系农艺性状调查第68-69页
     ·转 cry6Aa2m 基因大豆株系环境适应能力及生存竞争性调查第69-70页
   ·本章小结第70-71页
第5章 转cry55Aa1m基因大豆株系遗传稳定性分析及安全性评价第71-79页
   ·试验材料第71页
     ·植物材料第71页
     ·植物表达载体图谱第71页
   ·试验方法第71-73页
     ·转 cry55Aa1m 基因植株 PCR 检测第71-72页
     ·转 cry55Aa1m 基因植株 RT-PCR 检测第72-73页
     ·转 cry55Aa1m 基因株系农艺性状调查第73页
     ·转 cry55Aa1m 基因株系环境适应能力与生存竞争能力调查第73页
   ·试验结果第73-78页
     ·cry55Aa1m 基因在转基因大豆植株体内遗传稳定性分析第73-74页
     ·cry55Aa1m 基因在转基因大豆植株体内表达稳定性分析第74-75页
     ·转 cry55Aa1m 基因大豆株系农艺性状调查第75-76页
     ·转 cry55Aa1m 基因大豆株系环境适应能力及生存竞争性调查第76-78页
   ·本章小结第78-79页
第6章 讨论第79-82页
   ·抗虫基因的选择第79页
   ·豆荚特异性启动子第79-80页
   ·外源基因在转基因植物中遗传稳定性第80页
   ·外源基因在转基因植物中的表达稳定性第80-81页
   ·转基因大豆农艺性状出现变异的原因第81-82页
第7章 结论第82-84页
   ·农杆菌介导大豆子叶节、种子法遗传转化及抗性植株再生第82页
   ·抗性植株分子生物学检测第82页
   ·转 cry2Aa9m、cry6Aa2m 及 cry55Aa1m 基因大豆株系的安全性评价第82-84页
参考文献第84-87页
致谢第87-88页
作者简介第88页

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