摘要 | 第1-16页 |
ABSTRACT | 第16-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-41页 |
·杀菌剂百菌清概述 | 第19-29页 |
·百菌清的理化性质 | 第19-20页 |
·百菌清毒性分析 | 第20-21页 |
·百菌清的作用机理 | 第21-24页 |
·百菌清的生产现状 | 第24页 |
·百菌清的应用 | 第24-25页 |
·百菌清的代谢 | 第25-27页 |
·百菌清对食品、环境的污染情况 | 第27-28页 |
·百菌清的检测标准 | 第28-29页 |
·农药残留免疫分析技术研究现状 | 第29-39页 |
·免疫分析技术概述 | 第29-30页 |
·免疫分析的基本方法 | 第30页 |
·酶免疫检测法(Enzyme immunoassay,EIA) | 第30-31页 |
·ELISA检测的基础研究 | 第31-36页 |
·免疫分析技术在杀菌剂残留检测中的应用 | 第36-39页 |
·立题依据 | 第39-41页 |
·研究目的与意义 | 第39-40页 |
·研究内容 | 第40-41页 |
第二章 百菌清半抗原的合成与表征 | 第41-57页 |
·材料 | 第41-42页 |
·试验仪器 | 第41页 |
·试验材料 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-45页 |
·半抗原CHT-NH2的制备与纯化 | 第42页 |
·半抗原CHT-OH-1的制备与纯化 | 第42-43页 |
·半抗原CHT-COOH-7的制备与纯化 | 第43页 |
·4-羟基百菌清(CHT-OH-2)的制备与纯化 | 第43页 |
·半抗原CHT-COOH-1,CHT-COOH-3,CHT-COOH-6的制备与纯化 | 第43-44页 |
·半抗原的表征 | 第44-45页 |
·结果与分析 | 第45-54页 |
·半抗原CHT-NH2的表征 | 第45-46页 |
·半抗原CHT-OH-1的表征 | 第46-47页 |
·半抗原CHT-COOH-7的表征 | 第47-49页 |
·4-羟基百菌清的表征 | 第49-50页 |
·半抗原CHT-COOH-1的表征 | 第50-51页 |
·半抗原CHT-COOH-3的表征 | 第51-53页 |
·半抗原CHT-COOH-6的表征 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
·反应产率的影响因素 | 第54-55页 |
·半抗原合成效果主要影响因素 | 第55-56页 |
·小结 | 第56-57页 |
第三章 百菌清人工抗原的制备与鉴定 | 第57-73页 |
·材料 | 第57-58页 |
·试验仪器 | 第57页 |
·试验材料 | 第57页 |
·缓冲液配方 | 第57-58页 |
·SDS 变性聚丙烯酰胺电泳凝胶配方 | 第58页 |
·试验方法 | 第58-64页 |
·CHT-NH2人工抗原的制备 | 第58-60页 |
·CHT-OH-1人工抗原的制备 | 第60页 |
·CHT-COOH-7人工抗原的制备 | 第60-61页 |
·CH-COOH-1,CHT-COOH-3,CHT-COOH-6人工抗原的制备 | 第61-62页 |
·人工抗原的纯化与鉴定 | 第62-63页 |
·偶联比的测定 | 第63-64页 |
·结果与分析 | 第64-71页 |
·人工抗原的紫外光谱法鉴定 | 第64-69页 |
·人工抗原的SDS-PAGE方法鉴定 | 第69页 |
·人工抗原偶联比 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-72页 |
·CHT-NH2-C-BSA制备失败原因讨论 | 第71-72页 |
·SDS-PAGE作为人工抗原鉴定方法的局限性讨论 | 第72页 |
·小结 | 第72-73页 |
第四章 百菌清抗血清的纯化与效价测定 | 第73-90页 |
·材料 | 第73-74页 |
·试验仪器 | 第73页 |
·试验材料 | 第73页 |
·缓冲液配制 | 第73-74页 |
·SDS-聚丙烯酰胺电泳凝胶配制 | 第74页 |
·实验动物 | 第74页 |
·试验方法 | 第74-78页 |
·多克隆抗血清的制备 | 第74-76页 |
·抗体的纯化 | 第76-77页 |
·抗体亲和力测定 | 第77页 |
·抗体棋盘滴定 | 第77-78页 |
·结果与分析 | 第78-88页 |
·抗血清的制备 | 第78-80页 |
·抗体纯度鉴定 | 第80-81页 |
·抗体亲和力测定 | 第81-83页 |
·抗体棋盘滴定 | 第83-86页 |
·抗体效价的影响因素研究 | 第86-88页 |
·讨论 | 第88-89页 |
·实验动物的选择 | 第88-89页 |
·免疫剂量的选择 | 第89页 |
·小结 | 第89-90页 |
第五章 百菌清ELISA检测方法的建立 | 第90-114页 |
·材料 | 第90-91页 |
·试验仪器 | 第90页 |
·试验材料 | 第90页 |
·缓冲液配制 | 第90-91页 |
·试验方法 | 第91-96页 |
·非竞争ELISA法操作流程 | 第91页 |
·百菌清ELISA反应条件研究 | 第91-95页 |
·百菌清ELISA工作条件研究 | 第95页 |
·百菌清标准曲线测定 | 第95页 |
·抗体特异性分析 | 第95-96页 |
·百菌清ELISA检测方法的应用 | 第96页 |
·HPLC方法验证ELISA检测结果 | 第96页 |
·结果与分析 | 第96-111页 |
·百菌清ELISA反应条件研究 | 第96-106页 |
·百菌清ELISA工作条件研究 | 第106-108页 |
·ELISA方法的建立 | 第108页 |
·百菌清标准曲线测定 | 第108-109页 |
·抗体特异性分析 | 第109-110页 |
·百菌清ELISA检测方法的应用 | 第110页 |
·ELISA方法测定结果的验证 | 第110-111页 |
·讨论 | 第111-113页 |
·固相载体对ELISA方法的影响 | 第111页 |
·缓冲体系的影响 | 第111-112页 |
·有机溶剂的影响 | 第112-113页 |
·小结 | 第113-114页 |
第六章 百菌清ELISA检测试剂盒的研制 | 第114-123页 |
·材料 | 第114-115页 |
·试验仪器 | 第114页 |
·试剂盒组成 | 第114-115页 |
·试验方法 | 第115-116页 |
·回收率测定 | 第115页 |
·标准曲线的板内和板间差异性与稳定性评价 | 第115页 |
·精密度和准确度测定 | 第115页 |
·灵敏度测定 | 第115-116页 |
·试剂盒稳定性试验 | 第116页 |
·试剂盒检测结果的验证试验 | 第116页 |
·结果与分析 | 第116-121页 |
·试剂盒组成 | 第116页 |
·标准曲线的板内和板间差异性与稳定性评价 | 第116-117页 |
·精密度和准确度测定结果 | 第117-118页 |
·灵敏度测定结果 | 第118-119页 |
·试剂盒稳定性试验结果 | 第119-120页 |
·HPLC验证试剂盒检测结果 | 第120-121页 |
·讨论 | 第121-122页 |
·试剂盒检测的影响因素 | 第121-122页 |
·试剂盒使用注意事项 | 第122页 |
·小结 | 第122-123页 |
第七章 百菌清免疫胶体金试纸的研制 | 第123-141页 |
·材料 | 第123-124页 |
·试验仪器 | 第123页 |
·试验材料 | 第123页 |
·缓冲液配制 | 第123-124页 |
·试验方法 | 第124-127页 |
·胶体金的制备 | 第124页 |
·抗体的纯化及含量测定 | 第124页 |
·胶体金标记多克隆抗体结合物的制备与纯化 | 第124-126页 |
·胶体金试纸条工作条件的选择 | 第126-127页 |
·试纸条性能测试 | 第127页 |
·结果与分析 | 第127-138页 |
·胶体金质量鉴定 | 第127-129页 |
·金标抗体合成条件研究 | 第129-131页 |
·胶体金试纸条工作条件的选择 | 第131-134页 |
·试纸条性能测试 | 第134-138页 |
·试纸条的实际应用 | 第138页 |
·讨论 | 第138-140页 |
·胶体金粒子的结构与特性 | 第138-139页 |
·胶体金还原方法与颗粒直径 | 第139-140页 |
·胶体金制备过程中的相关注意事项 | 第140页 |
·小结 | 第140-141页 |
第八章 百菌清及其转化产物多残留ELISA检测方法研究 | 第141-148页 |
·材料 | 第141-142页 |
·试验仪器 | 第141页 |
·试验材料 | 第141页 |
·缓冲液配方 | 第141-142页 |
·试验方法 | 第142-143页 |
·间接竞争ELISA法的建立 | 第142页 |
·ELISA检测结果的验证 | 第142-143页 |
·实际应用情况 | 第143页 |
·结果与分析 | 第143-145页 |
·间接竞争ELISA法的建立 | 第143-145页 |
·方法应用 | 第145页 |
·讨论 | 第145-146页 |
·预处理条件的优化 | 第145-146页 |
·关于百菌清的降解问题 | 第146页 |
·小结 | 第146-148页 |
参考文献 | 第148-165页 |
附录1 常用缩写中英文对照 | 第165-166页 |
附录2 百菌清ELISA间接竞争检测试剂盒产品说明书(草案) | 第166-171页 |
致谢 | 第171-172页 |
攻读学位期间发表的文章 | 第172页 |