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百菌清酶免疫检测技术研究

摘要第1-16页
ABSTRACT第16-19页
第一章 文献综述第19-41页
   ·杀菌剂百菌清概述第19-29页
     ·百菌清的理化性质第19-20页
     ·百菌清毒性分析第20-21页
     ·百菌清的作用机理第21-24页
     ·百菌清的生产现状第24页
     ·百菌清的应用第24-25页
     ·百菌清的代谢第25-27页
     ·百菌清对食品、环境的污染情况第27-28页
     ·百菌清的检测标准第28-29页
   ·农药残留免疫分析技术研究现状第29-39页
     ·免疫分析技术概述第29-30页
     ·免疫分析的基本方法第30页
     ·酶免疫检测法(Enzyme immunoassay,EIA)第30-31页
     ·ELISA检测的基础研究第31-36页
     ·免疫分析技术在杀菌剂残留检测中的应用第36-39页
   ·立题依据第39-41页
     ·研究目的与意义第39-40页
     ·研究内容第40-41页
第二章 百菌清半抗原的合成与表征第41-57页
   ·材料第41-42页
     ·试验仪器第41页
     ·试验材料第41-42页
   ·试验方法第42-45页
     ·半抗原CHT-NH2的制备与纯化第42页
     ·半抗原CHT-OH-1的制备与纯化第42-43页
     ·半抗原CHT-COOH-7的制备与纯化第43页
     ·4-羟基百菌清(CHT-OH-2)的制备与纯化第43页
     ·半抗原CHT-COOH-1,CHT-COOH-3,CHT-COOH-6的制备与纯化第43-44页
     ·半抗原的表征第44-45页
   ·结果与分析第45-54页
     ·半抗原CHT-NH2的表征第45-46页
     ·半抗原CHT-OH-1的表征第46-47页
     ·半抗原CHT-COOH-7的表征第47-49页
     ·4-羟基百菌清的表征第49-50页
     ·半抗原CHT-COOH-1的表征第50-51页
     ·半抗原CHT-COOH-3的表征第51-53页
     ·半抗原CHT-COOH-6的表征第53-54页
   ·讨论第54-56页
     ·反应产率的影响因素第54-55页
     ·半抗原合成效果主要影响因素第55-56页
   ·小结第56-57页
第三章 百菌清人工抗原的制备与鉴定第57-73页
   ·材料第57-58页
     ·试验仪器第57页
     ·试验材料第57页
     ·缓冲液配方第57-58页
     ·SDS 变性聚丙烯酰胺电泳凝胶配方第58页
   ·试验方法第58-64页
     ·CHT-NH2人工抗原的制备第58-60页
     ·CHT-OH-1人工抗原的制备第60页
     ·CHT-COOH-7人工抗原的制备第60-61页
     ·CH-COOH-1,CHT-COOH-3,CHT-COOH-6人工抗原的制备第61-62页
     ·人工抗原的纯化与鉴定第62-63页
     ·偶联比的测定第63-64页
   ·结果与分析第64-71页
     ·人工抗原的紫外光谱法鉴定第64-69页
     ·人工抗原的SDS-PAGE方法鉴定第69页
     ·人工抗原偶联比第69-71页
   ·讨论第71-72页
     ·CHT-NH2-C-BSA制备失败原因讨论第71-72页
     ·SDS-PAGE作为人工抗原鉴定方法的局限性讨论第72页
   ·小结第72-73页
第四章 百菌清抗血清的纯化与效价测定第73-90页
   ·材料第73-74页
     ·试验仪器第73页
     ·试验材料第73页
     ·缓冲液配制第73-74页
     ·SDS-聚丙烯酰胺电泳凝胶配制第74页
     ·实验动物第74页
   ·试验方法第74-78页
     ·多克隆抗血清的制备第74-76页
     ·抗体的纯化第76-77页
     ·抗体亲和力测定第77页
     ·抗体棋盘滴定第77-78页
   ·结果与分析第78-88页
     ·抗血清的制备第78-80页
     ·抗体纯度鉴定第80-81页
     ·抗体亲和力测定第81-83页
     ·抗体棋盘滴定第83-86页
     ·抗体效价的影响因素研究第86-88页
   ·讨论第88-89页
     ·实验动物的选择第88-89页
     ·免疫剂量的选择第89页
   ·小结第89-90页
第五章 百菌清ELISA检测方法的建立第90-114页
   ·材料第90-91页
     ·试验仪器第90页
     ·试验材料第90页
     ·缓冲液配制第90-91页
   ·试验方法第91-96页
     ·非竞争ELISA法操作流程第91页
     ·百菌清ELISA反应条件研究第91-95页
     ·百菌清ELISA工作条件研究第95页
     ·百菌清标准曲线测定第95页
     ·抗体特异性分析第95-96页
     ·百菌清ELISA检测方法的应用第96页
     ·HPLC方法验证ELISA检测结果第96页
   ·结果与分析第96-111页
     ·百菌清ELISA反应条件研究第96-106页
     ·百菌清ELISA工作条件研究第106-108页
     ·ELISA方法的建立第108页
     ·百菌清标准曲线测定第108-109页
     ·抗体特异性分析第109-110页
     ·百菌清ELISA检测方法的应用第110页
     ·ELISA方法测定结果的验证第110-111页
   ·讨论第111-113页
     ·固相载体对ELISA方法的影响第111页
     ·缓冲体系的影响第111-112页
     ·有机溶剂的影响第112-113页
   ·小结第113-114页
第六章 百菌清ELISA检测试剂盒的研制第114-123页
   ·材料第114-115页
     ·试验仪器第114页
     ·试剂盒组成第114-115页
   ·试验方法第115-116页
     ·回收率测定第115页
     ·标准曲线的板内和板间差异性与稳定性评价第115页
     ·精密度和准确度测定第115页
     ·灵敏度测定第115-116页
     ·试剂盒稳定性试验第116页
     ·试剂盒检测结果的验证试验第116页
   ·结果与分析第116-121页
     ·试剂盒组成第116页
     ·标准曲线的板内和板间差异性与稳定性评价第116-117页
     ·精密度和准确度测定结果第117-118页
     ·灵敏度测定结果第118-119页
     ·试剂盒稳定性试验结果第119-120页
     ·HPLC验证试剂盒检测结果第120-121页
   ·讨论第121-122页
     ·试剂盒检测的影响因素第121-122页
     ·试剂盒使用注意事项第122页
   ·小结第122-123页
第七章 百菌清免疫胶体金试纸的研制第123-141页
   ·材料第123-124页
     ·试验仪器第123页
     ·试验材料第123页
     ·缓冲液配制第123-124页
   ·试验方法第124-127页
     ·胶体金的制备第124页
     ·抗体的纯化及含量测定第124页
     ·胶体金标记多克隆抗体结合物的制备与纯化第124-126页
     ·胶体金试纸条工作条件的选择第126-127页
     ·试纸条性能测试第127页
   ·结果与分析第127-138页
     ·胶体金质量鉴定第127-129页
     ·金标抗体合成条件研究第129-131页
     ·胶体金试纸条工作条件的选择第131-134页
     ·试纸条性能测试第134-138页
     ·试纸条的实际应用第138页
   ·讨论第138-140页
     ·胶体金粒子的结构与特性第138-139页
     ·胶体金还原方法与颗粒直径第139-140页
     ·胶体金制备过程中的相关注意事项第140页
   ·小结第140-141页
第八章 百菌清及其转化产物多残留ELISA检测方法研究第141-148页
   ·材料第141-142页
     ·试验仪器第141页
     ·试验材料第141页
     ·缓冲液配方第141-142页
   ·试验方法第142-143页
     ·间接竞争ELISA法的建立第142页
     ·ELISA检测结果的验证第142-143页
     ·实际应用情况第143页
   ·结果与分析第143-145页
     ·间接竞争ELISA法的建立第143-145页
     ·方法应用第145页
   ·讨论第145-146页
     ·预处理条件的优化第145-146页
     ·关于百菌清的降解问题第146页
   ·小结第146-148页
参考文献第148-165页
附录1 常用缩写中英文对照第165-166页
附录2 百菌清ELISA间接竞争检测试剂盒产品说明书(草案)第166-171页
致谢第171-172页
攻读学位期间发表的文章第172页

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