| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·木薯简介 | 第9-11页 |
| ·木薯概述 | 第9-10页 |
| ·木薯的种植与耐旱、耐贫瘠的种植优势 | 第10-11页 |
| ·旱害对植物的影响 | 第11-13页 |
| ·旱害简介 | 第11页 |
| ·植物对水分胁迫的反应 | 第11-13页 |
| ·植物在逆境条件下的渗透调节 | 第11页 |
| ·植物在逆境条件下的膜脂过氧化反应和保护酶系统 | 第11-12页 |
| ·信号传递与基因表达 | 第12-13页 |
| ·木薯对水分的要求及抗旱研究进展 | 第13-14页 |
| ·miRNA的概念及动植物中的miRNA简介 | 第14-18页 |
| ·miRNA的发现及特点 | 第14-15页 |
| ·miRNA的产生 | 第15-16页 |
| ·miRNA的调控机制 | 第16页 |
| ·miRNA的获得 | 第16-18页 |
| ·基因克隆 | 第16-18页 |
| ·生物信息学筛选 | 第18页 |
| ·miRNA与靶基因 | 第18页 |
| ·植物中miRNA及与环境的关系 | 第18-19页 |
| ·本实验开展的基础 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·植物样品中RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·miRNA的表达分析 | 第22-25页 |
| ·本实验中miRNA的获得 | 第22页 |
| ·Multiplexed RT-PCR法 | 第22-23页 |
| ·引物设计具体步骤如下 | 第23-24页 |
| ·miRNA的反转录、第一链cDNA的检测及定量分析 | 第24-25页 |
| ·靶基因的表达检测 | 第25-27页 |
| ·靶基因的预测 | 第25页 |
| ·靶基因的的反转录、第一链cDNA的检测及定量分析 | 第25-27页 |
| ·用5’RACE法验证miRNA和靶基因的关系 | 第27-32页 |
| ·mRNA的分离 | 第27-28页 |
| ·mRNA与Oligo连接(GeneRacer~(TM)RNA Oligo) | 第28页 |
| ·mRNA反转录成cDNA(SuperScript~(TM) Ⅲ) | 第28-29页 |
| ·cDNA第一链PCR反应 | 第29页 |
| ·第二轮巢式PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR特异片段的回收及纯化(采用百泰克凝胶回收试剂盒) | 第30页 |
| ·PCR产物克隆测序 | 第30-31页 |
| ·序列分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-48页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·胁迫材料的表型变化与采样等级标准 | 第32页 |
| ·两个胁迫材料的表型变化 | 第32-33页 |
| ·干旱胁迫材料用于定量表达的选取 | 第33页 |
| ·实验条件的摸索和优化 | 第33-35页 |
| ·miRNA的cDNA模板的检测(RT-PCR) | 第33-34页 |
| ·miRNA的荧光定量PCR条件的优化 | 第34页 |
| ·靶基因的荧光定量PCR条件的优化 | 第34-35页 |
| ·miRNA的表达谱分析 | 第35-43页 |
| ·本研究中miRNA的选取 | 第35-36页 |
| ·表达谱分析 | 第36-43页 |
| ·靶基因的表达谱分析 | 第43-48页 |
| ·本研究选取的靶基因 | 第43-44页 |
| ·靶基因注释 | 第44页 |
| ·靶基因的表达谱 | 第44-48页 |
| 4 结论 | 第48-50页 |
| ·miRNA的表达分析 | 第48页 |
| ·切割位点分析 | 第48-50页 |
| 5 讨论 | 第50-52页 |
| ·本研究和前人研究的不同 | 第50页 |
| ·Multiplexed RT-PCR法 | 第50-51页 |
| ·下一步要做的工作 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
