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白念珠菌CaPTC2,CaPPH3和CaPTC5基因的鉴定和功能研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 文献综述第8-18页
   ·白念珠菌第8-9页
   ·蛋白磷酸酯酶的分类与功能第9-13页
     ·蛋白磷酸酯酶分类第9-11页
     ·PP2C 类蛋白磷酸酯酶的生物学功能第11-13页
   ·DNA 损伤检验点的调节第13-16页
     ·DNA 损伤综述第13页
     ·DNA 损伤检验点的激活第13-14页
     ·DNA 损伤检验点的失活第14-16页
     ·白念珠菌菌丝发育与DNA 损伤检验点第16页
   ·本课题研究的主要内容和意义第16-18页
第二章 材料与方法第18-32页
   ·实验仪器与材料第18-25页
     ·实验所用仪器第18-19页
     ·主要实验试剂及试剂盒第19-20页
     ·主要溶液及配制方法第20-23页
     ·实验所用培养基第23-25页
   ·所有实验的通用方法第25-32页
     ·菌株传代与保存第25页
     ·质粒或连接体系转化大肠杆菌感受态细胞第25页
     ·碱裂解法快速提取质粒DNA第25-26页
     ·PCR 反应体系的建立和产物纯化第26-27页
     ·酶切反应体系的建立第27页
     ·连接反应体系的建立第27-28页
     ·酿酒酵母细胞和白念珠菌细胞的转化第28-29页
     ·酿酒酵母和白念珠菌细胞的基因组DNA 的提取第29页
     ·细胞中总蛋白的提取第29页
     ·Western blot第29-30页
     ·细胞线粒体的荧光染色第30页
     ·倍比稀释法进行表型实验第30页
     ·液体及固体菌丝发育实验第30-31页
     ·生物信息学方法第31-32页
第三章 白念珠菌CaPTC2 基因的功能研究第32-64页
   ·实验所用菌株、引物和质粒第32-34页
   ·本章实验方法第34-35页
     ·实验所涉及到的通用实验方法第34页
     ·大肠杆菌中CaPtc2p-His_6 的诱导表达第34页
     ·重组蛋白CaPtc2p-His_6 的变性复性与蛋白磷酸酯酶活性测定第34-35页
   ·实验结果第35-62页
     ·白念珠菌CaPtc2p 序列分析第35-37页
     ·白念珠菌CaPtc2p 蛋白磷酸酯酶活性鉴定第37-40页
     ·白念珠菌CaPTC2 双等位基因的敲除第40-49页
     ·白念珠菌CaPTC2 的基因功能研究第49-57页
     ·白念珠菌CaPtc2p 的亚细胞定位研究第57-62页
   ·讨论第62-64页
第四章 白念珠菌CaPPH3 基因的功能研究第64-93页
   ·实验材料与方法第64-66页
     ·实验所用菌株、质粒和引物第64-66页
     ·实验所涉及到的通用实验方法第66页
   ·实验结果第66-91页
     ·白念珠菌CaPPH3 基因序列分析第66-67页
     ·白念珠菌CaPPH3 基因的敲除第67-78页
     ·白念珠菌CaPPH3 基因的功能研究第78-83页
     ·CaPph3p 和CaPtc2p 的协同作用研究第83-88页
     ·CaPph3p 以及CaPtc2p 对检验点激酶CaRad53p 的调节作用第88-91页
   ·讨论第91-93页
第五章 白念珠菌CaPTC5 基因的功能研究第93-106页
   ·实验材料与方法第93-94页
     ·实验所用菌株、引物和质粒第93-94页
     ·实验所涉及到的通用实验方法第94页
   ·实验结果第94-105页
     ·白念珠菌CaPTC5 基因序列分析第94-96页
     ·白念珠菌CaPTC5 基因的敲除第96-102页
     ·白念珠菌CaPTC5 基因的功能研究第102-105页
   ·本章总结第105-106页
第六章 总结与展望第106-108页
   ·主要创新性工作总结第106页
   ·相关工作的前景展望第106-108页
参考文献第108-116页
发表论文和科研情况说明第116-117页
致谢第117页

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