中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-18页 |
·白念珠菌 | 第8-9页 |
·蛋白磷酸酯酶的分类与功能 | 第9-13页 |
·蛋白磷酸酯酶分类 | 第9-11页 |
·PP2C 类蛋白磷酸酯酶的生物学功能 | 第11-13页 |
·DNA 损伤检验点的调节 | 第13-16页 |
·DNA 损伤综述 | 第13页 |
·DNA 损伤检验点的激活 | 第13-14页 |
·DNA 损伤检验点的失活 | 第14-16页 |
·白念珠菌菌丝发育与DNA 损伤检验点 | 第16页 |
·本课题研究的主要内容和意义 | 第16-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-32页 |
·实验仪器与材料 | 第18-25页 |
·实验所用仪器 | 第18-19页 |
·主要实验试剂及试剂盒 | 第19-20页 |
·主要溶液及配制方法 | 第20-23页 |
·实验所用培养基 | 第23-25页 |
·所有实验的通用方法 | 第25-32页 |
·菌株传代与保存 | 第25页 |
·质粒或连接体系转化大肠杆菌感受态细胞 | 第25页 |
·碱裂解法快速提取质粒DNA | 第25-26页 |
·PCR 反应体系的建立和产物纯化 | 第26-27页 |
·酶切反应体系的建立 | 第27页 |
·连接反应体系的建立 | 第27-28页 |
·酿酒酵母细胞和白念珠菌细胞的转化 | 第28-29页 |
·酿酒酵母和白念珠菌细胞的基因组DNA 的提取 | 第29页 |
·细胞中总蛋白的提取 | 第29页 |
·Western blot | 第29-30页 |
·细胞线粒体的荧光染色 | 第30页 |
·倍比稀释法进行表型实验 | 第30页 |
·液体及固体菌丝发育实验 | 第30-31页 |
·生物信息学方法 | 第31-32页 |
第三章 白念珠菌CaPTC2 基因的功能研究 | 第32-64页 |
·实验所用菌株、引物和质粒 | 第32-34页 |
·本章实验方法 | 第34-35页 |
·实验所涉及到的通用实验方法 | 第34页 |
·大肠杆菌中CaPtc2p-His_6 的诱导表达 | 第34页 |
·重组蛋白CaPtc2p-His_6 的变性复性与蛋白磷酸酯酶活性测定 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-62页 |
·白念珠菌CaPtc2p 序列分析 | 第35-37页 |
·白念珠菌CaPtc2p 蛋白磷酸酯酶活性鉴定 | 第37-40页 |
·白念珠菌CaPTC2 双等位基因的敲除 | 第40-49页 |
·白念珠菌CaPTC2 的基因功能研究 | 第49-57页 |
·白念珠菌CaPtc2p 的亚细胞定位研究 | 第57-62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
第四章 白念珠菌CaPPH3 基因的功能研究 | 第64-93页 |
·实验材料与方法 | 第64-66页 |
·实验所用菌株、质粒和引物 | 第64-66页 |
·实验所涉及到的通用实验方法 | 第66页 |
·实验结果 | 第66-91页 |
·白念珠菌CaPPH3 基因序列分析 | 第66-67页 |
·白念珠菌CaPPH3 基因的敲除 | 第67-78页 |
·白念珠菌CaPPH3 基因的功能研究 | 第78-83页 |
·CaPph3p 和CaPtc2p 的协同作用研究 | 第83-88页 |
·CaPph3p 以及CaPtc2p 对检验点激酶CaRad53p 的调节作用 | 第88-91页 |
·讨论 | 第91-93页 |
第五章 白念珠菌CaPTC5 基因的功能研究 | 第93-106页 |
·实验材料与方法 | 第93-94页 |
·实验所用菌株、引物和质粒 | 第93-94页 |
·实验所涉及到的通用实验方法 | 第94页 |
·实验结果 | 第94-105页 |
·白念珠菌CaPTC5 基因序列分析 | 第94-96页 |
·白念珠菌CaPTC5 基因的敲除 | 第96-102页 |
·白念珠菌CaPTC5 基因的功能研究 | 第102-105页 |
·本章总结 | 第105-106页 |
第六章 总结与展望 | 第106-108页 |
·主要创新性工作总结 | 第106页 |
·相关工作的前景展望 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-116页 |
发表论文和科研情况说明 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |