| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-36页 |
| ·cAMP 信号通路的组成及作用 | 第9-10页 |
| ·环核苷酸磷酸二酯酶与胞内cAMP 信号的区隔化 | 第10-15页 |
| ·环核苷酸磷酸二酯酶家族 | 第11-12页 |
| ·胞内cAMP 信号的区隔化 | 第12-13页 |
| ·PDE4 家族与cAMP 信号区隔化 | 第13-15页 |
| ·酿酒酵母cAMP 信号通路 | 第15-26页 |
| ·酿酒酵母的cAMP 信号转导通路上游的组成元件 | 第16-21页 |
| ·cAMP 途径的主要靶标—cAMP 依赖的蛋白激酶PKA | 第21-25页 |
| ·Pde1 和Pde2 | 第25-26页 |
| ·酿酒酵母的高亲和力cAMP 磷酸二酯酶Pde2 | 第26-30页 |
| ·高亲和力的cAMP 磷酸二酯酶 | 第26页 |
| ·与哺乳动物的PDE 有广泛的同源性 | 第26-27页 |
| ·控制胞内基础cAMP 水平 | 第27-28页 |
| ·受终止密码子读出（readthrough）翻译调节 | 第28-30页 |
| ·酿酒酵母cAMP 信号通路的反馈抑制 | 第30-32页 |
| ·cAMP-PKA 途径与FGM 途径 | 第32-35页 |
| ·FGM 途径的提出 | 第32-33页 |
| ·氮源诱导的FGM 途径的激活需要Sch9 蛋白激酶的作用 | 第33-34页 |
| ·两条途径的相关性及两个激酶的相互作用 | 第34-35页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第35-36页 |
| 第二章 材料与方法 | 第36-64页 |
| ·实验材料 | 第36-46页 |
| ·质粒、菌株与引物 | 第36-39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41-43页 |
| ·主要溶液 | 第43-46页 |
| ·实验方法 | 第46-64页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第46-47页 |
| ·小规模提取大肠杆菌质粒法（CTAB 法） | 第47页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第47-48页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第48-49页 |
| ·融合PCR | 第49-50页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第50页 |
| ·DNA 的连接反应 | 第50-51页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第51页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA | 第51页 |
| ·酵母细胞的转化方法 | 第51-52页 |
| ·质粒缺口修复 | 第52页 |
| ·酵母中质粒的回收 | 第52-53页 |
| ·酵母交配型的验证 | 第53页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的杂交 | 第53页 |
| ·产孢及四分体孢子拆分 | 第53-54页 |
| ·Dilution 实验方法 | 第54页 |
| ·热击实验方法 | 第54页 |
| ·cAMP 定量测定 | 第54-57页 |
| ·双杂交实验方法 | 第57-58页 |
| ·蛋白质浓度的定量（Bio-Rad 方法） | 第58页 |
| ·玻璃珠法提取酿酒酵母总蛋白 | 第58页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第58-59页 |
| ·Western blot 蛋白免疫实验 | 第59-60页 |
| ·绿色荧光蛋白的荧光观察 | 第60页 |
| ·提取酿酒酵母总RNA | 第60-61页 |
| ·实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR） | 第61-64页 |
| 第三章 PKA 对Pde2 胞内定位的调节 | 第64-78页 |
| ·概述 | 第64-65页 |
| ·实验结果与讨论 | 第65-76页 |
| ·碳源对Pde2 胞内定位的影响 | 第65-69页 |
| ·PKA 调节Pde2 的胞内定位 | 第69-73页 |
| ·用酵母双杂交方法研究Bcy1 和Pde2 蛋白间的相互作用 | 第73-76页 |
| ·本章小结 | 第76-78页 |
| 第四章 PKA 对Pde2 蛋白水平的调节 | 第78-91页 |
| ·概述 | 第78-79页 |
| ·实验结果与讨论 | 第79-90页 |
| ·PKA 活性与Pde2 蛋白水平正相关 | 第79-85页 |
| ·PKA 对Pde2 mRNA 水平的影响 | 第85-88页 |
| ·PKA 调节Pde2 蛋白的稳定性 | 第88-90页 |
| ·本章小结 | 第90-91页 |
| 第五章 终止密码子读出（readthrough）翻译对Pde2 蛋白的影响 | 第91-99页 |
| ·概述 | 第91-92页 |
| ·实验结果与讨论 | 第92-98页 |
| ·终止密码子读出（readthrough）对蛋白定位的影响 | 第92-96页 |
| ·终止密码子读出（readthrough）对蛋白水平的影响 | 第96-97页 |
| ·终止密码子读出（readthrough）对胞内cAMP 水平的影响 | 第97-98页 |
| ·本章小结 | 第98-99页 |
| 第六章 其它激酶或途径对Pde2 定位的影响 | 第99-105页 |
| ·概述 | 第99-100页 |
| ·实验结果与讨论 | 第100-103页 |
| ·Sch9 对Pde2 定位的影响 | 第100-102页 |
| ·Yak1 对Pde2 定位的影响 | 第102-103页 |
| ·本章小结 | 第103-105页 |
| 第七章 总结与展望 | 第105-108页 |
| ·主要工作总结 | 第105-106页 |
| ·展望 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-118页 |
| 附录1 生化名词缩写 | 第118-119页 |
| 附录2 基因及其相应编码产物 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
