摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
目录 | 第9-13页 |
縮略词表 | 第13-14页 |
引言 | 第14-17页 |
1 文献综述 | 第17-33页 |
·胡杨抗盐机制的研究进展 | 第17-22页 |
·离子平衡调控 | 第17-21页 |
·盐离子根冠运输的限制 | 第17-18页 |
·K~+/Na~+平衡的调控 | 第18-20页 |
·Cl~-平衡的调控 | 第20-21页 |
·活性氧平衡的调控 | 第21页 |
·胡杨组织肉质化 | 第21-22页 |
·XTH的研究进展 | 第22-29页 |
·XTH与细胞壁重构 | 第22-24页 |
·XTHs的酶活性质、蛋白结构和家族分类 | 第24-25页 |
·XTH基因的表达模式 | 第25-28页 |
·XTH基因的时空表达 | 第26-27页 |
·XTH基因的表达受激素和环境的调控 | 第27-28页 |
·XTH基因的生理功能 | 第28-29页 |
·XTH与植物的生长发育 | 第28页 |
·XTH与非生物胁迫 | 第28-29页 |
·植物对重金属Cd~(2+)的解毒机制研究进展 | 第29-31页 |
·多肽螯合 | 第29页 |
·液泡区隔 | 第29-30页 |
·激活抗氧化系统 | 第30页 |
·细胞壁固定 | 第30-31页 |
·本论文问题的提出及研究目的 | 第31-33页 |
2 胡杨PeXTH的序列分析和亚细胞定位 | 第33-46页 |
·实验材料、试剂和方法 | 第33-39页 |
·载体与菌株 | 第33页 |
·试剂 | 第33页 |
·溶液配制 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-39页 |
·系统进化树构建 | 第34页 |
·氨基酸序列比对 | 第34页 |
·定位载体pMDC85::PeXTH的构建 | 第34-38页 |
·基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第38-39页 |
·激光共聚焦显微镜观察洋葱表皮细胞 | 第39页 |
·结果 | 第39-43页 |
·氨基酸序列比对 | 第39-40页 |
·进化树分析 | 第40-42页 |
·亚细胞定位 | 第42-43页 |
·重组载体pMDC85::PeXTH的构建和鉴定 | 第42页 |
·基因枪转化 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
3 PeXTH蛋白的原核表达及酶活测定 | 第46-56页 |
·实验材料、试剂和方法 | 第46-52页 |
·质粒与菌株 | 第46页 |
·试剂配制 | 第46-48页 |
·方法 | 第48-52页 |
·表达载体pET28a::PeXTH的构建 | 第48-50页 |
·PeXTH蛋白的原核表达和纯化 | 第50-51页 |
·PeXTH纯化蛋白的酶学活性测定 | 第51-52页 |
·结果 | 第52-54页 |
·PeXTH蛋白的诱导表达 | 第52页 |
·重组蛋白的纯化 | 第52页 |
·PeXTH纯化蛋白的酶学活性 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·PeXTH蛋白的诱导和纯化条件 | 第54-55页 |
·PeXTH蛋白的酶活性质 | 第55页 |
·小结 | 第55-56页 |
4 胡杨PeXTH基因的表达分析和遗传转化 | 第56-68页 |
·实验材料、试剂和方法 | 第56-63页 |
·植物材料 | 第56页 |
·质粒与菌株 | 第56页 |
·试剂 | 第56页 |
·培养基和溶液配制 | 第56-57页 |
·方法 | 第57-63页 |
·盐处理和镉处理 | 第57-58页 |
·胡杨根、叶组织的RNA提取 | 第58-59页 |
·荧光定量PCR | 第59-60页 |
·农杆菌介导PeXTH基因转化烟草 | 第60-61页 |
·烟草叶片DNA提取和基因组PCR验证 | 第61-62页 |
·烟草叶片RNA提取和RT-PCR验证 | 第62-63页 |
·T2代纯合子的获得 | 第63页 |
·结果 | 第63-66页 |
·PeXTH的表达特征分析 | 第63页 |
·转基因烟草的筛选和鉴定 | 第63-66页 |
·转空载体株系的筛选和鉴定 | 第64-65页 |
·转PeXTH基因株系的筛选和鉴定 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
5 转PeXTH基因烟草的肉质化和抗盐性分析 | 第68-83页 |
·实验材料和方法 | 第68-71页 |
·植物材料和培养条件 | 第68页 |
·方法 | 第68-71页 |
·RT-PCR和荧光定量PCR检测 | 第68页 |
·转基因烟草的抗盐表型筛选 | 第68-69页 |
·叶片显微结构的观察 | 第69-70页 |
·叶片肉质化程度(LSD)的测定 | 第70页 |
·叶片保水力(WRC)的测定 | 第70页 |
·叶片Na~+、Cl~-离子浓度的测定 | 第70-71页 |
·叶细胞Na~+离子含量的荧光检测 | 第71页 |
·叶片光合效率的测定 | 第71页 |
·结果 | 第71-81页 |
·转基因烟草的抗盐性筛选 | 第71-74页 |
·转基因烟草叶片显微结构的变化 | 第74-75页 |
·转基因烟草叶片的肉质化程度和保水力 | 第75-76页 |
·转基因烟草叶组织中的Na~+、Ck~-离子浓度 | 第76页 |
·转基因烟草叶肉细胞中的Na~+离子含量 | 第76页 |
·转基因烟草的光合能力 | 第76-81页 |
·讨论 | 第81-82页 |
·转PeXTH基因烟草的植株抗盐性和叶片肉质化 | 第81页 |
·PeXTH基因诱导的叶片肉质化和抗盐性的关系 | 第81-82页 |
·小结 | 第82-83页 |
6 转PeXTH基因烟草的抗镉性分析 | 第83-95页 |
·实验材料和方法 | 第83-87页 |
·植物材料和培养条件 | 第83页 |
·溶液配制 | 第83-84页 |
·方法 | 第84-87页 |
·RT-PCR检测 | 第84页 |
·转基因烟草的抗Cd~(2+)表型 | 第84页 |
·Cd~(2+)离子的荧光检测 | 第84页 |
·Cd~(2+)离子流的测定 | 第84-85页 |
·木葡聚糖降解活性(XDA)的测定 | 第85-86页 |
·木葡聚糖含量的测定 | 第86-87页 |
·结果 | 第87-91页 |
·转基因烟草的抗Cd~(2+)性 | 第87-89页 |
·根细胞中的Cd~(2+)分布 | 第89-91页 |
·根Cd~(2+)离子流 | 第91页 |
·根组织中的木葡聚糖含量和木葡聚糖降解活性(XDA) | 第91页 |
·讨论 | 第91-93页 |
·Cd~(2+)离子的吸收、积累与抗Cd~(2+)性 | 第91-93页 |
·细胞壁木葡聚糖含量在抗Cd~(2+)性中的重要性 | 第93页 |
·小结 | 第93-95页 |
7 结论与展望 | 第95-97页 |
·结论 | 第95页 |
·创新点 | 第95-96页 |
·展望 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |
个人简介 | 第110-111页 |
博士在读期间成果清单 | 第111-112页 |
导师简介 | 第112-113页 |
致谢 | 第113页 |