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胡杨XTH调控烟草盐诱导肉质化及缓解重金属胁迫的机理研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-13页
縮略词表第13-14页
引言第14-17页
1 文献综述第17-33页
   ·胡杨抗盐机制的研究进展第17-22页
     ·离子平衡调控第17-21页
       ·盐离子根冠运输的限制第17-18页
       ·K~+/Na~+平衡的调控第18-20页
       ·Cl~-平衡的调控第20-21页
     ·活性氧平衡的调控第21页
     ·胡杨组织肉质化第21-22页
   ·XTH的研究进展第22-29页
     ·XTH与细胞壁重构第22-24页
     ·XTHs的酶活性质、蛋白结构和家族分类第24-25页
     ·XTH基因的表达模式第25-28页
       ·XTH基因的时空表达第26-27页
       ·XTH基因的表达受激素和环境的调控第27-28页
     ·XTH基因的生理功能第28-29页
       ·XTH与植物的生长发育第28页
       ·XTH与非生物胁迫第28-29页
   ·植物对重金属Cd~(2+)的解毒机制研究进展第29-31页
     ·多肽螯合第29页
     ·液泡区隔第29-30页
     ·激活抗氧化系统第30页
     ·细胞壁固定第30-31页
   ·本论文问题的提出及研究目的第31-33页
2 胡杨PeXTH的序列分析和亚细胞定位第33-46页
   ·实验材料、试剂和方法第33-39页
     ·载体与菌株第33页
     ·试剂第33页
     ·溶液配制第33-34页
     ·方法第34-39页
       ·系统进化树构建第34页
       ·氨基酸序列比对第34页
       ·定位载体pMDC85::PeXTH的构建第34-38页
       ·基因枪转化洋葱表皮细胞第38-39页
       ·激光共聚焦显微镜观察洋葱表皮细胞第39页
   ·结果第39-43页
     ·氨基酸序列比对第39-40页
     ·进化树分析第40-42页
     ·亚细胞定位第42-43页
       ·重组载体pMDC85::PeXTH的构建和鉴定第42页
       ·基因枪转化第42-43页
   ·讨论第43-45页
   ·小结第45-46页
3 PeXTH蛋白的原核表达及酶活测定第46-56页
   ·实验材料、试剂和方法第46-52页
     ·质粒与菌株第46页
     ·试剂配制第46-48页
     ·方法第48-52页
       ·表达载体pET28a::PeXTH的构建第48-50页
       ·PeXTH蛋白的原核表达和纯化第50-51页
       ·PeXTH纯化蛋白的酶学活性测定第51-52页
   ·结果第52-54页
     ·PeXTH蛋白的诱导表达第52页
     ·重组蛋白的纯化第52页
     ·PeXTH纯化蛋白的酶学活性第52-54页
   ·讨论第54-55页
     ·PeXTH蛋白的诱导和纯化条件第54-55页
     ·PeXTH蛋白的酶活性质第55页
   ·小结第55-56页
4 胡杨PeXTH基因的表达分析和遗传转化第56-68页
   ·实验材料、试剂和方法第56-63页
     ·植物材料第56页
     ·质粒与菌株第56页
     ·试剂第56页
     ·培养基和溶液配制第56-57页
     ·方法第57-63页
       ·盐处理和镉处理第57-58页
       ·胡杨根、叶组织的RNA提取第58-59页
       ·荧光定量PCR第59-60页
       ·农杆菌介导PeXTH基因转化烟草第60-61页
       ·烟草叶片DNA提取和基因组PCR验证第61-62页
       ·烟草叶片RNA提取和RT-PCR验证第62-63页
       ·T2代纯合子的获得第63页
   ·结果第63-66页
     ·PeXTH的表达特征分析第63页
     ·转基因烟草的筛选和鉴定第63-66页
       ·转空载体株系的筛选和鉴定第64-65页
       ·转PeXTH基因株系的筛选和鉴定第65-66页
   ·讨论第66-67页
   ·小结第67-68页
5 转PeXTH基因烟草的肉质化和抗盐性分析第68-83页
   ·实验材料和方法第68-71页
     ·植物材料和培养条件第68页
     ·方法第68-71页
       ·RT-PCR和荧光定量PCR检测第68页
       ·转基因烟草的抗盐表型筛选第68-69页
       ·叶片显微结构的观察第69-70页
       ·叶片肉质化程度(LSD)的测定第70页
       ·叶片保水力(WRC)的测定第70页
       ·叶片Na~+、Cl~-离子浓度的测定第70-71页
       ·叶细胞Na~+离子含量的荧光检测第71页
       ·叶片光合效率的测定第71页
   ·结果第71-81页
     ·转基因烟草的抗盐性筛选第71-74页
     ·转基因烟草叶片显微结构的变化第74-75页
     ·转基因烟草叶片的肉质化程度和保水力第75-76页
     ·转基因烟草叶组织中的Na~+、Ck~-离子浓度第76页
     ·转基因烟草叶肉细胞中的Na~+离子含量第76页
     ·转基因烟草的光合能力第76-81页
   ·讨论第81-82页
     ·转PeXTH基因烟草的植株抗盐性和叶片肉质化第81页
     ·PeXTH基因诱导的叶片肉质化和抗盐性的关系第81-82页
   ·小结第82-83页
6 转PeXTH基因烟草的抗镉性分析第83-95页
   ·实验材料和方法第83-87页
     ·植物材料和培养条件第83页
     ·溶液配制第83-84页
     ·方法第84-87页
       ·RT-PCR检测第84页
       ·转基因烟草的抗Cd~(2+)表型第84页
       ·Cd~(2+)离子的荧光检测第84页
       ·Cd~(2+)离子流的测定第84-85页
       ·木葡聚糖降解活性(XDA)的测定第85-86页
       ·木葡聚糖含量的测定第86-87页
   ·结果第87-91页
     ·转基因烟草的抗Cd~(2+)性第87-89页
     ·根细胞中的Cd~(2+)分布第89-91页
     ·根Cd~(2+)离子流第91页
     ·根组织中的木葡聚糖含量和木葡聚糖降解活性(XDA)第91页
   ·讨论第91-93页
     ·Cd~(2+)离子的吸收、积累与抗Cd~(2+)性第91-93页
     ·细胞壁木葡聚糖含量在抗Cd~(2+)性中的重要性第93页
   ·小结第93-95页
7 结论与展望第95-97页
   ·结论第95页
   ·创新点第95-96页
   ·展望第96-97页
参考文献第97-110页
个人简介第110-111页
博士在读期间成果清单第111-112页
导师简介第112-113页
致谢第113页

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