| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 综述 | 第9-17页 |
| 1. 鱼类的性别决定 | 第9-11页 |
| ·遗传性别决定 | 第9-10页 |
| ·环境型性别决定 | 第10-11页 |
| 2. 鱼类性别决定相关基因的研究概况 | 第11-16页 |
| ·Sox9 | 第11-12页 |
| ·Dmrt1 | 第12-13页 |
| ·Wt1 | 第13-14页 |
| ·Dax1 | 第14页 |
| ·Foxl2 | 第14-15页 |
| ·Wnt4 | 第15-16页 |
| ·其他基因 | 第16页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 第一章 波纹唇鱼sox9、dmrt1、wt1、foxl2、dax1、wnt4基因的克隆 | 第17-33页 |
| 1 实验材料 | 第17-19页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·药品和试剂 | 第17页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第17-18页 |
| ·克隆用质粒和菌株 | 第18页 |
| ·实验仪器设备 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-24页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·波纹唇鱼性腺组织总RNA的提取 | 第20页 |
| ·反转录(Reverse Transcription,RT) | 第20-21页 |
| ·波纹唇鱼sox9、dmrt1、wt1、foxl2、dax1、wnt4 cDNA中间片段的PCR | 第21页 |
| ·5’RACE模板和3’RACE模板制备 | 第21-22页 |
| ·波纹唇鱼foxl2 cDNA3’端和5’端片段的扩增 | 第22页 |
| ·PCR产物的分离、回收和纯化 | 第22-23页 |
| ·连接和转化 | 第23页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第23-24页 |
| ·生物信息学分析 | 第24页 |
| 3 实验结果 | 第24-31页 |
| ·性腺RNA提取结果 | 第24-25页 |
| ·波纹唇鱼sox9、dmrt1、wt1、foxl2、dax1、wnt4基因的中间片段克隆 | 第25-26页 |
| ·波纹唇鱼foxl2 cDNA3’和5’端的克隆 | 第26页 |
| ·波纹唇鱼foxl2 cDNA序列的拼接和氨基酸序列的推导 | 第26-27页 |
| ·foxl2基因编码的氨基酸序列比对结果 | 第27页 |
| ·波纹唇鱼foxl2的蛋白分子量和三维结构预测 | 第27-28页 |
| ·波纹唇鱼sox9、dmrt1、wt1、foxl2、dax1、wnt4基因序列的进化树分析 | 第28-31页 |
| ·波纹唇鱼与其他物种foxl2的氨基酸序列多重比对 | 第31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第二章 波纹唇鱼sox9、dmrt1、wt1、foxl2、dax1、wnt4基因在雌雄鱼不同组织中的表达模式分析 | 第33-41页 |
| 1 实验材料 | 第33页 |
| ·实验鱼 | 第33页 |
| ·药品和试剂 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-35页 |
| ·取样 | 第33页 |
| ·总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·反转录 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·Real-time PCR | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-38页 |
| ·sox9、dmrt1、wt1、foxl2、dax1、wnt4基因在波纹唇鱼雌鱼中的表达 | 第35页 |
| ·sox9、dmrtl、wt1、foxl2、dax1、wnt4基因在波纹唇鱼雄鱼中的表达 | 第35-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
