| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言(第一部分) | 第12-35页 |
| 第一节 GRASP65蛋白的研究背景 | 第12-25页 |
| ·GRASP65的亚细胞定位 | 第13页 |
| ·与GRASP65功能发挥联系密切的蛋白 | 第13-17页 |
| ·GRASP65和GRASP55的磷酸化 | 第17-18页 |
| ·GRASP65对有丝分裂及纺锤体动态分布的调控 | 第18-21页 |
| ·GRASPs与凋亡 | 第21-22页 |
| ·药物处理对高尔基体的影响 | 第22-24页 |
| ·GRASP65与蛋白运输 | 第24-25页 |
| 第二节 GRASP65蛋白的结构生物学研究背景 | 第25-33页 |
| ·PDZ结构域的特征 | 第25-26页 |
| ·GRASP65同源蛋白GRASP55的晶体结构 | 第26-30页 |
| ·GRASP65的结构特征 | 第30-33页 |
| 第三节 本课题的研究内容及意义 | 第33-34页 |
| 第四节 论文结构安排 | 第34-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-46页 |
| 第一节 实验材料与仪器 | 第35-37页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·仪器及设备 | 第36-37页 |
| 第二节 实验方法 | 第37-46页 |
| ·分子克隆 | 第37-40页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域的表达与纯化 | 第40-41页 |
| ·蛋白质结晶 | 第41页 |
| ·数据收集和处理 | 第41页 |
| ·结构解析和修正 | 第41-42页 |
| ·原子吸收光谱实验 | 第42页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域的突变体及其聚集状态分析 | 第42-43页 |
| ·分析型超速离心实验(AUC) | 第43-44页 |
| ·细胞学实验 | 第44-46页 |
| 第三章 GRASP65 GRASP结构域的结构及功能研究 | 第46-84页 |
| 第一节 GRASP65 GRASP结构域的表达与纯化 | 第46-55页 |
| ·GRASP65.205的纯化结果 | 第47-49页 |
| ·GRASP65.217的纯化结果 | 第49-50页 |
| ·GRASP65.211的纯化结果 | 第50-53页 |
| ·GRASP65.228的纯化结果 | 第53-55页 |
| 第二节 GRASP65 GRASP结构域的结构解析 | 第55-59页 |
| 第三节 GRASP65 GRASP结构域的结构分析 | 第59-71页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域整体结构 | 第59-61页 |
| ·GRASP65 PDZ1结构域与PDZ2结构域比较 | 第61页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域与GRASP55 GRASP结构域的序列和结构比较 | 第61-64页 |
| ·GRASP65的PDZ结构域与其它蛋白的PDZ结构域结构比较 | 第64-67页 |
| ·原子吸收光谱分析 | 第67-68页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域突变体与周围氨基酸的相互作用分析 | 第68-71页 |
| 第四节 GRASP65 GRASP结构域的功能研究 | 第71-84页 |
| ·突变体聚集状态分析 | 第71-78页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域及突变体的分析型超速离心实验 | 第78-80页 |
| ·GRASP65 GRASP结构域及突变体的亚细胞定位 | 第80-84页 |
| 第四章 引言(第二部分) | 第84-102页 |
| 第一节 Fstl1的功能研究背景 | 第84-89页 |
| ·Fstl1在肺部发育过程中的调控作用 | 第84-85页 |
| ·Fstl1在输尿管发育过程中的调控作用 | 第85-86页 |
| ·Fstl1是骨关节炎损伤的血清学标志 | 第86-87页 |
| ·Fstl1在骨骼发育中的作用 | 第87页 |
| ·Fstl1在前成脂肪细胞向脂肪细胞的转变中的作用 | 第87-88页 |
| ·Fstl1在先天免疫中的作用 | 第88页 |
| ·Fstl1与癌症的关系 | 第88-89页 |
| 第二节 Fstl1的结构研究背景 | 第89-101页 |
| ·Fstl1的结构域组成 | 第89-91页 |
| ·Fstl1同源蛋白的结构研究 | 第91-101页 |
| 第三节 Fstl1的研究意义 | 第101-102页 |
| 第五章 Fstl1 FOLN-KAZAL结构域的结构研究 | 第102-135页 |
| 第一节 实验内容与方法 | 第102-107页 |
| ·分子克隆 | 第102-103页 |
| ·细胞培养、转染及稳定表达细胞系的筛选 | 第103-104页 |
| ·Fstl1的真核表达与纯化 | 第104-105页 |
| ·Fstl1的原核表达与纯化 | 第105页 |
| ·蛋白质结晶 | 第105-106页 |
| ·数据收集和处理 | 第106页 |
| ·N末端氨基酸序列分析 | 第106页 |
| ·结构解析和修正 | 第106-107页 |
| ·分析型超速离心实验(AUC) | 第107页 |
| 第二节 Fstl1的表达与纯化 | 第107-118页 |
| ·Fstl1的真核表达与纯化 | 第107-114页 |
| ·Fstl1的原核表达与纯化 | 第114-118页 |
| 第三节 Fstl1 FOLN-KAZAL结构域的结构解析 | 第118-126页 |
| ·Fstl1 FOLN-KAZAL结构域的晶体生长及优化 | 第118-120页 |
| ·N末端氨基酸序列分析 | 第120-121页 |
| ·Fstl1的结构解析 | 第121-126页 |
| 第四节 Fstl1 FOLN-KAZAL结构域的结构分析 | 第126-135页 |
| ·Fstl1 FOLN-KAZAL结构域整体结构 | 第126-128页 |
| ·Fstl1 FOLN-KAZAL结构域的结构特征 | 第128-129页 |
| ·Fstl1 FOLN-KAZAL结构域与同源蛋白的结构比较 | 第129-133页 |
| ·分析型超速离心实验 | 第133-135页 |
| 第六章 结论 | 第135-138页 |
| 参考文献 | 第138-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 个人简历 | 第145页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第145页 |
