| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-29页 |
| ·PRDM1基因简介 | 第12-16页 |
| ·PRDM1基因的结构 | 第12-13页 |
| ·PRDM1基因的表达与功能 | 第13-15页 |
| ·PRDM1作用的分子机制 | 第15-16页 |
| ·鸡PRDM1简介 | 第16页 |
| ·鸟类发育生物学 | 第16-25页 |
| ·鸡卵子的发育 | 第17-20页 |
| ·鸡胚胎的早期发育 | 第20-23页 |
| ·鸡生殖细胞系的发育 | 第23-25页 |
| ·鸡胚的遗传操作 | 第25-27页 |
| ·逆转录病毒载体法 | 第26页 |
| ·慢病毒载体法 | 第26-27页 |
| ·DF-1细胞系简介 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-48页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·实验动物及种蛋 | 第29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| ·试剂及耗材 | 第29-30页 |
| ·主要试剂配制 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-48页 |
| ·样本采集 | 第32-33页 |
| ·总RNA的提取和反转录 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR | 第34页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第34-35页 |
| ·Western blot | 第35-37页 |
| ·免疫组化 | 第37-38页 |
| ·免疫荧光 | 第38页 |
| ·PAS染色 | 第38页 |
| ·Prdm1基因的克隆 | 第38-40页 |
| ·慢病毒表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·慢病毒包装及滴度检测 | 第41-42页 |
| ·微注射玻璃针的准备 | 第42-43页 |
| ·显微注射慢病毒载体 | 第43页 |
| ·组织DNA的提取 | 第43-44页 |
| ·表达载体pEGFP-N1-PRDM1的构建 | 第44-45页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·脂质体法转染细胞 | 第45-46页 |
| ·统计 | 第46页 |
| ·引物列表 | 第46-48页 |
| 第三章 PRDM1在鸡胚和生殖细胞系发育中的表达 | 第48-63页 |
| ·背景 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-59页 |
| ·胚盘/胚胎和各组织中prdml mRNA的检测 | 第48-49页 |
| ·Prdm1 mRNA的定量分析 | 第49-51页 |
| ·不同组织中PRDM1蛋白的表达与定位 | 第51-56页 |
| ·PRDM1是性腺中生殖细胞和血液PGCs的标志 | 第56-59页 |
| ·胚盘细胞中PRDM1蛋白的定位 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-63页 |
| 第四章 PRDM1过表达对鸡胚发育的影响 | 第63-73页 |
| ·背景 | 第63页 |
| ·实验结果 | 第63-66页 |
| ·慢病毒表达载体GV208-PRDM1的构建 | 第63-65页 |
| ·显微注射慢病毒载体后胚胎存活率和出雏率统计结果 | 第65-66页 |
| ·显微注射慢病毒表达载体后鸡胚各组织中荧光检测 | 第66页 |
| ·显微注射慢病毒表达载体后鸡胚中外源性prdm1的DNA检测 | 第66页 |
| ·显微注射慢病毒表达载体后鸡胚中外源性prdm1 mRNA的检测 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-73页 |
| 第五章 DF-1细胞中PRDM1过表达诱导G0/G1期停滞 | 第73-83页 |
| ·背景 | 第73页 |
| ·实验结果 | 第73-81页 |
| ·pEGFP-N1-PRDM1表达载体的构建 | 第73-75页 |
| ·PRDM1定位于DF-1细胞的细胞核 | 第75页 |
| ·DF-1细胞中prdm1的过表达 | 第75页 |
| ·PRDM1过表达导致细胞周期G0/G1期停滞 | 第75-76页 |
| ·p53及p53相关基因的表达 | 第76-77页 |
| ·Rb通路相关基因的表达 | 第77-78页 |
| ·细胞周期蛋白基因的表达 | 第78页 |
| ·PRDM1过表达抑制DF-1增殖并改变细胞形态 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第六章 结论与展望 | 第83-84页 |
| ·结论 | 第83页 |
| ·展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 附录 | 第92-94页 |
| Prdm1 cDNA序列 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 个人简历 | 第95页 |
