| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| ·文献综述 | 第7-15页 |
| ·荧光假单胞菌的生防机制 | 第7-10页 |
| ·抗生素2,4-DAPG的生物合成基因簇 | 第10-11页 |
| ·抗生素2,4-DAPG合成基因表达的调控 | 第11-13页 |
| ·DsbA的研究进展 | 第13-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 菌株2P24抗生素2,4-DAPG合成基因phlA启动子及其转录表达调控的分析 | 第16-42页 |
| ·材料与方法 | 第16-26页 |
| ·菌株、载体及培养条件 | 第16-18页 |
| ·试剂材料 | 第18-19页 |
| ·DNA操作方法 | 第19-21页 |
| ·phlA基因启动子报告质粒的构建 | 第21-24页 |
| ·β-半乳糖苷酶酶活测定 | 第24页 |
| ·突变体的构建 | 第24-25页 |
| ·PhlF蛋白的表达及纯化 | 第25页 |
| ·PhlF蛋白抗体的制备 | 第25-26页 |
| ·Western Blotting | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-39页 |
| ·phlA启动子序列的分析 | 第26-28页 |
| ·不同长度phlA基因启动子在胞内的活力测定 | 第28-29页 |
| ·不同长度phlA基因启动子在各个转录调控因子突变体中的活力测定 | 第29-35页 |
| ·转录调控因子对PhlF蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| ·GacA因子调控phlA基因转录的机制 | 第36-39页 |
| ·结论与讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 菌株2P24中调控蛋白RsmA、RsmE上游转录调控因子的筛选 | 第42-59页 |
| ·材料与方法 | 第42-46页 |
| ·菌株、载体与培养条件 | 第42-43页 |
| ·DNA操作方法 | 第43-44页 |
| ·调控蛋白RsmA、RsmE上游调控基因的筛选和克隆 | 第44-45页 |
| ·vacB基因缺失突变菌株和互补菌株的构建 | 第45页 |
| ·2,4-DAPG的提取与检测 | 第45页 |
| ·报告菌平板的制备及信号检测 | 第45-46页 |
| ·游动性与生物膜的测定 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-56页 |
| ·Tn5转座诱变及突变子的筛选 | 第46-47页 |
| ·突变子侧翼序列的克隆 | 第47-48页 |
| ·菌株2P24中vacB基因的鉴定及缺失突变体的构建 | 第48-50页 |
| ·VacB对菌株2P24在低温条件下生长的影响 | 第50-51页 |
| ·VacB对抗生素产量及其合成基因phlA的影响 | 第51页 |
| ·VacB对小RNA及调控蛋白RsmA/E的调控 | 第51-53页 |
| ·VacB对菌株信号分子的产生及AHL信号合成基因pcoI的影响 | 第53-55页 |
| ·VacB对菌株游动性及生物膜形成的影响 | 第55-56页 |
| ·结论与讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 荧光假单胞杆菌2P24周质蛋白DsbA通过小蛋白RsmA调控抗生素产量 | 第59-72页 |
| ·材料与方法 | 第59-63页 |
| ·菌株、质粒和培养条件 | 第59-61页 |
| ·DNA操作方法 | 第61-62页 |
| ·突变菌株的构建 | 第62页 |
| ·2,4-DAPG、MAPG和PG的提取与检测 | 第62页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第62-63页 |
| ·Western印记杂交 | 第63页 |
| ·平板拮抗能力的测定 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-70页 |
| ·DsbA对抗生素产量的影响 | 第63-64页 |
| ·DsbA对2,4-DAPG合成基因phlA表达的影响 | 第64-65页 |
| ·DsbA通过调控小蛋白RsmA影响phlA基因的表达 | 第65-67页 |
| ·RsmA的自我正反馈调控 | 第67页 |
| ·DsbA对RsmA的转录调控是间接的 | 第67-68页 |
| ·DsbA与小蛋白RsmA/E的互作 | 第68-69页 |
| ·双因子系统PhoQ/PhoP对菌株2P24拮抗活性的影响 | 第69-70页 |
| ·结论与讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 作者简历 | 第89页 |
