| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-30页 |
| ·微生物冶金的重要意义 | 第14页 |
| ·微生物冶金的历史和研究现状 | 第14-18页 |
| ·微生物冶金的历史 | 第14-16页 |
| ·硫化矿物的生物浸出 | 第16-17页 |
| ·生物浸出体系中的微生物多样性 | 第17页 |
| ·多种微生物混合浸出的研究情况 | 第17-18页 |
| ·At.ferrooxidans(嗜酸氧化亚铁硫杆菌) | 第18-22页 |
| ·At.ferrooxidans的分类学研究 | 第18-19页 |
| ·At.ferrooxidans的亚铁氧化 | 第19-21页 |
| ·At.ferrooxidans的碳同化 | 第21-22页 |
| ·Aph.acidophilum(氧化硫嗜酸菌) | 第22-23页 |
| ·At.ferrooxidans与Aph.acidophilum混合浸矿研究 | 第23-24页 |
| ·RT-qPCR技术及其在微生物学中的应用研究 | 第24-28页 |
| ·RT-qPCR原理 | 第24页 |
| ·荧光扩增曲线 | 第24页 |
| ·荧光阈值和Ct值 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的定量方法 | 第25-26页 |
| ·RT-qPCR的影响因素及其优化 | 第26-28页 |
| ·RT-qPCR在微生物中的应用 | 第28页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 2 RT-qPCR定量的可靠性评估及应用 | 第30-41页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·微生物的培养 | 第30-31页 |
| ·DNA提取 | 第31页 |
| ·RT-qPCR引物及其特异性检测 | 第31-32页 |
| ·Real-time qPCR | 第32页 |
| ·培养物用量评估 | 第32页 |
| ·RT-qPCR定量效果检验 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·DNA提取效果 | 第33-34页 |
| ·RT-qPCR引物特异性 | 第34-35页 |
| ·DNA提取所需培养物的用量 | 第35-38页 |
| ·RT-qPCR定量效果 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·DNA提取时所需的总细胞数量范围 | 第38-39页 |
| ·线性拟合图系统误差产生的原因 | 第39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 3 共培养体系的构建及其生长动态变化规律研究 | 第41-51页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·共培养体系的构建及验证 | 第41-42页 |
| ·亚铁氧化及pH值的测定 | 第42页 |
| ·微生物相对数量变化检测 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-48页 |
| ·共培养的驯化 | 第42-44页 |
| ·共培养体系的验证 | 第44页 |
| ·At.ferrooxidans纯培养及共培养的生长动态变化 | 第44-46页 |
| ·At.ferrooxidans纯培养和共培养对Fe~(2+)氧化及pH值比较 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·构建共培养体系时物种的选择 | 第48页 |
| ·构建共培养体系时培养基的选择 | 第48-49页 |
| ·共培养体系中两种微生物的生长状态 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 4 纯培养与共培养Fe~(2+)氧化和CO_2固定基因表达差异 | 第51-64页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-56页 |
| ·微生物的培养和细胞收集 | 第51-52页 |
| ·RNA提取、纯化及反转录成cDNA | 第52-54页 |
| ·RT-qPCR及其特异性引物 | 第54-56页 |
| ·实验结果 | 第56-60页 |
| ·RT-qPCR引物的特异性 | 第56-57页 |
| ·纯培养与共培养Fe~(2+)氧化相关基因表达差异 | 第57-58页 |
| ·纯培养与共培养CO_2固定相关基因的表达差异 | 第58-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·共培养对能源的高效利用 | 第60-61页 |
| ·共培养对碳源的循环利用 | 第61页 |
| ·共培养的铁代谢与碳代谢 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 5 葡萄糖对At.ferrooxidans纯培养及共培养的影响 | 第64-76页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·微生物的培养 | 第64-65页 |
| ·Fe~(2+)氧化及pH值的测定 | 第65页 |
| ·微生物相对数量变化检测 | 第65页 |
| ·RNA提取、纯化及反转录成cDNA | 第65页 |
| ·RT-qPCR | 第65页 |
| ·实验结果 | 第65-74页 |
| ·葡萄糖对纯培养及共培养生理活性的影响 | 第65-67页 |
| ·葡萄糖对两种微生物生长量的影响 | 第67-70页 |
| ·葡萄糖对亚铁氧化相关基因表达的影响 | 第70-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·共培养的协同作用与其对葡萄糖的耐受 | 第74页 |
| ·葡萄糖对At.ferrooxidans的抑制与生物修复 | 第74-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| 6 纯培养与共培养对四种金属离子抗性差异及生物浸出 | 第76-93页 |
| ·实验材料 | 第76-78页 |
| ·菌株 | 第76-77页 |
| ·实验矿样 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78-79页 |
| ·微生物培养及检测 | 第78页 |
| ·Fe~(2+)氧化及pH值的测定 | 第78页 |
| ·金属抗性实验 | 第78-79页 |
| ·微生物浸出实验 | 第79页 |
| ·结果 | 第79-89页 |
| ·纯培养与共培养对四种金属离子的抗性 | 第79-85页 |
| ·黄铁矿浸出实验 | 第85-86页 |
| ·低品位黄铜矿浸出实验 | 第86-89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| ·生物浸出体系中嗜酸菌的金属离子抗性 | 第89-90页 |
| ·含铁量对浸出效率的影响 | 第90-91页 |
| ·黄铁矿生物浸出的过程 | 第91页 |
| ·本章小结 | 第91-93页 |
| 7 全文总结 | 第93-96页 |
| 参考文献 | 第96-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第109页 |
