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深海细菌Aeromonas sp.HC11e-3 β-葡萄糖苷酶的克隆、表达,生化特性以及定点突变

目录第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第11-12页
1. 前言第12-31页
   ·海洋微生物及其来源的酶类第12-13页
   ·β-葡萄糖苷酶及其作用底物第13-15页
   ·β-葡萄糖苷酶的生理功能第15-20页
   ·β-葡萄糖苷酶的分类第20-22页
   ·β-葡萄糖苷酶的作用机理第22-23页
   ·β-葡萄糖苷酶的应用第23-27页
     ·β-葡萄糖苷酶在生物能源工业中的应用第23-24页
     ·β-葡萄糖苷酶在食品工业中的应用第24-25页
     ·β-葡萄糖苷酶在中药工业上的应用第25页
     ·β-葡萄糖苷酶在合成功能糖苷类活性物质上的应用第25-27页
   ·微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆与特性研究第27-30页
   ·本研究的目的和意义第30-31页
2. 材料与方法第31-47页
   ·材料与试剂第31-34页
     ·菌株与质粒第31-32页
     ·试剂第32页
     ·培养基第32页
     ·溶液第32-34页
     ·仪器设备第34页
   ·方法第34-47页
     ·分子生物学常规操作第34-39页
     ·葡萄糖苷酶基因的克隆第39-43页
     ·葡萄糖苷酶酶学性质研究第43-47页
3. 结果与分析第47-70页
   ·海洋细菌高活性β-葡萄糖苷酶产生菌的筛选第47-48页
   ·海洋细菌Aeromonas sp.HC11e-3基因组文库的构建第48-51页
     ·海洋细菌总DNA的抽提第48-49页
     ·海洋细菌总DNA的酶切回收第49-50页
     ·海洋细菌基因组文库检测第50页
     ·β-葡萄糖苷酶阳性克隆子的筛选第50-51页
   ·β-葡萄糖苷酶序列的生物信息学分析第51-55页
     ·阳性克隆子DNA序列分析第51-52页
     ·β-葡萄糖苷酶基因的生物信息学预测第52页
     ·β-葡萄糖苷酶的氨基酸组成,等电点,信号肽,疏水性分析第52-53页
     ·β-葡萄糖苷酶的同源比对第53-55页
   ·β-葡萄糖苷酶基因的克隆第55-56页
   ·β-葡萄糖苷酶的重组表达纯化第56-57页
     ·β-葡萄糖苷酶的诱导表达纯化第56-57页
     ·β-葡萄糖苷酶的蛋白浓度测定第57页
   ·β-葡萄糖苷酶的酶学特性第57-65页
     ·β-葡萄糖苷酶的最适pH,最适温度及pH和温度稳定性第57-59页
     ·β-葡萄糖苷酶的动力学特性第59页
     ·β-葡萄糖苷酶的离子抑制特性第59-60页
     ·β-葡萄糖苷酶的底物特异性第60-62页
     ·薄层层析分析β-葡萄糖苷酶对纤维寡糖的水解能力第62页
     ·β-葡萄糖苷酶的时间水解特性第62-63页
     ·β-葡萄糖苷酶的葡萄糖耐受特性第63-65页
   ·β-葡萄糖苷酶的三维结构模拟及定点突变第65-70页
     ·β-葡萄糖苷酶结构域模拟第65-66页
     ·β-葡萄糖苷酶活性位点的三维结构功能分析第66-67页
     ·β-葡萄糖苷酶基因的重叠延伸突变第67-68页
     ·β-葡萄糖苷酶活性突变子的重组表达纯化第68-69页
     ·β-葡萄糖苷酶活性突变子的活性检测第69-70页
4. 讨论第70-75页
参考文献第75-82页
致谢第82-83页
附录 葡萄糖苷酶的核苷酸序列及氨基酸序列第83-86页

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