中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略词表 | 第9-14页 |
文献综述 | 第14-20页 |
1 减蛋综合征病毒分类 | 第14页 |
2 流行病学特点 | 第14-15页 |
3 EDSV病原特性 | 第15页 |
4 EDSV100K蛋白结构与功能 | 第15-16页 |
5 减蛋综合征的诊断和检测技术 | 第16-19页 |
·临床诊断 | 第16页 |
·剖检诊断 | 第16-17页 |
·实验室诊断 | 第17-19页 |
·病原分离和鉴定 | 第17页 |
·清学诊断 | 第17-18页 |
·分子生物学诊断 | 第18-19页 |
6 以EDSV作为基因工程载体的研究 | 第19-20页 |
研究目的与意义 | 第20-21页 |
第一章 鸭减蛋综合征PCR检测方法的建立及对样品的检测 | 第21-44页 |
1 材料 | 第21-23页 |
·试验毒株、菌株 | 第21页 |
·实验动物 | 第21页 |
·实验试剂 | 第21页 |
·试验耗材及主要仪器 | 第21-22页 |
·溶液的配制 | 第22-23页 |
·生理盐水的配制 | 第22页 |
·pH 7.20.01 mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS) | 第22页 |
·6×上样缓冲液 | 第22页 |
·50×TAE | 第22-23页 |
·样品采集 | 第23页 |
·采集地选取 | 第23页 |
·血样处理 | 第23页 |
2 试验方法 | 第23-28页 |
·引物的设计与合成 | 第23页 |
·病毒增殖 | 第23页 |
·病毒DNA抽提 | 第23-24页 |
·病毒DNA浓度和纯度测定 | 第24页 |
·PCR反应条件的优化 | 第24-25页 |
·PCR产物的鉴定 | 第25-26页 |
·电泳鉴定 | 第25页 |
·测序鉴定 | 第25-26页 |
·PCR特异性试验 | 第26页 |
·检测其他抗原 | 第26页 |
·实验感染母鸭各脏器的PCR检测 | 第26页 |
·PCR敏感性试验 | 第26页 |
·将建立的PCR检测方法用于血样检测 | 第26-27页 |
·凝块白细胞层DNA的提取 | 第26-27页 |
·样品DNA的PCR检测 | 第27页 |
·阳性样品测序并进行生物信息学分析 | 第27-28页 |
·核苷酸序列分析 | 第27页 |
·氨基酸序列分析 | 第27-28页 |
3 试验结果 | 第28-41页 |
·PCR反应条件优化结果 | 第28页 |
·PCR产物的鉴定 | 第28-29页 |
·PCR特异性试验 | 第29-31页 |
·检测其他抗原 | 第29-30页 |
·实验感染母鸭各脏器的PCR检测 | 第30-31页 |
·PCR敏感性试验 | 第31-32页 |
·样品PCR检测结果 | 第32页 |
·阳性样品测序并进行生物信息学分析 | 第32-41页 |
·阳性样品测序结果 | 第32-34页 |
·核苷酸序列分析 | 第34-36页 |
·氨基酸序列分析 | 第36-41页 |
4 分析与讨论 | 第41-43页 |
5 小结 | 第43-44页 |
第二章 西南地区鸭减蛋综合征血清学调查 | 第44-53页 |
1 试验材料 | 第44-46页 |
·标准抗原、阳性血清 | 第44页 |
·试验动物 | 第44页 |
·试验耗材及主要仪器 | 第44-45页 |
·溶液的配制 | 第45-46页 |
·生理盐水的配制 | 第45页 |
·血细胞保护液(阿氏液) | 第45页 |
·1%鸡红细胞悬液的配制 | 第45页 |
·pH7.20.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS) | 第45-46页 |
·样品采集 | 第46页 |
·采集地选取 | 第46页 |
·样处理 | 第46页 |
2 试验方法 | 第46-48页 |
·抗原凝集效价测定 | 第46页 |
·配制抗原工作液 | 第46-47页 |
·血凝抑制试验 | 第47页 |
·结果判定 | 第47-48页 |
·当对照出现下列结果时试验成立 | 第47-48页 |
·判定标准 | 第48页 |
·人工感染母鸭组织带毒检测 | 第48页 |
3 试验结果 | 第48-51页 |
·血凝抑制试验结果 | 第48-50页 |
·人工感染母鸭组织带毒检测 | 第50-51页 |
4 分析与讨论 | 第51-52页 |
5 小结 | 第52-53页 |
全文结论 | 第53-54页 |
主要参考文献 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
研究生期间发表论文 | 第58页 |