| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-29页 |
| 第一章 卵巢内血管内皮生长因子(VEGF)基因的研究进展 | 第12-20页 |
| 1. VEGF基因的研究 | 第12-16页 |
| ·VEGF基因的发现过程 | 第12页 |
| ·VEGF基因的结构 | 第12-14页 |
| ·VEGF的受体 | 第14-15页 |
| ·VEGF的功能 | 第15-16页 |
| 2. VEGF与卵泡发育 | 第16-20页 |
| 第二章 CYP19基因组织特异性表达调控研究进展 | 第20-24页 |
| 1. 真核生物启动子的简介 | 第20页 |
| 2. CYP19基因的结构和组织特异性 | 第20-24页 |
| 第三章 慢病毒载体研究进展 | 第24-29页 |
| 1. 动物转基因研究的发展历程 | 第24页 |
| 2. 转基因动物的应用 | 第24-25页 |
| 3. 慢病毒介导基因动物技术 | 第25-29页 |
| ·慢病毒载体的组成成分 | 第26-27页 |
| ·慢病毒载体安全性问题 | 第27-29页 |
| 第二部分 实验研究 | 第29-84页 |
| 第四章 载体的构建 | 第29-52页 |
| 1. 材料与仪器 | 第29页 |
| ·菌种及试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-41页 |
| ·慢病毒载体pL-CYP19的构建 | 第30-32页 |
| ·荧光蛋白报告载体pEGFP-C1-VEGF的构建 | 第32-39页 |
| ·慢病毒载体pL-CYP19-VEGF的构建 | 第39-41页 |
| 3 结果统计及分析 | 第41-49页 |
| ·慢病毒载体pL-CYP19的构建结果 | 第41-43页 |
| ·荧光蛋白报告载体pEGFP-C1-VEGF的构建结果 | 第43-47页 |
| ·慢病毒载体pL-CYP19-VEGF的构建结果 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 第五章 CYP19启动子在小鼠不同种细胞中启动表达的效果 | 第52-66页 |
| 1. 材料与仪器 | 第52-53页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52-53页 |
| 2. 试验方法 | 第53-60页 |
| ·小鼠颗粒细胞的分离与培养 | 第53页 |
| ·C2C12细胞的培养 | 第53-54页 |
| ·MEF细胞的培养 | 第54-55页 |
| ·3T3细胞的培养 | 第55页 |
| ·细胞转染 | 第55-57页 |
| ·细胞总RNA的提取与反转录 | 第57-59页 |
| ·Realtime PCR检测有关基因的表达水平 | 第59-60页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第60-64页 |
| ·细胞转染结果 | 第60-61页 |
| ·不同种细胞中CYP19特异性比较 | 第61-64页 |
| 4. 讨论 | 第64-66页 |
| 第六章 超表达VEGF基因的慢病毒载体功能验证 | 第66-84页 |
| 1. 材料与仪器 | 第66-67页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第66页 |
| ·主要实验仪器 | 第66-67页 |
| 2 试验方法 | 第67-74页 |
| ·慢病毒生产与浓缩 | 第67-71页 |
| ·质粒及慢病毒分别转染MGC细胞 | 第71-72页 |
| ·细胞总RNA的提取与反转录 | 第72页 |
| ·Realtime PCR检测 | 第72-74页 |
| 3 实验结果与分析 | 第74-79页 |
| ·病毒滴度测定结果 | 第74页 |
| ·质粒转染MGC细胞结果 | 第74-75页 |
| ·不同体积的慢病毒感染MGC效果 | 第75-76页 |
| ·慢病毒感染后MGC细胞中有关基因的表达变化 | 第76-79页 |
| 4. 讨论 | 第79-84页 |
| 全文结论 | 第84-86页 |
| 附录 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
