| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-14页 |
| 文献综述 日本乙型脑炎的研究进展 | 第14-38页 |
| 一、日本乙型脑炎流行病学特征 | 第14-16页 |
| 1 病原学 | 第14页 |
| 2 流行病学 | 第14-15页 |
| 3 临床症状和病理变化 | 第15-16页 |
| 二、日本乙型脑炎病毒分子生物学特征及致病机制 | 第16-20页 |
| 1 乙型脑炎病毒蛋白的特点 | 第16-19页 |
| 2 乙型脑炎病毒的基因分型 | 第19页 |
| 3 病毒变异 | 第19-20页 |
| 4 JEV的生物合成 | 第20页 |
| 5 日本乙型脑炎的致病机制 | 第20页 |
| 三、日本乙型脑炎的诊断检测方法研究进展(主要介绍单克隆抗体技术和噬菌体展示肽库技术) | 第20-30页 |
| 1. 日本乙型脑炎诊断技术的应用发展 | 第20-21页 |
| 2. 单克隆抗体制备技术的研究发展 | 第21-24页 |
| 3. 噬菌体展示肽库筛选技术的研究发展 | 第24-27页 |
| 4. JEV的疫苗研究进展 | 第27-29页 |
| 5. 抗原表位研究进展 | 第29-30页 |
| 四、日本乙型脑炎的综合防治 | 第30-33页 |
| 1. 饲养管理 | 第30页 |
| 2. 传播途径的防控 | 第30-31页 |
| 3 免疫防治 | 第31-32页 |
| 4 加强监测 | 第32页 |
| 5 积极宣传 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 第一章 猪流行性乙型脑炎单克隆抗体的制备 | 第38-56页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| ABSTRACT | 第39-41页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| ·病毒及细胞 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-48页 |
| ·制备纯的全病毒抗原 | 第42-43页 |
| ·杂交瘤细胞系的建立 | 第43-46页 |
| ·体内诱生腹水法制备单抗 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第47页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清及单抗的效价测定 | 第47-48页 |
| 3 试验结果 | 第48-51页 |
| ·抗原的制备、纯化及鉴定 | 第48页 |
| ·小鼠的免疫 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第49页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清及单抗的效价测定 | 第49-50页 |
| ·抗体分泌稳定性测试 | 第50-51页 |
| ·单克隆抗体的亚型测定和纯化 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 第二章 猪流行性乙型脑炎单克隆抗体的特性鉴定 | 第56-74页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| ABSTRACT | 第57-59页 |
| 1 实验材料 | 第59-60页 |
| ·病毒及细胞 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器设备 | 第59-60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| 2 实验方法 | 第60-63页 |
| ·免疫印迹(Western Blot) | 第60页 |
| ·间接免疫荧光(IFA) | 第60-61页 |
| ·流式细胞术分析单抗2B4在自然条件下与BHK细胞以及感染JEV的BHK细胞的结合情况 | 第61页 |
| ·中和实验 | 第61-62页 |
| ·ELISA鉴定单抗与某些JEV蛋白的反应 | 第62页 |
| ·单抗2B4检测患乙型脑炎乳鼠脑脊液的应用 | 第62-63页 |
| 3 实验结果 | 第63-70页 |
| ·免疫印迹(Western Blot)和间接免疫荧光(IFA) | 第63-66页 |
| ·流式细胞术分析单抗在自然条件下与BHK细胞以及感染JEV的BHK细胞的结合情况 | 第66-67页 |
| ·中和实验 | 第67-69页 |
| ·ELISA鉴定单抗与某些JEV蛋白的反应 | 第69页 |
| ·单抗2B4检测患乙型脑炎乳鼠脑脊液的应用 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第三章 猪流行性乙型脑炎EDⅢ表位的鉴定 | 第74-90页 |
| 摘要 | 第74-75页 |
| ABSTRACT | 第75-77页 |
| 1 实验材料 | 第77-78页 |
| ·病毒、细菌及细胞 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77-78页 |
| ·主要仪器设备 | 第78页 |
| 2 实验方法 | 第78-82页 |
| ·用噬菌体表面展示肽库初步筛选单抗的表位 | 第78-81页 |
| ·用MegAlign和Blast分析同源性序列 | 第81页 |
| ·合成多肽并用ELISA确认作用位点 | 第81-82页 |
| 3 实验结果 | 第82-86页 |
| ·噬菌体表面展示肽库初步筛选单抗的表位 | 第82页 |
| ·阳性噬菌体克隆的噬菌体ELISA检测、测序和同源性分析 | 第82-84页 |
| ·合成多肽并用ELISA确认作用位点 | 第84-85页 |
| ·~(E394)HHWH~(E397)的空间构象及理化分析 | 第85-86页 |
| 4 讨论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-90页 |
| 全文总结 | 第90-94页 |
| 1 猪流行性乙型脑炎单克隆抗体的制备 | 第90页 |
| 2 猪流行性乙型脑炎单克隆抗体的特性鉴定 | 第90-91页 |
| 3 猪流行性乙型脑炎单克隆抗体的EDⅢ表位的鉴定 | 第91-94页 |
| 附录 | 第94-102页 |
| 1. SDS-PAGE中主要试剂的配制 | 第94-95页 |
| 2. ELISA中主要试剂的配制 | 第95-96页 |
| 3. WESTERN BLOT分析中主要溶液的配制 | 第96-97页 |
| 4. 单抗纯化试剂 | 第97页 |
| 5. 细胞培养中所用溶液的配制 | 第97-98页 |
| 6. 噬菌体展示肽库筛选中所用到的试剂 | 第98-100页 |
| 7. 其它常用试剂的配制 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
