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长牡蛎基因区SNP标记规模开发及其在遗传育种研究中的应用

致谢第1-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述第16-52页
 1 牡蛎与长牡蛎第16-18页
 2 牡蛎养殖及育种第18-21页
 3 遗传标记的发展历程第21-23页
   ·遗传标记和分子标记第21页
   ·形态标记第21-22页
   ·细胞学标记第22页
   ·生化标记第22页
   ·分子标记第22-23页
 4 分子标记的分类第23-28页
 5 SNP 标记在水产动物中的应用第28-30页
   ·SNP 应用于水产动物遗传连锁图谱构建第28页
   ·SNP 在群体遗传学中种群进化和亲缘关系中的应用第28页
   ·SNP 在基因连锁不平衡、关联分析和基因功能研究方面的应用第28-30页
   ·SNP 在牡蛎生物学研究中的进展第30页
 6 SNP 标记分型检测方法第30-41页
   ·基于电泳的 SNP 检测方法第31-33页
   ·基于序列杂交的 SNP 检测方法第33-36页
   ·基于测序的 SNP 检测方法第36-38页
   ·基于等位基因特异性扩增的 SNP 检测方法第38-39页
   ·基于连接酶的 SNP 检测方法第39-40页
   ·基于酶切的 SNP 检测方法第40-41页
   ·基于分子量的飞行质谱法第41页
 7 海洋水产动物高密度遗传连锁图谱研究进展第41-46页
 8 HSP 蛋白研究进展第46-48页
   ·HSP 蛋白及其分类第46-47页
   ·HSP 的生物学功能第47-48页
 9 牡蛎近缘物种的种质鉴定第48-50页
 10 研究目的及意义第50-52页
第二章 长牡蛎基因组多态性验证及 SNP 标记的开发第52-83页
 1 引言第52-53页
 2 长牡蛎基因组多态性验证第53-60页
   ·实验材料第53页
   ·实验试剂第53页
   ·试验方法:第53-56页
   ·试验结果与分析第56-60页
 3 长牡蛎基因组 SNP 标记开发第60-83页
   ·候选 SNP 位点获取策略第60页
   ·分型方法的选定第60-63页
   ·主要实验仪器及试剂耗材第63-64页
     ·实验主要仪器第63-64页
     ·主要试剂耗材第64页
   ·实验材料第64页
   ·试验方法第64-69页
     ·转录组测序第64-65页
     ·长牡蛎基因组 DNA 提取及检测第65-66页
     ·引物设计第66-67页
     ·引物筛选第67-68页
     ·PCR 扩增第68页
     ·HRM 检测第68页
     ·测序验证第68-69页
     ·分型方法通量验证第69页
     ·SNP 标记在基因组上的定位第69页
   ·实验结果与分析第69-79页
     ·转录组 RNA 提取结果第69-70页
     ·转录组测序数据分析第70-71页
     ·样品基因组 DNA 提取结果第71页
     ·引物筛选第71-72页
     ·HRM 分型第72-73页
     ·通量效率验证第73-75页
     ·测序验证第75-77页
     ·内标校正第77-78页
     ·SNP 标记开发以及分型效率统计第78-79页
     ·SNP 标记的定位第79页
   ·讨论第79-83页
     ·PCR 产物单一性第79-80页
     ·额外 SNP 影响第80页
     ·内标校正第80页
     ·高通量分析策略第80-81页
     ·HRM 方法改进第81-82页
     ·长牡蛎 SNP 标记的定位及意义第82-83页
第三章 长牡蛎热激蛋白 HSP70 基因 SNP 标记开发及热刺激耐受相关分析第83-96页
 1 引言第83页
 2 实验材料第83页
 3 实验方法第83-85页
   ·高温敏感性差异群体的分离第83-84页
   ·DNA 提取第84页
   ·长牡蛎 HSP70 基因 SNP 标记的开发第84页
   ·SNP 标记的群体检测第84-85页
 4 结果与分析第85-96页
   ·长牡蛎 HSP70 基因的获得第85-86页
   ·长牡蛎 HSP70 基因 SNP 标记的开发第86-88页
   ·热刺激敏感群组的划分第88-89页
   ·DNA 提取第89页
   ·SNP 标记群体检测结果与分析第89-94页
   ·讨论第94-96页
第四章 长牡蛎高密度遗传连锁图谱构建第96-116页
 1 实验及技术背景介绍第96-97页
 2 实验材料第97页
 3 实验方法第97-104页
   ·样本 DNA 提取与检测第97页
   ·亲子鉴定引物设计第97-100页
   ·亲子鉴定引物筛选第100页
   ·测序仪分析 SSR 引物扩增片段第100-101页
   ·简化基因组文库构建及测序第101-103页
   ·测序数据处理第103-104页
   ·遗传图谱与基因组 Scaffold 的对应第104页
 4 实验结果与分析第104-113页
   ·DNA 提取结果第104页
   ·引物筛选结果检测第104-105页
   ·ABI3130 测序仪片段分析第105-106页
   ·测序数据统计第106-107页
   ·标记统计第107-108页
   ·标记编码基因型第108-109页
   ·标记类型分布统计第109页
   ·标记过滤第109-110页
   ·两点分析与图谱构建第110-112页
   ·图谱的参数统计第112页
   ·图谱标记的深度分布第112-113页
   ·图谱与基因组 Scaffold 的对应关系第113页
 5 讨论第113-116页
第五章 基于 SNP 的巨蛎属近缘物种种质鉴定方法第116-130页
 1 引言第116-117页
 2 材料第117页
 3 试验方法第117-119页
   ·基因组 DNA 提取第117页
   ·物种鉴定依据序列的获得第117-118页
   ·巨蛎属牡蛎 COI 基因序列的比对分析第118页
   ·引物设计第118页
   ·引物筛选第118页
   ·PCR 扩增第118-119页
   ·HRM 分析样品制备第119页
   ·HRM 分析第119页
 4 实验结果与分析第119-128页
   ·基因组 DNA 提取结果第119页
   ·COI 基因序列测序获得与比对第119-124页
   ·引物设计第124页
   ·PCR 扩增结果第124-125页
   ·高分辨率熔解曲线鉴定结果与分析第125-127页
   ·未知物种鉴定第127-128页
 5 讨论第128-130页
   ·引物设计原则第128页
   ·鉴定通量第128-129页
   ·本鉴定方法的优点第129-130页
第六章 总结与展望第130-133页
参考文献第133-153页
在学期间发表和即将发表的文章第153页
课题项目支持第153页

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