| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词 | 第9-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-31页 |
| ·前列腺素及其受体相关背景简介 | 第14-22页 |
| ·前列腺素E2及其受体概况 | 第14-17页 |
| ·对前列腺素受体EP3结构的当前认知 | 第17-19页 |
| ·前列腺素受体EP3各亚型的信号转导途径 | 第19-22页 |
| ·前列腺素受体EP3与疾病 | 第22-24页 |
| ·前列腺素受体EP3与炎症 | 第22-23页 |
| ·前列腺素受体EP3与肿瘤 | 第23-24页 |
| ·前列腺素受体的异源二聚 | 第24-27页 |
| ·G蛋白偶联受体的同源及异源二聚现象及其生物学意义 | 第24-26页 |
| ·前列腺素受体二聚现象的研究现状 | 第26-27页 |
| ·前列腺素类受体空间结构的研究方法 | 第27-28页 |
| ·核磁共振波谱法 | 第27-28页 |
| ·同源建模概述 | 第28页 |
| ·论文设计与实验方案 | 第28-31页 |
| ·论文目的 | 第28-29页 |
| ·实验设计 | 第29-31页 |
| ·EP3f的空间结构研究 | 第29-30页 |
| ·EP3f的同源和异源二聚及对上下游基因表达的影响机制探索 | 第30-31页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第31-48页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·试剂和溶液 | 第33-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-48页 |
| ·质粒构建 | 第35-40页 |
| ·EP3f-C末端的原核表达质粒构建 | 第35-37页 |
| ·EP3a、EP3b、EP3c、EP3d、EP3f的真核表达质粒构建 | 第37-40页 |
| ·原核细胞目的蛋白表达、纯化与复性 | 第40-43页 |
| ·目的蛋白表达 | 第40-41页 |
| ·表达条件优化 | 第41-42页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·纯化条件优化 | 第42页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第42-43页 |
| ·蛋白复性条件优化 | 第43页 |
| ·核磁共振检测 EP3f C末端结构 | 第43页 |
| ·一维氢谱核磁共振实验 | 第43页 |
| ·二维氢谱核磁共振TOCSY实验 | 第43页 |
| ·同源建模及分子对接 | 第43-44页 |
| ·真核细胞蛋白表达 | 第44-45页 |
| ·细胞培养 | 第44页 |
| ·细胞转染 | 第44-45页 |
| ·样品制备 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE及Western blot | 第45页 |
| ·免疫共沉淀（Co-IP） | 第45-46页 |
| ·荧光定量 PCR | 第46-48页 |
| 第三章 实验结果 | 第48-76页 |
| ·核磁共振法解析前列腺素受体EP3f C末端的结构 | 第48-62页 |
| ·EP3f的C末端表达载体的构建 | 第48-51页 |
| ·pMAL-p5X-EP3fC表达载体构建 | 第48-49页 |
| ·pET-20b-EP3fC和pET-26b-EP3fC质粒构建 | 第49-51页 |
| ·EP3fC表达载体的选择、高表达菌株的筛选及诱导条件优化 | 第51-56页 |
| ·pMAL-p5X-EP3fC-Rosetta的表达 | 第51-52页 |
| ·pET-20b-EP3fC-Rosetta的表达 | 第52-53页 |
| ·pET-26b-EP3fC-Rosetta的表达 | 第53-54页 |
| ·表达载体的选择及诱导条件的优化 | 第54-56页 |
| ·EP3fC的纯化 | 第56-57页 |
| ·EP3fC的复性及条件优化 | 第57-60页 |
| ·EP3fC的核磁共振一维氢谱结果 | 第60-61页 |
| ·EP3fC的核磁共振二维氢谱结果 | 第61-62页 |
| ·EP3胞外区、跨膜区、胞内环结构模拟以及通过分子对接研究其潜在配体结合位点 | 第62-66页 |
| ·EP3tr359的同源建模 | 第62-64页 |
| ·EP3tr359的分子对接 | 第64-66页 |
| ·前列腺素受体EP3的功能探索 | 第66-76页 |
| ·EP3a、EP3b、EP3c、EP3d和EP3f的真核表达质粒构建 | 第66-67页 |
| ·EP3a、EP3b、EP3c、EP3d和EP3f的真核表达 | 第67-68页 |
| ·EP3各亚型在293T细胞中的表达 | 第67-68页 |
| ·EP3各亚型在MCF-7细胞中的表达 | 第68页 |
| ·EP3f与EP3a、EP3b、EP3c、EP3d和EP3f的同源及异源二聚研究 | 第68-73页 |
| ·EP3f与 EP3a、EP3b、EP3c、EP3d异源相互作用对其上下游基因表达的影响 | 第73-76页 |
| 第四章 讨论 | 第76-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
