| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| ·口蹄疫及其危害 | 第11页 |
| ·近年来口蹄疫亚洲流行现状 | 第11-13页 |
| ·口蹄疫病毒非结构蛋白及其功能 | 第13-16页 |
| ·前导蛋白酶（Lpro） | 第13-14页 |
| ·2A、2B 和 2C | 第14页 |
| ·NSP 3A 和 NSP 3B | 第14-15页 |
| ·3C 蛋白酶（3Cpro） | 第15-16页 |
| ·3D 聚合酶（3Dpol） | 第16页 |
| ·表位鉴别诊断技术研究进展 | 第16-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌株、质粒和血清 | 第19页 |
| ·主要酶类及试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-29页 |
| ·表位的选择及引物的设计 | 第20页 |
| ·PCR 反应扩增 3A、3B 片段 | 第20-22页 |
| ·克隆载体 pET-32a-3AF/3BF 的构建 | 第22-24页 |
| ·基因串联表达载体 pET-32a-n+的构建 | 第24页 |
| ·目的蛋白的表达和 Western blot 鉴定 | 第24-25页 |
| ·牛 FMDV 抗体间接 ELISA 检测方法的标准化 | 第25-27页 |
| ·特异性试验 | 第27页 |
| ·敏感性试验 | 第27页 |
| ·重复性试验 | 第27-28页 |
| ·与 3 种同类商品化试剂盒的比较 | 第28页 |
| ·FMDV r-3AB 串联肽间接 ELISA 方法的初步应用 | 第28页 |
| ·奶液样品检测的的探索 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-44页 |
| ·3A、3B 短肽基因的 PCR 扩增结果 | 第29页 |
| ·串联肽重组表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·串联蛋白在大肠杆菌中的诱导表达和纯化 | 第30-32页 |
| ·串联蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·串联蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·串联蛋白的 western blot 鉴定 | 第32-34页 |
| ·牛 FMDV 抗体间接 ELISA 方法的建立及标准化 | 第34-39页 |
| ·r3AB-ELISA 相关条件的确定 | 第34-39页 |
| ·r3AB-ELISA 检测方法临界值的确定 | 第39页 |
| ·r3AB-ELISA 检测方法特异性和敏感性试验 | 第39-40页 |
| ·r3AB-ELISA 方法的重复性检测试验 | 第40页 |
| ·FMDV 抗体间接 ELISA 与同类商品化试剂盒的比较 | 第40-41页 |
| ·FMDV 抗体间接 ELISA 方法初步应用 | 第41-42页 |
| ·FMDV 抗体间接 ELISA 方法用于奶液的检测 | 第42-44页 |
| ·奶液样本的处理 | 第42页 |
| ·奶液 ELISA 的最终操作步骤 | 第42页 |
| ·奶液阳性样本的最低检出限量 | 第42-43页 |
| ·奶液临床样本的初步检测 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| ·选择重组串联蛋白建立间接 ELISA 检测方法的依据 | 第44页 |
| ·ELISA 临界值及可疑区间的判定 | 第44-45页 |
| ·ELISA 方法中相关条件的选择 | 第45页 |
| ·表位串联抗原用于奶样检测的可行性研究 | 第45-47页 |
| 5. 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |
