| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| ·泛素结合酶的相关知识 | 第12-15页 |
| ·泛素化过程 | 第12页 |
| ·E2 蛋白结构特点及种类 | 第12-13页 |
| ·E2 蛋白功能 | 第13-14页 |
| ·展望 | 第14-15页 |
| ·实验所用毕赤酵母背景 | 第15-16页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的生物学特性 | 第15页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表现型 | 第15-16页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的表达载体 | 第16页 |
| ·植物与盐胁迫 | 第16-23页 |
| ·植物对盐胁迫的反应 | 第17-18页 |
| ·盐胁迫对植物生理生化特性的影响 | 第18-19页 |
| ·植物对盐胁迫的适应机制 | 第19-23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-26页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| ·本研究的立题依据 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-36页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·cDNA 文库、载体及菌种 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·主要溶液和和培养基的配制 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·毕赤酵母高效转化方案制作转化子 | 第27-28页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·提取 RNA | 第28-29页 |
| ·RNA 反转录成 DNA | 第29页 |
| ·3′RACE | 第29-30页 |
| ·PCR 扩增程序 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶 DNA 回收 | 第30-31页 |
| ·pMD18-T 的连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌热击感受态的制备（DH5α） | 第31-32页 |
| ·重组质粒转化 E.coli. DH5α | 第32页 |
| ·质粒的提取 | 第32页 |
| ·以 cDNA（30×）为模板，进行基因全长的扩增 | 第32-33页 |
| ·双酶切过程（6 小时） | 第33页 |
| ·PCR 产物或者酶切片段等 DNA 纯化操作步骤 | 第33页 |
| ·构建真核表达载体的连接体系 | 第33-34页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第34页 |
| ·农杆菌感受态的冻融转化 | 第34页 |
| ·复验酵母转化子 | 第34-36页 |
| 3 实验内容及结果 | 第36-42页 |
| ·曲霉泛素结合酶基因的克隆与序列分析 | 第36-38页 |
| ·曲霉泛素结合酶基因的抗盐筛选 | 第36页 |
| ·曲霉 RNA 的提取与反转录 | 第36页 |
| ·曲霉泛素结合酶基因全长的克隆 | 第36-37页 |
| ·UBE2 序列生物信息学分析 | 第37-38页 |
| ·后续的转基因任务 | 第38页 |
| ·参考 PBI121 结构图（图 6），构建真核表达载体 | 第38页 |
| ·转化农杆菌 | 第38页 |
| ·复验酵母转化子 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-42页 |
| 4 实验分析及讨论 | 第42-46页 |
| ·曲霉泛素结合酶基因的生物信息学分析 | 第42-44页 |
| ·ProtParam 分析结果 | 第42页 |
| ·ORF Finder 分析结果 | 第42页 |
| ·BlastP 和 ClustalW 分析结果 | 第42-43页 |
| ·蛋白质二级结构预测 | 第43页 |
| ·CDD 和 ScanProsite 进行功能结构域分析结果 | 第43-44页 |
| ·使用Swiss-model和swiss-pdbviewer软件进行三维结构预测与三维结构分析的结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 硕士期间发表文章 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
