| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-15页 |
| ·冬虫夏草的研究概述 | 第9页 |
| ·原生质体的研究概况 | 第9-11页 |
| ·原生质体制备技术 | 第9-10页 |
| ·虫生真菌原生质体制备技术的研究概况 | 第10页 |
| ·原生质体技术的研究进展 | 第10-11页 |
| ·遗传多样性的含义 | 第11-13页 |
| ·遗传多样性的主要分子标记技术 | 第13-14页 |
| ·交配型基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·交配型基因在有性生殖方面的研究进展 | 第14页 |
| ·交配型基因在系统发育及遗传变异性上的应用 | 第14-15页 |
| 2 引言 | 第15-17页 |
| 3 实验材料 | 第17-21页 |
| ·供试菌株及其来源 | 第17-18页 |
| ·主要培养基 | 第18-19页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第19-20页 |
| ·所需溶液 | 第20-21页 |
| 4 实验方法 | 第21-27页 |
| ·冬虫夏草菌株的分离 | 第21页 |
| ·组织分离 | 第21页 |
| ·子囊孢子弹射分离 | 第21页 |
| ·单子囊孢子分离 | 第21页 |
| ·菌种分离结果的鉴定 | 第21页 |
| ·菌丝体的制备 | 第21-22页 |
| ·酶解所需菌丝体的制备 | 第21-22页 |
| ·DNA 提取所需菌丝体的制备 | 第22页 |
| ·原生质体的制备 | 第22-23页 |
| ·酶解体系的筛选 | 第22页 |
| ·同种酶解体系中酶的不同浓度配比的筛选 | 第22页 |
| ·酶解时间的筛选 | 第22页 |
| ·酶液的 pH 的筛选 | 第22页 |
| ·渗透压稳定剂的筛选 | 第22-23页 |
| ·渗透压稳定剂浓度的筛选 | 第23页 |
| ·DNA 的提取与纯化 | 第23页 |
| ·DNA 浓度和质量的检测 | 第23-24页 |
| ·凝胶电泳检测 | 第23页 |
| ·紫外吸收检测 | 第23-24页 |
| ·ISSR 用于种群遗传多样性的研究 | 第24-25页 |
| ·ISSR引物的筛选 | 第24页 |
| ·ISSR-PCR反应条件及程序 | 第24页 |
| ·ISSR扩增产物的检测 | 第24页 |
| ·ISSR电泳图谱统计与分析 | 第24-25页 |
| ·交配型基因mat1-2-1用于种群遗传多样性的研究 | 第25-27页 |
| ·mat1-2-1基因扩增引物 | 第25页 |
| ·交配型基因mat1-2-1的扩增反应体系 | 第25页 |
| ·扩增程序 | 第25-26页 |
| ·测序 | 第26页 |
| ·序列分析 | 第26-27页 |
| 5 结果与分析 | 第27-43页 |
| ·菌种分离结果鉴定 | 第27-28页 |
| ·组织分离与子囊弹射分离获得的菌株的鉴定 | 第27页 |
| ·单子囊孢子分离菌株的鉴定-冬虫夏草微循环产孢 | 第27-28页 |
| ·中国被毛孢分生孢子的液体培养 | 第28-31页 |
| ·分生孢子液体培养的生长过程 | 第28-30页 |
| ·分生孢子微循环产孢的方式 | 第30-31页 |
| ·芽生孢子的形成方式 | 第31页 |
| ·原生质体制备结果与分析 | 第31-36页 |
| ·酶解体系的筛选 | 第31-32页 |
| ·同种酶解体系中酶的不同浓度配比的筛选 | 第32页 |
| ·酶解最佳时间的筛选 | 第32-33页 |
| ·酶液的 pH 值的筛选 | 第33-34页 |
| ·渗透压稳定剂的筛选 | 第34页 |
| ·渗透压稳定剂浓度对原生质体制备的影响 | 第34-35页 |
| ·原生质体产生方式观察 | 第35-36页 |
| ·基因组DNA琼脂糖检测 | 第36页 |
| ·ISSR用于种群遗传多样性的研究 | 第36-41页 |
| ·ISSR扩增引物筛选结果 | 第36-37页 |
| ·多态性分析 | 第37-39页 |
| ·中国被毛孢菌株的ISSR聚类分析 | 第39-41页 |
| ·交配型基因 mat1-2-1用于种群遗传多样性的研究 | 第41-43页 |
| ·mat1-2-1基因的PCR扩增产物的电泳检测 | 第41页 |
| ·mat1-2-1基因序列分析 | 第41页 |
| ·交配型基因分析 | 第41-43页 |
| 6 讨论 | 第43-47页 |
| ·冬虫夏草无性型菌株的鉴定及其生长过程的观察 | 第43页 |
| ·菌龄对原生质体形成的影响 | 第43-44页 |
| ·原生质体制备过程中的影响因素 | 第44-45页 |
| ·酶的种类及其浓度配比 | 第44页 |
| ·酶解时间 | 第44页 |
| ·渗透压稳定剂的种类和浓度 | 第44-45页 |
| ·ISSR分子技术 | 第45页 |
| ·交配型基因mat1-2-1 | 第45页 |
| ·ISSR 分子技术和交配型基因mat1-2-1 的比较 | 第45-47页 |
| 7 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第54页 |
