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基于cDNA-AFLP分析茶树喷施化学杀虫剂前后的基因表达谱差异

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
图表清单第9-10页
1 文献综述第10-15页
   ·农药对植物生理生化影响的研究进展第10-12页
     ·农药对植物根系活力的影响第10页
     ·农药对植物生长发育及生理过程的影响第10页
     ·农药对植物次生物质及次生代谢的影响第10-11页
     ·农药对植物主要营养物质的影响第11页
     ·农药对植物代谢酶活性的影响第11页
     ·农药对植物活性氧代谢的影响第11-12页
   ·化学农药在茶树上的应用研究第12页
   ·基因表达差异谱的研究方法第12-15页
2 引言第15-17页
   ·研究意义及目的第15-16页
   ·研究内容第16页
   ·技术路线第16-17页
3 材料与方法第17-28页
   ·实验材料第17页
     ·处理与采样第17页
   ·仪器与试剂第17-18页
     ·主要实验仪器第17页
     ·主要试剂第17-18页
   ·实验方法第18-28页
     ·用于cDNA-AFLP双酶切的限制性内切酶酶切频率的预测分析第18页
     ·总RNA的提取和检测第18-19页
     ·cDNA第一链的合成第19-20页
     ·cDNA第二链合成及末端平滑化第20页
     ·cDNA的精制第20-21页
     ·cDNA双酶切第21页
     ·接头连接第21页
     ·预扩增第21页
     ·选择性扩增第21-22页
     ·聚丙烯酞胺凝胶电泳及银染第22-23页
     ·差异条带的回收、克隆、测序第23-25页
     ·差异基因的定量分析第25-26页
     ·温度对银染结果的影响第26页
     ·ApoI/MseI与EcoRI/MseI酶切效果的对比第26-28页
4 结果与分析第28-50页
   ·茶树叶片总RNA的提取与质量检测第28页
   ·用于茶树cDNA-AFLP分析的条件优化第28-35页
     ·两个限制性内切酶组合的理论优选第28-30页
     ·ApoI/MseI双酶切的效果检测第30-31页
     ·ApoI/MseI与EcoRI/MseI预扩增效果比较第31-32页
     ·ApoI/MseI与EcoRI/MseI选择性扩增效果的比较第32页
     ·ApoI/MseI与EcoRI/MseI的差异条带比较第32-35页
   ·喷施吡虫啉前后茶树叶片的基因表达谱差异比较第35-41页
     ·cDNA-AFLP差异图谱分析第35-39页
     ·差异条带的统计分析第39-40页
     ·差异条带的回收、克隆、测序与验证第40-41页
   ·差异条带序列的生物信息学分析第41-48页
     ·差异片段序列的同源性分析第41-47页
     ·差异条带序列的基因功能分类第47-48页
   ·差异表达片段表达的qRT-PCR分析第48-50页
5 讨论第50-57页
   ·酶切组合的选择第50页
   ·温度对银染结果的影响第50-51页
   ·差异基因的定量分析第51-52页
   ·cDNA-AFLP技术第52-53页
     ·cDNA-AFLP技术原理第52页
     ·cDNA-AFLP的技术特点第52-53页
     ·cDNA-AFLP技术在非生物和生物胁迫方面的实例应用第53页
   ·化学杀虫剂诱导的差异基因的功能分析和功能预测第53-57页
     ·上调基因的功能分析和功能预测第54页
     ·下调基因的功能分析和功能预测第54-57页
6 结论第57-58页
参考文献第58-63页
附录A 中英文缩写与注释第63-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页
成果清单第65页

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