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兔病毒性出血症病毒遗传变异及口服疫苗的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-15页
第一章 兔病毒性出血症病毒研究进展第15-29页
   ·兔病毒性出血症病毒的概述第15页
   ·兔病毒性出血症病毒的分类第15-16页
   ·兔病毒性出血症病毒的生物学特征第16-22页
     ·病原特征第16-18页
     ·兔病毒性出血症病毒的基因组第18-19页
     ·兔病毒性出血症病毒的亚基因组第19页
     ·兔病毒性出血症病毒的结构蛋白第19-21页
     ·兔病毒性出血症病毒的非结构蛋白第21-22页
   ·兔病毒性出血症的临床症状与病理变化第22-23页
     ·流行病学第22-23页
     ·临床症状第23页
     ·病理变化第23页
   ·兔病毒性出血症病毒的诊断与检测第23-26页
     ·电镜检查第24-25页
     ·间接血凝试验第25页
     ·酶联免疫吸附试验第25页
     ·核酸检测第25-26页
   ·兔病毒性出血症病毒疫苗研究进展第26-28页
     ·兔病毒性出血症病毒组织灭活苗第26-27页
     ·兔病毒性出血症病毒基因工程苗第27-28页
   ·小结第28-29页
第二章 黏膜免疫的机理及口服活载体疫苗研究进展第29-43页
   ·黏膜免疫疫苗的研究第29-32页
   ·减毒沙门氏菌载体概述第32-38页
     ·减毒沙门菌通过黏膜上皮 M 细胞进入机体的免疫机制第32-34页
     ·减毒沙门氏菌被树突状细胞直接摄取进入机体的免疫机制第34-35页
     ·减毒沙门氏菌载体 DNA 疫苗诱导机体的免疫应答第35-36页
     ·减毒沙门氏菌载体疫苗的应用第36-38页
   ·腺病毒载体概述第38-42页
     ·腺病毒的基因组结构及感染机制第39-40页
     ·腺病毒载体的构建及发展第40-41页
     ·腺病毒载体应用第41-42页
   ·小结第42-43页
第三章 兔病毒性出血症病毒遗传进化及抗原变异分析第43-61页
   ·材料与方法第43-50页
     ·材料第43-44页
     ·方法第44-50页
   ·结果第50-58页
     ·兔病毒性出血症临床情况调查第50-51页
     ·病毒分离鉴定的结果第51页
     ·RHDV VP60 基因的扩增第51页
     ·重组质粒鉴定第51-52页
     ·VP60 编码氨基酸序列的比较第52-54页
     ·系统发育分析第54-56页
     ·攻毒前兔子 HI 滴度的测定第56页
     ·攻毒试验结果第56-58页
     ·肝脏带毒检测第58页
   ·讨论第58-60页
   ·小结第60-61页
第四章 减毒沙门氏菌载体的口服兔病毒性出血症疫苗研究第61-74页
   ·材料与方法第61-66页
     ·材料第61-62页
     ·方法第62-66页
   ·结果第66-72页
     ·重组载体 pcDNA3-VP60 的鉴定第66-67页
     ·SL7207/pcDNA3-VP60 的酶切鉴定第67页
     ·减毒沙门氏菌对兔子腹腔巨噬细胞的转导效果第67-68页
     ·VP60 的体内转录第68-69页
     ·口服 DNA 疫苗的免疫效果第69页
     ·T 淋巴细胞转化第69-70页
     ·细胞因子第70-71页
     ·攻毒保护第71-72页
   ·讨论第72-73页
   ·小结第73-74页
第五章 腺病毒基础的兔病毒性出血症口服疫苗的研究第74-89页
   ·材料与方法第74-81页
     ·材料第74-75页
     ·方法第75-81页
   ·结果第81-87页
     ·VP60 基因的扩增第81-82页
     ·pAdTrack-VP60 的酶切鉴定第82页
     ·rhAd-VP60 的酶切鉴定第82-83页
     ·重组病毒鉴定第83页
     ·Western blot 鉴定 VP60 的表达第83-84页
     ·体液免疫第84-85页
     ·RHDV 特异性 T 细胞增殖检验第85页
     ·细胞因子检测第85-86页
     ·攻毒保护第86-87页
   ·讨论第87-88页
   ·小结第88-89页
第六章 兔病毒性出血症 ELISA 检测方法的建立第89-109页
   ·材料第89-91页
     ·菌株和质粒第89页
     ·主要工具酶与试剂第89页
     ·酶标抗体及血清第89-90页
     ·常用缓冲液的配制第90页
     ·主要仪器设备和工具第90-91页
   ·方法第91-97页
     ·原核表达载体 pET32a-RHDV E 的构建第91-93页
     ·重组质粒 pET32a-RHDV E 的诱导表达第93-94页
     ·表达产物的检测第94-95页
     ·重组蛋白的制备纯化第95页
     ·间接 ELISA 检测方法的建立第95-97页
     ·临界值的确定第97页
     ·间接 ELISA 检测方法性能评价第97页
     ·临床样品的检测第97页
   ·结果第97-107页
     ·原核表达载体 pET32a-RHDV E 的构建第97-99页
     ·重组质粒 pET32a-RHDV E 的诱导表达第99-101页
     ·Western blot 检测结果第101页
     ·重组蛋白的纯化结果第101-102页
     ·间接 ELISA 方法的建立第102-105页
     ·间接 ELISA 方法阴阳性临界值的确定第105页
     ·间接 ELISA 检测方法性能评价的结果第105-107页
     ·临床样品检测第107页
   ·讨论第107-108页
   ·小结第108-109页
结论第109-110页
参考文献第110-125页
缩略词表第125-126页
致谢第126-127页
作者简介第127页

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