摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-32页 |
·昆虫触角感受器研究进展 | 第15-18页 |
·触角感受器形态结构与感受机制 | 第15页 |
·昆虫触角感器的类型及功能 | 第15-18页 |
·昆虫气味结合蛋白的研究进展 | 第18-22页 |
·气味结合蛋白的生化特性及分类 | 第18页 |
·气味结合蛋白的表达 | 第18-20页 |
·气味结合蛋白的作用机制和生理功能 | 第20-22页 |
·昆虫化学感受蛋白的研究进展 | 第22-25页 |
·化学感受蛋白的生化特征及分类 | 第22页 |
·化学感受蛋白的表达 | 第22-23页 |
·化学感受蛋白的功能 | 第23-25页 |
·嗅觉受体的研究进展 | 第25-27页 |
·昆虫嗅觉受体 | 第26-27页 |
·昆虫特殊的受体蛋白 Or83b 及类似受体蛋白 | 第27页 |
·电化学信号传导 | 第27-30页 |
·选题依据、目的及意义 | 第30-32页 |
第二章 梨小食心虫成虫行为节律研究 | 第32-38页 |
·试验材料 | 第32页 |
·供试昆虫 | 第32页 |
·试验方法 | 第32-33页 |
·成虫羽化行为观察 | 第32页 |
·成虫交配行为观察 | 第32页 |
·雌成虫产卵行为观察 | 第32-33页 |
·数据处理 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-36页 |
·成虫羽化行为及其节律 | 第33页 |
·成虫交配行为及其节律 | 第33-35页 |
·雌成虫产卵行为及节律 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第三章 梨小食心虫触角感器的研究 | 第38-46页 |
·试验材料 | 第38页 |
·供试昆虫 | 第38页 |
·试验方法 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-44页 |
·梨小食心虫触角的一般形态及感器种类 | 第38-39页 |
·梨小食心虫触角感器的超微结构 | 第39-44页 |
·毛形感器(Sensilla trichodea, Str) | 第39-40页 |
·锥形感器(Sensilla basiconica, Sba) | 第40页 |
·刺形感器(Sensilla chaetica, Sch) | 第40-41页 |
·栓锥形感器(Sensilla styloconica, Sst) | 第41-42页 |
·腔锥形感器(Sensilla coeloconica, Sco) | 第42页 |
·耳形感器(Sensilla auricillica, Sau) | 第42-43页 |
·B hm 氏鬃毛(B hm bristles, Bbr) | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
第四章 梨小食心虫普通气味结合蛋白基因的克隆、序列分析及表达研究 | 第46-73页 |
·试验材料 | 第47-48页 |
·昆虫饲养与试验样本收集 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47-48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·试验方法 | 第48-56页 |
·总 RNA 提取 | 第48-49页 |
·总 RNA 质量检测 | 第49页 |
·第一链 cDNA 的合成 | 第49页 |
·引物设计 | 第49-50页 |
·兼并 PCR 扩增梨小食心虫普通气味结合蛋白基因 cDNA 片段 | 第50-51页 |
·RACE 扩增梨小食心虫普通气味结合蛋白基因 cDNA3′和 5′端序列 | 第51页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因全长验证的 PCR 扩增 | 第51-52页 |
·PCR 产物纯化、克隆与测序 | 第52-54页 |
·PCR 产物纯化 | 第52-53页 |
·连接反应 | 第53页 |
·转化反应 | 第53页 |
·质粒 DNA 提取 | 第53-54页 |
·序列测定 | 第54页 |
·序列分析 | 第54页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因的组织分布 | 第54-55页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因在光周期中表达特征分析 | 第55-56页 |
·实时定量 PCR 反应 | 第55页 |
·内参基因和目的基因 PCR 扩增效率的确定 | 第55-56页 |
·数据处理 | 第56页 |
·结果与分析 | 第56-71页 |
·梨小食心虫成虫触角总 RNA 的提取 | 第56页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因 cDNA 片段的克隆 | 第56-59页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因全长 cDNA 序列的克隆与分析 | 第59-66页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因的组织分布 | 第66-67页 |
·实时定量 PCR 产物的熔解曲线分析 | 第67-69页 |
·内参基因和目的基因 PCR 扩增效率分析 | 第69-70页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因在光周期中表达特征分析 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
第五章 梨小食心虫化学感受蛋白基因的克隆与序列分析 | 第73-86页 |
·试验材料 | 第74页 |
·供试昆虫 | 第74页 |
·主要试剂 | 第74页 |
·主要仪器 | 第74页 |
·试验方法 | 第74-77页 |
·总 RNA 的提取及第一链 cDNA 的合成 | 第74页 |
·引物设计 | 第74-75页 |
·兼并 PCR 扩增梨小食心虫化学感受蛋白基因 cDNA 片段 | 第75-76页 |
·RACE 扩增梨小食心虫化学感受蛋白基因 cDNA3′和 5′端序列 | 第76页 |
·梨小食心虫化学感受蛋白基因全长验证的 PCR 扩增 | 第76-77页 |
·PCR 产物纯化、克隆与测序 | 第77页 |
·序列分析 | 第77页 |
·梨小食心虫化学感受蛋白基因的表达谱分析 | 第77页 |
·结果与分析 | 第77-84页 |
·梨小食心虫化学感受蛋白基因 cDNA 片段的克隆 | 第77-79页 |
·梨小食心虫化学感受蛋白基因全长 cDNA 序列的克隆与分析 | 第79-84页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白基因的组织分布 | 第84页 |
·讨论 | 第84-86页 |
第六章 梨小食心虫普通气味结合蛋白 2 和化学感受蛋白基因的原核表达 | 第86-101页 |
·试验材料 | 第86-87页 |
·供试昆虫 | 第86页 |
·主要试剂 | 第86-87页 |
·主要仪器 | 第87页 |
·试验方法 | 第87-91页 |
·引物设计与 PCR 扩增 | 第87-88页 |
·融合表达载体的构建 | 第88-89页 |
·重组克隆载体 pGEM-T/GmolGOBP2 和表达载体 pET-32a 的双酶切 | 第88页 |
·重组克隆载体 pGEM-T/GmolCSP 和表达载体 pET-32a 的双酶切 | 第88页 |
·目的片段与表达载体 pET-32a 片段的连接 | 第88-89页 |
·连接产物的转化和验证 | 第89页 |
·重组质粒 pET/GmolGOBP2 和 pET/GmolCSP 的诱导表达 | 第89页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第89-91页 |
·Western 印迹检测 | 第91页 |
·融合蛋白质的可溶性测定 | 第91页 |
·结果与分析 | 第91-100页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白 2 和化学感受蛋白基因的克隆 | 第91-93页 |
·融合表达载体的构建 | 第93-97页 |
·梨小食心虫普通气味结合蛋白 2 和化学感受蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第97-100页 |
·讨论 | 第100-101页 |
全文总结 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
个人简介 | 第117页 |