摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1.文献综述 | 第11-26页 |
·农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化 | 第11-16页 |
·影响油菜农杆菌遗传转化的因素 | 第11-16页 |
·外植体对油菜再生的影响 | 第11-12页 |
·基因型对油菜再生的影响 | 第12-13页 |
·培养基成分对油菜再生的影响 | 第13-14页 |
·抗生素对油菜再生的影响 | 第14-15页 |
·筛选标记对油菜再生的影响 | 第15页 |
·适宜菌株和载体对油菜再生的影响 | 第15页 |
·预培养和共培养对油菜再生的影响 | 第15-16页 |
·外植体褐化对油菜再生的影响 | 第16页 |
·遗传转化技术在油菜育种上的应用 | 第16-17页 |
·抗除草剂 | 第16-17页 |
·抗虫 | 第17页 |
·抗病 | 第17页 |
·改良品质 | 第17页 |
·植物分枝发育与作物育种 | 第17-20页 |
·控制植物分枝发育的相关基因 | 第18-19页 |
·植物分枝发育在育种上的作用 | 第19-20页 |
·高油酸育种 | 第20-24页 |
·油菜主要脂肪酸及其合成途径 | 第20-22页 |
·油酸的用途和高油酸育种 | 第22-23页 |
·fad2基因及其在提高油酸含量研究中的应用 | 第23-24页 |
·本研究的目的及内容 | 第24-26页 |
2 材料和方法 | 第26-35页 |
·材料 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26页 |
·转化载体 | 第26页 |
·实验所用试剂 | 第26-27页 |
·引物 | 第27页 |
·方法 | 第27-35页 |
·分子生物学基本操作方法 | 第27-29页 |
·Edwards法提取植物基因组DNA | 第27页 |
·CTAB小样法提取油菜基因组DNA | 第27-28页 |
·CTAB大样法提取油菜基因组DNA | 第28页 |
·TRIpure法提取油菜RNA | 第28-29页 |
·RT-PCR反应 | 第29页 |
·油菜的遗传转化 | 第29-31页 |
·播种和无菌苗的获得 | 第30页 |
·农杆菌的活化 | 第30页 |
·外植体的制备及侵染 | 第30-31页 |
·共培养处理 | 第31页 |
·诱导愈伤培养基上外植体的培养 | 第31页 |
·分化培养基上外植体的分化 | 第31页 |
·生根培养基上绿芽的生根培养 | 第31页 |
·转基因植株的分子检测 | 第31-33页 |
·转化再生油菜的PCR鉴定 | 第31-32页 |
·转基因植株的基因表达分析 | 第32页 |
·转基因油菜的Southern-Blot分子杂交 | 第32-33页 |
·油菜种子中脂肪酸含量的分析 | 第33-35页 |
3. 结果与分析 | 第35-48页 |
·不同基因型转化效率的比较 | 第35-37页 |
·FAD2R载体的油菜遗传转化 | 第37-41页 |
·FAD2R阳性植株的筛选 | 第37页 |
·FAD2R转化油菜的Southern-Blot检测 | 第37-38页 |
·FAD2R阳性植株的表达分析 | 第38-39页 |
·FAD2R转化油菜种子脂肪酸含量的分析 | 第39-41页 |
·MG12G-4载体的油菜遗传转化 | 第41-43页 |
·MG12G-4阳性植株的筛选 | 第41-42页 |
·MG12G-4载体阳性植株的表达分析 | 第42-43页 |
·VP-5B载体的油菜遗传转化 | 第43-48页 |
·VP-5B阳性植株的筛选 | 第43-44页 |
·比较载体MG12G-4和VP-5B的转化效率差异 | 第44页 |
·VP-5B建构阳性植株的表达分析 | 第44-45页 |
·表型观察分析 | 第45-47页 |
·T_1代转基因油菜株系的纯合和分离情况 | 第47-48页 |
4.讨论 | 第48-49页 |
·基因型对甘蓝型油菜转化效率的影响 | 第48页 |
·抗生素对油菜转化效率的影响 | 第48页 |
·分枝基因对油菜形态的影响 | 第48-49页 |
5 进一步工作的设想 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56页 |