| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| ·番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus)的研究进展 | 第12-13页 |
| ·症状 | 第12页 |
| ·株系及寄主范围 | 第12-13页 |
| ·番木瓜环斑病毒基因组特征 | 第13页 |
| ·CP基因研究进展 | 第13-15页 |
| ·外壳蛋白结构 | 第13-14页 |
| ·CP基因介导的抗性研究 | 第14-15页 |
| ·外壳蛋白基因作用机理 | 第14页 |
| ·国内外研究现状 | 第14-15页 |
| ·植物转CP基因的优势与可能存在的问题 | 第15页 |
| ·番木瓜抗病转基因工程研究进展 | 第15-16页 |
| ·RNAi的研究概况 | 第16-20页 |
| ·RNAi的机制 | 第17-18页 |
| ·RNAi技术的特点 | 第18-19页 |
| ·RNAi技术在植物基因工程中的应用 | 第19-20页 |
| ·研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·试验材料 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株、质粒与毒源 | 第21页 |
| ·酶、试剂盒与仪器 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·PCR使用的引物 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·质粒转化农杆菌 | 第23-24页 |
| ·烟草无菌苗的组织培养 | 第24页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第24-25页 |
| ·番木瓜遗传转化 | 第25-26页 |
| ·合子胚准备 | 第25页 |
| ·番木瓜胚性愈伤诱导 | 第25-26页 |
| ·农杆菌转化番木瓜胚性愈伤过程 | 第26页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·转基因植物总DNA的提取 | 第27页 |
| ·PCR检测转基因植株 | 第27-28页 |
| ·Southern blot印迹分析 | 第28-29页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第28页 |
| ·基因组DNA的限制性酶切 | 第28页 |
| ·电泳及转膜 | 第28页 |
| ·探针的制备 | 第28-29页 |
| ·杂交 | 第29页 |
| ·显色 | 第29页 |
| ·Northern blot分析 | 第29-31页 |
| ·器皿和容器的处理 | 第29-30页 |
| ·烟草总RNA的提取 | 第30页 |
| ·甲醛变性电泳 | 第30页 |
| ·RNA转膜 | 第30-31页 |
| ·杂交 | 第31页 |
| ·转基因植株的抗病性鉴定 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-39页 |
| ·烟草遗传转化 | 第32-37页 |
| ·转基因烟草PCR的检测 | 第32-35页 |
| ·表达载体pGA-GFP转化烟草PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·表达载体pHellsgate_(12)-CP_(IR)转化烟草PCR鉴定 | 第33-35页 |
| ·表达载体pHellsgate_(12)-CP_(IR)转基因烟草Southern blot分析 | 第35页 |
| ·表达载体pHellsgate_(12)-CP_(IR)转基因烟草Northern blot分析 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的抗病性检测 | 第36-37页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第37页 |
| ·番木瓜遗传转化 | 第37-39页 |
| ·番木瓜合子遗传转化 | 第37页 |
| ·番木瓜胚性愈伤遗传转化 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| ·农杆菌遗传转化 | 第39-41页 |
| ·外植体的选择 | 第39-40页 |
| ·农杆菌侵染液浓度 | 第40页 |
| ·转化方法 | 第40-41页 |
| ·转基因植株检测和抗病性分析 | 第41-43页 |
| ·PCR检测 | 第41-42页 |
| ·Southern分析 | 第42页 |
| ·Northern分析 | 第42页 |
| ·抗病性检测 | 第42-43页 |
| ·下一步工作及展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录一 图版与说明 | 第51-55页 |
| 附录二 溶液配制 | 第55-56页 |
