| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-22页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·DHCR24 的结构及组织分布 | 第13-14页 |
| ·DHCR24 的相关生物学功能 | 第14-20页 |
| ·DHCR24 与胆固醇合成 | 第14-16页 |
| ·DHCR24 是IGF1 保护存活效应的一个调节子 | 第16-17页 |
| ·DHCR24 是雌激素介导的神经保护作用的效应物 | 第17-18页 |
| ·DHCR24 与氧化应激和内质网应激 | 第18-20页 |
| ·DHCR24 在细胞中的定位及氧化还原功能域 | 第20-21页 |
| ·本文目的与意义 | 第21-22页 |
| 第1章 DHCR24 融合蛋白真核表达载体的构建与表达 | 第22-38页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·菌种和载体 | 第23页 |
| ·工具酶与生化试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| ·溶液与培养基的配制 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·实验设计与流程 | 第26页 |
| ·模板及引物设计 | 第26-27页 |
| ·PCR 扩增DHCR24 序列 | 第27页 |
| ·重组质粒真核表达载体的构建 | 第27-31页 |
| ·重组质粒转染N2A 细胞 | 第31页 |
| ·荧光显微镜下观察及免疫化学荧光 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-37页 |
| ·DHCR24 基因序列的获得 | 第32-33页 |
| ·重组质粒 pGEM-T-easy/DHCR24 for EGFP、pGEM-T-easy/DHCR24 for Dsred、pGEM-T-easy/DHCR24 TM(-)for Dsred 的鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第34-35页 |
| ·DHCR24 融合蛋白表达的鉴定及亚细胞定位 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第2章 DHCR24 拓扑空间结构研究 | 第38-50页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试剂的配制 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·细胞培养 | 第39页 |
| ·脂质体转染(见第1章) | 第39页 |
| ·荧光蛋白酶保护法（FPP） | 第39-40页 |
| ·DCFHDA 检测ROS | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-47页 |
| ·Digitonin 工作浓度的确定 | 第41-42页 |
| ·DHCR24 C 末端的定位结果 | 第42-43页 |
| ·DHCR24 N 末端定位结果 | 第43-44页 |
| ·DHCR24 FAD 结合域的定位结果 | 第44-45页 |
| ·FAD 结合域的定位对其ROS 清除功能的影响 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 第3章 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第56-58页 |
