| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 喉癌研究背景 | 第11-17页 |
| ·喉癌及其治疗的常用手段 | 第11页 |
| ·抑癌基因抑制癌细胞生长及其分子机制 | 第11-13页 |
| ·细胞周期失调与肿瘤细胞的发生关系 | 第11-12页 |
| ·细胞凋亡基因与肿瘤细胞的关系 | 第12-13页 |
| ·基因治疗在抗肿瘤中的应用及前景 | 第13-14页 |
| ·抑制Hep-2细胞生长的多种手段及其意义 | 第14-17页 |
| 2 IFI16基因及其家族 | 第17-24页 |
| ·HIN-200蛋白家族 | 第17-19页 |
| ·HIN-200蛋白家族成员在自身免疫疾病中的作用 | 第19-21页 |
| ·IFI16基因作为一种新发现的抑癌基因在研究中的应用 | 第21-22页 |
| ·HIN-200蛋白家族其他成员在抗肿瘤方面的研究应用 | 第22-24页 |
| 第二章 IFI16基因在人喉鳞癌细胞中的作用研究实验方法 | 第24-40页 |
| 1 喉鳞癌Hep-2细胞的培养 | 第24-25页 |
| 2 pVR1012-IFI16重组载体的构建及其鉴定 | 第25-31页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·热休克转化 | 第25-26页 |
| ·碱裂解法抽提质粒DNA | 第26页 |
| ·酶切反应(20μl体系) | 第26页 |
| ·割胶回收 | 第26-27页 |
| ·碱性磷酸酶处理(20μl体系) | 第27页 |
| ·Hep-2细胞总RNA的提取 | 第27页 |
| ·RNA分析与定量 | 第27页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增IFI16基因全CDS序列 | 第28页 |
| ·T克隆 | 第28-30页 |
| ·试剂 | 第30-31页 |
| ·所需仪器设备 | 第31页 |
| 3 重组载体转染Hep-2细胞 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·所需仪器设备 | 第32页 |
| 4 转染后细胞定生长增殖方面影响测 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·细胞生长曲线绘制法 | 第33页 |
| ·MTT法 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·所需仪器设备 | 第33页 |
| 5 转染后细胞IFI16基因检测表达情况 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·所需仪器设备 | 第34页 |
| 6 转染后细胞凋亡及细胞周期实相检测 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·细胞凋亡检测实验方法 | 第34-35页 |
| ·细胞周期时相检测实验方法 | 第35-36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·所需仪器设备 | 第36页 |
| 7 针对IFI16构建慢病毒干扰shRNA载体 | 第36-38页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·所需仪器设备 | 第38页 |
| 8 IFI16干扰载体转染Hep-2细胞稳定表达IFI16干扰基因的细胞系的建立 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·所需仪器设备 | 第39-40页 |
| 第三章 结果分析 | 第40-52页 |
| 1 Hep-2细胞的培养 | 第40页 |
| 2 pVR1012-IFI16重组载体的构建及其鉴定 | 第40-44页 |
| ·pVR1012片段质粒DNA电泳结果 | 第40-41页 |
| ·IFI16 CDS制备电泳结果 | 第41-42页 |
| ·IFI16连接pUCm-T载体后转化的蓝白斑筛选 | 第42-43页 |
| ·连接pUCm-T-IFI16成功后BamHI酶切电泳检测 | 第43页 |
| ·pVR1012片段与IFI16片段连接成功后重组载体的鉴定 | 第43-44页 |
| ·pVR1012-IFI16无内毒素大量抽提电泳检测 | 第44页 |
| 3 pVR1012-IFI16转染Hep-2细胞后细胞生长曲线测定及MTT实验结果 | 第44-46页 |
| 4 pVR1012-IFI16重组质粒在Hep-2细胞中的表达 | 第46-47页 |
| 5 转染后细胞凋亡及细胞周期实相检测 | 第47-48页 |
| 6 针对IFI16构建慢病毒干扰shRNA载体 | 第48-51页 |
| 7 IFI16干扰载体转染Hep-2细胞稳定表达IFI16干扰基因的细胞系的建立 | 第51-52页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 作者简历 | 第57-58页 |
