缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分 H2009 肺腺癌单克隆抗体的高通量制备 | 第13-41页 |
材料和方法 | 第13-25页 |
材料 | 第13-17页 |
1 实验材料 | 第13页 |
2 主要试剂 | 第13-14页 |
3 主要溶剂的配制 | 第14-15页 |
4 主要实验仪器和用具 | 第15-17页 |
实验方法 | 第17-25页 |
1 动物免疫、细胞融合及杂交瘤筛选 | 第17-19页 |
·Balb/c 小鼠免疫 | 第17页 |
·融合步骤 | 第17-19页 |
·克隆筛选和杂交瘤细胞系建立 | 第19页 |
2 克隆筛选方法 | 第19-20页 |
·细胞 ELISA | 第19-20页 |
·流式细胞仪检测 | 第20页 |
3 浓缩纯化抗体 IgM | 第20-23页 |
·无血清培养上清纯化 IgM 抗体 | 第20-21页 |
·腹水中 IgM 的纯化 | 第21-23页 |
4 IgM 抗体的 SDS-PAGE 电泳 | 第23页 |
5 考马氏亮蓝染色 | 第23-24页 |
6 Western 印迹检测表达蛋白质 | 第24-25页 |
实验结果 | 第25-41页 |
1 免疫效价 | 第25页 |
2 克隆筛选和杂交瘤细胞系建立 | 第25-35页 |
3 SDS-PAGE 电泳、考马氏亮蓝染色和 westernblotting 确定纯化抗体 | 第35-41页 |
第二部分 H2009 肺腺癌单克隆抗体的鉴定分析 | 第41-70页 |
材料和方法 | 第41-49页 |
材料 | 第41-45页 |
1 实验材料 | 第41页 |
2 主要试剂 | 第41-42页 |
3 主要溶剂配制 | 第42-43页 |
4 主要实验仪器和用具 | 第43-45页 |
实验方法 | 第45-49页 |
1 抗体亚类鉴定采用 Southern Biotech 类和亚类检测试剂盒 | 第45页 |
2 鉴定抗体与其他肺癌细胞系的结合状况 | 第45-46页 |
3 H2009, A2 ,A549 膜蛋白提取 | 第46页 |
4 膜蛋白的 SDS - PAGE 电泳 | 第46-47页 |
5 考马氏亮蓝染色 | 第47页 |
6 Western 印迹检测表达蛋白质 | 第47-49页 |
实验结果 | 第49-70页 |
1 抗体的鉴定 | 第49-52页 |
2 抗体与各种肺癌细胞系结合情况 | 第52-65页 |
3 免疫印迹鉴定抗体的特异性 | 第65-70页 |
讨论 | 第70-74页 |
结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-76页 |
综述一 肺癌治疗性疫苗研究近况 | 第76-85页 |
参考文献 | 第82-85页 |
综述二 肺癌的肿瘤标志物研究进展 | 第85-93页 |
参考文献 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
个人简历 | 第94页 |