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柠檬酸转运子和果胶甲酯酶在植物耐铝中的作用

致谢第1-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-14页
縮略语表第14-15页
目录第15-18页
图表目录第18-19页
第一章 有机酸的分泌是植物重要的耐铝毒的机理第19-39页
   ·引言第19页
   ·植物的铝毒害第19-20页
     ·植物铝毒害的症状第19-20页
     ·植物铝毒害的作用位点第20页
   ·植物的耐铝机理第20-21页
   ·有机酸的分泌是植物重要的耐铝机理第21-30页
     ·铝诱导不同植物有机酸的分泌第21-24页
     ·有机酸分泌的两种模式第24页
     ·苹果酸的分泌第24-26页
     ·柠檬酸的分泌第26-29页
       ·柠檬酸的体内代谢第26-27页
       ·柠檬酸转运子及其调控第27-28页
       ·控制柠檬酸分泌的其它调控因子第28-29页
     ·草酸的分泌第29-30页
   ·参考文献第30-39页
第二章 细胞壁在植物耐铝中的作用第39-52页
   ·植物细胞壁组分及铝对细胞壁的影响第39-41页
     ·植物细胞壁组分第39-40页
     ·铝对细胞壁的影响第40-41页
   ·果胶的甲酯化程度与铝耐性的关系第41-44页
     ·果胶的甲酯化程度由果胶甲酯酶控制第41-44页
     ·果胶的甲酯化程度与铝耐性第44页
   ·半纤维素与铝耐性的关系第44-45页
   ·问题的提出、技术路线及拟解决的关键问题第45-47页
     ·问题的提出第45页
     ·技术路线第45-47页
     ·拟解决的关键问题第47页
   ·参考文献第47-52页
第三章 饭豆柠檬酸转运子的基因克隆和生物信息学分析第52-59页
   ·材料与方法第52-54页
     ·植物材料和培养第52页
     ·饭豆总RNA的提取第52页
     ·同源克隆扩增基因片段第52-53页
     ·RACE技术扩增基因全长第53-54页
     ·VuMATE生物信息学分析第54页
   ·结果第54-56页
     ·饭豆柠檬酸转运子的基因克隆第54-56页
     ·饭豆VuMATE的生物信息学分析第56页
       ·多序列比对第56页
       ·系统发生树分析第56页
   ·讨论第56-58页
   ·参考文献第58-59页
第四章 饭豆柠檬酸转运子VuMATE基因的表达分析和蛋白亚细胞定位第59-67页
   ·材料与方法第59-62页
     ·各种金属离子的处理第59页
     ·RNA的提取和第一链cDNA的制备第59-60页
     ·半定量RT-PCR分析VuMATE基因表达第60页
     ·VuMATE::GFP融合载体的构建第60页
     ·洋葱的预培养第60-61页
     ·基因枪操作步骤第61页
     ·GFP荧光观察第61-62页
   ·结果第62-63页
     ·VuMATE组织特异性表达及对不同金属离子的响应模式第62-63页
     ·VuMATE蛋白的亚细胞定位第63页
   ·讨论第63-65页
     ·VuMATE完全被铝诱导表达第63-64页
     ·VuMATE的表达仅限于柠檬酸的分泌位点第64-65页
     ·VuMATE柠檬酸转运能力的发挥需要转录水平和蛋白水平的双重调节第65页
   ·参考文献第65-67页
第五章 饭豆VuMATE的功能研究第67-79页
   ·材料与方法第67-70页
     ·饭豆培养和铝处理第67页
     ·饭豆根系分泌物的收集和柠檬酸的测定第67页
     ·VuMATE异源表达于爪蟾卵母细胞中的电生理研究第67-68页
     ·载体构建及电转化至农杆菌第68-69页
     ·农杆菌介导的番茄转化第69页
     ·转基因植株的获得和分子鉴定第69页
     ·相对根伸长第69-70页
     ·番茄根系分泌物的收集和有机酸的测定第70页
   ·结果第70-74页
     ·铝胁迫下饭豆根系柠檬酸的分泌模式第70-71页
     ·VuMATE介导的内向电流产生依赖于pH值第71-73页
     ·VuMATE能够转运~(14)C-柠檬酸第73页
     ·VuMATE转基因番茄的获得及与铝耐性相关生理指标的测定第73-74页
   ·讨论第74-78页
     ·VuMATE的柠檬酸转运能力依赖于H~+第74-75页
     ·外源Al~(3+)间接调控VuMATE介导的柠檬酸转运第75-76页
     ·通过转基因手段提高作物耐铝性的策略第76页
     ·铝胁迫相关柠檬酸转运子的异同第76-78页
   ·参考文献第78-79页
第六章 水稻果胶甲酯酶基因家族与铝胁迫引起的根伸长抑制的相关性研究第79-99页
   ·材料与方法第80-83页
     ·数据库搜索和序列分析第80页
     ·植物材料和生长条件第80页
     ·不同处理第80-81页
     ·细胞壁的分离、PME的提取和PME活性分析第81页
     ·SDS-PAGE和IEF电泳后的PME活性染色第81-82页
     ·引物设计和基因表达分析第82-83页
   ·结果第83-94页
     ·细胞壁PME活性与铝诱导的根伸长抑制相关第83页
     ·水稻PME基因家族的生物信息学分析第83-88页
     ·铝敏感水稻品种浙辐802中OsPMEs的表达模式第88-89页
     ·8个上调的OsPME基因在铝耐性水稻品种日本晴中的表达第89-93页
     ·OsPMEs基因对其它金属胁迫的响应第93-94页
   ·讨论第94-96页
     ·水稻细胞壁PME活性增加与铝诱导的根伸长抑制相关第94页
     ·PME活性增加与铝诱导根伸长抑制相关的可能作用机理第94-95页
     ·受铝胁迫表现为相同表达模式的OsPMEs基因之间会有什么样的相似性?第95-96页
   ·参考文献第96-99页
第七章 结论与展望第99-100页
个人简历及博士期间发表的论文情况第100页

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