| 英文缩略词表 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 1 材料与方法 | 第9-27页 |
| 1．1 Hela细胞培养 | 第9-11页 |
| 1．2 Hela细胞总RNA的制备（异硫氰酸法） | 第11-12页 |
| 1．3 mRNA的制备（oligo（dT）层析法） | 第12-13页 |
| 1．4 cDNA第一链的合成以及RT-PCR | 第13-14页 |
| 1．5 p16第二外显子cDNA PCR产物的纯化 | 第14-15页 |
| 1．6 pGEMT质粒与p16第二外显子cDNA连接 | 第15-16页 |
| 1．7 感受态细胞的制备和转化 | 第16-18页 |
| 1．8 质粒提取及定量 | 第18-20页 |
| 1．9 阳性克隆鉴定 | 第20-21页 |
| 1．9．1 重组质粒DNA酶切图谱分析 | 第20页 |
| 1．9．2 DNA序列分析 | 第20-21页 |
| 1．10 p16基因第二外显子cDNA的制备及纯化 | 第21-22页 |
| 1．11 p16基因第二外显子cDNA探针的标记 | 第22页 |
| 1．12 p16基因第二外显子Southern Blotting方法的建立 | 第22-24页 |
| 1．13 胸水DNA的制备 | 第24-25页 |
| 1．14 多肿瘤抑制基因（MTS）基因纯合性缺失PCR分析方法的建立 | 第25-27页 |
| 2 结果 | 第27-33页 |
| 2．1 pGEM-p16克隆的构建及其p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立 | 第27-30页 |
| 2．1．1 pGEM-p16重组质粒的限制性内切酶酶切图谱分析 | 第28页 |
| 2．1．2 DNA序列分析 | 第28-29页 |
| 2．1．3 p16基因第二外显子cDNA的制备 | 第29页 |
| 2．1．4 Southern blot结果 | 第29-30页 |
| 2．1．5 p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立 | 第30页 |
| 2．2 临床胸水标本p16、p15基因纯合性缺失的分析 | 第30-33页 |
| 2．2．1 癌性胸水中多肿瘤抑制基因（p16、p15）基因纯合性缺失率 | 第30页 |
| 2．2．2 多肿瘤抑制基因（p16、p15）基因纯合性缺失和其他确诊方法 | 第30-32页 |
| 2．2．3 31例癌性胸水p16基因第二外显子纯合性缺失情况 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-38页 |
| 3．1 pGEM-p16克隆的构建及其p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立 | 第33-34页 |
| 3．1．1 pGEM-p16克隆的构建 | 第33页 |
| 3．1．2 p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立 | 第33-34页 |
| 3．2 p16基因的作用及其在肺癌、癌性胸水中的研究意义 | 第34-38页 |
| 3．2．1 p16基因在细胞周期中作用 | 第34-35页 |
| 3．2．2 p16基因研究在肺癌及癌性胸水中的临床意义 | 第35-38页 |
| 4 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 对本课题的进一步设想 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 个人简历 | 第45-47页 |
| 在学期间的研究成果目录 | 第47-48页 |
| 综述-p16基因与肺癌关系的研究进展 | 第48-63页 |
| 1 p16基因在细胞周期中的作用 | 第48-49页 |
| 2 p16基因异常与肺癌的发生和发展 | 第49-53页 |
| 2．1 p16基因缺失与肺癌 | 第50-51页 |
| 2．2 p16基因点突变与肺癌 | 第51-52页 |
| 2．3 p16基因甲基化与肺癌 | 第52-53页 |
| 3 p16基因与肺癌基因治疗研究 | 第53-55页 |
| 4 p16的临床研究进展 | 第55-57页 |
| 5 结语 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
