摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-53页 |
·细胞内ATP的生成及转运 | 第12-35页 |
·概述 | 第12-15页 |
·ATP在线粒体中合成及F_1F_0-ATP合成酶 | 第15-23页 |
·ATP合成酶的分子组成及结构 | 第15-17页 |
·ATP合成酶的催化机理 | 第17-19页 |
·ATP合成酶的超复合物 | 第19-23页 |
·ATP的转运及腺苷酸转位酶 | 第23-33页 |
·概述 | 第23页 |
·ANT的发现及早期研究 | 第23-24页 |
·ANT的结构研究 | 第24-27页 |
·ANT的底物结合及催化特征 | 第27-29页 |
·ANT是否以二体形式发挥功能 | 第29-30页 |
·ANT的生理功能研究 | 第30-33页 |
·小结 | 第33-35页 |
·腺苷酸激酶 | 第35-53页 |
·概述 | 第35-36页 |
·腺苷酸激酶(AK)三维结构的研究 | 第36-38页 |
·腺苷酸激酶(AK)结构域运动的研究 | 第38-40页 |
·腺苷酸激酶(AK)催化机理研究 | 第40-44页 |
·腺苷酸激酶(AK)生理功能研究 | 第44-48页 |
·腺苷酸激酶4(AK4)的研究 | 第48-53页 |
第二章 材料与方法 | 第53-74页 |
·人源AK4及其突变体酶活的研究 | 第53-56页 |
·人源AK4及其突变体基因表达、蛋白纯化 | 第53-55页 |
·AK4及其突变体酶的活性研究 | 第55-56页 |
·AK4在细胞分子水平功能研究 | 第56-64页 |
·AK4蛋白多克隆抗体的制备 | 第56页 |
·Wersten-Blotting | 第56-57页 |
·细胞培养和转染 | 第57-58页 |
·AK4基因的RNA干扰研究 | 第58-61页 |
·单克隆形成研究 | 第61页 |
·AK4基因在真核细胞的表达 | 第61-62页 |
·双氧水和缺氧处理细胞 | 第62页 |
·细胞死亡分析 | 第62-64页 |
·ALS小鼠 | 第64页 |
·AK4相互作用蛋白的鉴定及检验 | 第64-70页 |
·免疫共沉淀 | 第64-65页 |
·质谱分析和蛋白鉴定 | 第65-67页 |
·AK4-FLAG体内免疫荧光实验 | 第67-68页 |
·与AK4相互作用的蛋白的表达 | 第68-69页 |
·体外His-tagged pull down实验 | 第69-70页 |
·AK4(L171P)晶体结构研究 | 第70-74页 |
·AK4(L171P)基因表达、蛋白纯化 | 第70-71页 |
·晶体培养和衍射数据的收集与处理 | 第71-73页 |
·AK4(L171P)晶体结构解析和结构模型精修 | 第73-74页 |
第三章 结果与讨论 | 第74-107页 |
·人源AK4及其突变体酶活的研究 | 第74-81页 |
·AK4及其突变体AK活性的研究结果 | 第74-79页 |
·结果分析与讨论 | 第79-81页 |
·AK4在细胞分子水平功能研究 | 第81-91页 |
·AK4抗体性质研究 | 第81-82页 |
·AK4在细胞压力下的表达 | 第82-85页 |
·AK4 siRNA的研究 | 第85-88页 |
·AK4过表达对细胞的影响 | 第88-90页 |
·实验结果分析与讨论 | 第90-91页 |
·AK4相互作用蛋白的鉴定及检验 | 第91-98页 |
·AK4-FLAG免疫共沉淀及蛋白鉴定 | 第91-94页 |
·ANT与AK4相互作用研究 | 第94-95页 |
·在细胞氧化压力下ANT与AK4相互作用研究 | 第95-96页 |
·AK4-His体外pull-down实验及蛋白鉴定 | 第96-98页 |
·AK4(L171P)晶体结构研究 | 第98-107页 |
·AK4序列比对及分析 | 第98-99页 |
·蛋白纯化和结晶结果 | 第99-100页 |
·晶体数据收集及解析 | 第100-102页 |
·人AK4(L171P)的晶体结构 | 第102-107页 |
第四章 小结与展望 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-122页 |
致谢 | 第122-124页 |
已发表论文 | 第124页 |