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人源腺苷酸激酶4结构和功能的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-53页
   ·细胞内ATP的生成及转运第12-35页
     ·概述第12-15页
     ·ATP在线粒体中合成及F_1F_0-ATP合成酶第15-23页
       ·ATP合成酶的分子组成及结构第15-17页
       ·ATP合成酶的催化机理第17-19页
       ·ATP合成酶的超复合物第19-23页
     ·ATP的转运及腺苷酸转位酶第23-33页
       ·概述第23页
       ·ANT的发现及早期研究第23-24页
       ·ANT的结构研究第24-27页
       ·ANT的底物结合及催化特征第27-29页
       ·ANT是否以二体形式发挥功能第29-30页
       ·ANT的生理功能研究第30-33页
     ·小结第33-35页
   ·腺苷酸激酶第35-53页
     ·概述第35-36页
     ·腺苷酸激酶(AK)三维结构的研究第36-38页
     ·腺苷酸激酶(AK)结构域运动的研究第38-40页
     ·腺苷酸激酶(AK)催化机理研究第40-44页
     ·腺苷酸激酶(AK)生理功能研究第44-48页
     ·腺苷酸激酶4(AK4)的研究第48-53页
第二章 材料与方法第53-74页
   ·人源AK4及其突变体酶活的研究第53-56页
     ·人源AK4及其突变体基因表达、蛋白纯化第53-55页
     ·AK4及其突变体酶的活性研究第55-56页
   ·AK4在细胞分子水平功能研究第56-64页
     ·AK4蛋白多克隆抗体的制备第56页
     ·Wersten-Blotting第56-57页
     ·细胞培养和转染第57-58页
     ·AK4基因的RNA干扰研究第58-61页
     ·单克隆形成研究第61页
     ·AK4基因在真核细胞的表达第61-62页
     ·双氧水和缺氧处理细胞第62页
     ·细胞死亡分析第62-64页
     ·ALS小鼠第64页
     ·AK4相互作用蛋白的鉴定及检验第64-70页
     ·免疫共沉淀第64-65页
     ·质谱分析和蛋白鉴定第65-67页
     ·AK4-FLAG体内免疫荧光实验第67-68页
     ·与AK4相互作用的蛋白的表达第68-69页
     ·体外His-tagged pull down实验第69-70页
     ·AK4(L171P)晶体结构研究第70-74页
     ·AK4(L171P)基因表达、蛋白纯化第70-71页
     ·晶体培养和衍射数据的收集与处理第71-73页
     ·AK4(L171P)晶体结构解析和结构模型精修第73-74页
第三章 结果与讨论第74-107页
   ·人源AK4及其突变体酶活的研究第74-81页
     ·AK4及其突变体AK活性的研究结果第74-79页
     ·结果分析与讨论第79-81页
   ·AK4在细胞分子水平功能研究第81-91页
     ·AK4抗体性质研究第81-82页
     ·AK4在细胞压力下的表达第82-85页
     ·AK4 siRNA的研究第85-88页
     ·AK4过表达对细胞的影响第88-90页
     ·实验结果分析与讨论第90-91页
     ·AK4相互作用蛋白的鉴定及检验第91-98页
     ·AK4-FLAG免疫共沉淀及蛋白鉴定第91-94页
     ·ANT与AK4相互作用研究第94-95页
     ·在细胞氧化压力下ANT与AK4相互作用研究第95-96页
     ·AK4-His体外pull-down实验及蛋白鉴定第96-98页
     ·AK4(L171P)晶体结构研究第98-107页
     ·AK4序列比对及分析第98-99页
     ·蛋白纯化和结晶结果第99-100页
     ·晶体数据收集及解析第100-102页
     ·人AK4(L171P)的晶体结构第102-107页
第四章 小结与展望第107-109页
参考文献第109-122页
致谢第122-124页
已发表论文第124页

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