摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-32页 |
·棉铃虫及昆虫对Bt 抗性现状 | 第14-16页 |
·昆虫对Bt 杀虫剂田间抗性 | 第14页 |
·昆虫对Bt 室内抗性 | 第14-16页 |
·昆虫对Bt 作物田间抗性 | 第16页 |
·Bt 毒蛋白及其作用机制 | 第16-19页 |
·Bt 简介 | 第16-17页 |
·Bt 毒蛋白作用机制 | 第17-19页 |
·昆虫对Bt 毒蛋白的抗性机制 | 第19-22页 |
·中肠蛋白酶的改变 | 第20页 |
·中肠结合位点的改变 | 第20-21页 |
·其他抗性机制 | 第21-22页 |
·昆虫中肠受体的种类 | 第22-24页 |
·氨肽酶N (APN) | 第22-23页 |
·钙粘蛋白(Cadherin-like) | 第23页 |
·碱性磷酸酯酶(ALP) | 第23页 |
·糖酯(Glycolipid) | 第23页 |
·其他 | 第23-24页 |
·目前Bt 作物害虫抗性治理策略 | 第24-26页 |
·蛋白质组学的研究进展及其在昆虫中的应用 | 第26-30页 |
·蛋白质组学技术的发展 | 第26-27页 |
·蛋白质组学在模式昆虫中的应用 | 第27-28页 |
·蛋白质组学在非模式昆虫中的应用 | 第28-29页 |
·展望 | 第29-30页 |
·本文研究目的和意义 | 第30-31页 |
·研究内容及技术路线 | 第31-32页 |
第二章 ISO-DALT 和IPG-DALT 两种双向电泳系统比较及BBMV 提取方法比较 | 第32-49页 |
·材料与方法 | 第32-42页 |
·供试昆虫 | 第32页 |
·供试药剂及器材 | 第32-33页 |
·部分试剂及缓冲液的配制 | 第33-36页 |
·BBMV 的提取 | 第36-38页 |
·Cry1Ac 毒素及抗体 | 第38页 |
·蛋白含量测定 | 第38-39页 |
·双向电泳 | 第39-41页 |
·银染 | 第41页 |
·Western 杂交 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-47页 |
·Cry1Ac 原毒素及活化 | 第42页 |
·各种BBMV 提取方法对蛋白浓度的影响 | 第42页 |
·两种双向电泳系统对BBMV 蛋白分离的影响 | 第42-44页 |
·ISO-DALT 重复性分析(等电聚焦仪为Mini-PROTEAN Tube Cell) | 第44页 |
·各种BBMV 提取方法对Cry1Ac 结合蛋白分离的影响(SDS-PAGE) | 第44-45页 |
·各种BBMV 提取方法对Cry1Ac 结合蛋白分离的影响(ISO-DALT) | 第45-47页 |
·结论与讨论 | 第47-49页 |
第三章 棉铃虫中肠Cry1Ac 结合蛋白的分离和鉴定 | 第49-60页 |
·材料与方法 | 第49-52页 |
·供试昆虫 | 第49页 |
·供试药剂及器材 | 第49-50页 |
·部分试剂及缓冲液的配制 | 第50页 |
·BBMV 的提取 | 第50页 |
·蛋白含量测定 | 第50-51页 |
·双向电泳 | 第51页 |
·凝胶图像匹配和分析 | 第51页 |
·蛋白胶内酶解和质谱鉴定 | 第51页 |
·质谱数据分析 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·BBMV 蛋白的分离 | 第52-53页 |
·Cry1Ac 结合蛋白的检测 | 第53页 |
·质谱鉴定Cry1Ac 结合蛋白 | 第53-58页 |
·钙粘蛋白的鉴定 | 第58页 |
·结论与讨论 | 第58-60页 |
第四章 抗、感棉铃虫中肠Cry1Ac 结合蛋白比较 | 第60-68页 |
·材料与方法 | 第60-62页 |
·供试昆虫 | 第60页 |
·供试药剂及器材 | 第60-61页 |
·部分试剂及缓冲液的配制 | 第61页 |
·BBMV 的提取 | 第61页 |
·蛋白含量测定 | 第61页 |
·双向电泳 | 第61-62页 |
·凝胶图像获取和分析 | 第62页 |
·结果与分析 | 第62-67页 |
·抗、感棉铃虫BBMV 蛋白的分离比较 | 第62-64页 |
·抗、感棉铃虫中肠Cry1Ac 结合蛋白比较分析 | 第64-67页 |
·结论与讨论 | 第67-68页 |
第五章 抗、感棉铃虫中肠几种Bt 结合蛋白比较 | 第68-73页 |
·材料与方法 | 第68-69页 |
·供试昆虫 | 第68页 |
·供试药剂及器材 | 第68-69页 |
·部分试剂及缓冲液的配制 | 第69页 |
·BBMV 的提取 | 第69页 |
·蛋白含量测定 | 第69页 |
·双向电泳 | 第69页 |
·凝胶图像获取和分析 | 第69页 |
·结果与分析 | 第69-72页 |
·抗、感棉铃虫Cry1Ac、Cry1Ab 和Cry1Ah 结合蛋白的检测 | 第69-70页 |
·抗、感棉铃虫Cry1Ac、Cry1Ab 和Cry1Ah 结合蛋白比较分析 | 第70-72页 |
·结论与讨论 | 第72-73页 |
第六章 全文结论 | 第73-75页 |
·全文主要结论 | 第73-74页 |
·有待于进一步研究的工作 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-90页 |
附录1 蛋白点1-9 MALDI-TOF 质谱图 | 第90-99页 |
附录2 蛋白点2 ESI MS/MS 质谱图 | 第99-107页 |
致谢 | 第107-109页 |
个人简历 | 第109页 |