| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-24页 |
| 一、细菌中的群体感应系统 | 第10-20页 |
| 1 AHLS介导的革兰氏阴性菌群体感应系统 | 第10-14页 |
| ·费氏弧菌(VIBRIO FISCHERI)LUXR/LUXI型群体感应系统 | 第10-12页 |
| ·AHL分子结构及其合成 | 第12-13页 |
| ·LuxI类合成酶 | 第13页 |
| ·LuxM/AinS类合成酶 | 第13页 |
| ·HtdS类合成酶 | 第13页 |
| ·AHLs介导的群体感应的生理学功能 | 第13-14页 |
| 2 寡肽类物质介导的革兰氏阳性茵群体感应系统 | 第14-15页 |
| ·寡肽类信号分子及其受体传导过程 | 第14-15页 |
| ·革兰氏阳性菌群体感应系统的生理学功能 | 第15页 |
| 3 其它信号分子介导的群体感应系统 | 第15-17页 |
| ·AI-2信号分子 | 第15-16页 |
| ·其它信号分子 | 第16-17页 |
| 4 细菌群体效应研究的意义及展望 | 第17-20页 |
| 二 哈密瓜果斑病菌的危害、生物学和控制 | 第20-24页 |
| 1.寄主范围和分布 | 第20页 |
| 2.危害与症状特点 | 第20-22页 |
| 3.防治 | 第22-24页 |
| ·加强进口检疫,杜绝带菌种子进入我国和传播蔓延 | 第22页 |
| ·合理的灌溉方式 | 第22-23页 |
| ·选育和种植抗病品种 | 第23页 |
| ·药剂防治 | 第23-24页 |
| 第一章 哈密瓜细菌性果斑病菌群体感应信号分子及致病性检测 | 第24-32页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌株 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-27页 |
| ·Acidovorax avenae subsp.citrulli菌株的活化及上清的制备 | 第26页 |
| ·A.tumefacien菌株的活化及prime制备 | 第26-27页 |
| ·群体感应信号分子检测 | 第27页 |
| ·群体感应信号分子合成酶基因的鉴定 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-29页 |
| ·生物显影分析 | 第27-28页 |
| ·群体感应信号分子合成酶基因的分析 | 第28页 |
| ·ACIDOVORAX AVENAE SUBSP.CITRULLI的离体接种试验 | 第28-29页 |
| 3 总结与讨论 | 第29-32页 |
| 第二章 群体感应系统在哈密瓜细菌性果斑病菌中的功能初探 | 第32-42页 |
| 1.材料与方法 | 第33-37页 |
| ·试验材料 | 第33-34页 |
| ·菌株和质粒 | 第33-34页 |
| ·培养基与抗生素 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-37页 |
| ·A.avenae菌株xjL12基因组DNA的提取(Ausubel et al.,1995) | 第34-35页 |
| ·DH5α和果斑菌电转化感受态细胞的制备(Samebrook and Russell,2001) | 第35页 |
| ·质粒DNA小量提取(Samebrook and Russell,2001) | 第35-36页 |
| ·aⅱA基因的克隆及序列分析 | 第36页 |
| ·酶切克隆片段与载体质粒的连接 | 第36页 |
| ·重组质粒的电转化 | 第36-37页 |
| ·亚克隆重组子验证 | 第37页 |
| ·生物显色及C_(18)反相薄层层析 | 第37页 |
| ·哈密瓜果斑病试验 | 第37页 |
| 2.结果与分析 | 第37-40页 |
| ·AILA基因的克隆及测序 | 第37页 |
| ·质粒PIQ628构建 | 第37-38页 |
| ·菌株XJL12-AⅡA的构建 | 第38页 |
| ·生物显影及C_(18)反相薄层层析分析 | 第38-39页 |
| ·菌株XJL12-AⅡA抑制哈密瓜果斑病害的活性 | 第39-40页 |
| 3.总结与讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 哈密瓜细菌性果斑病菌群体感应信号分子合成基因ACLUXI的敲除及功能分析 | 第42-60页 |
| 1.材料和方法 | 第42-52页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·菌株和质粒 | 第42-44页 |
| ·培养基与抗生素 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-52页 |
| ·Acidovorax avenae subsp.citrulli菌株xjL12基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·大肠杆菌电击感受态的制备 | 第45页 |
| ·电击穿孔转化 | 第45-46页 |
| ·Acidovorax avenae subsp.citmlli中的acluxI基因的克隆和测序 | 第46-47页 |
| ·acluxI在基因组中的拷贝数的Southern杂交检测 | 第47-48页 |
| ·pUC19-acluxI表达载体的构建及其体外表达 | 第48-49页 |
| ·突变体构建 | 第49-51页 |
| ·突变体过敏性反应及致病性检测 | 第51页 |
| ·突变体功能互补 | 第51-52页 |
| ·突变体在NB中的生长情况测定 | 第52页 |
| 2.结果 | 第52-59页 |
| ·ACLUXI基因的克隆和鉴定 | 第52页 |
| ·AC.AVENAE中的LUXI同源基因的鉴定 | 第52-54页 |
| ·ACLUXI在基因组中的拷贝数 | 第54页 |
| ·PBBR-LUXI表达载体的构建及检测 | 第54页 |
| ·pBBR-luxI表达载体的构建 | 第54页 |
| ·AC.AVENAE的LUXI突变体的构建 | 第54-57页 |
| ·pCAM-MCS-luxIud-Km自杀载体的构建 | 第54-55页 |
| ·Ac.Avenae菌株xjL12的luxI突变体的构建 | 第55-56页 |
| ·Ac.Avenae菌株XjL12的luxI突变体产生AI-1的情况 | 第56-57页 |
| ·突变体过敏反应及致病性检测 | 第57-59页 |
| ·突变体过敏反应测 | 第57-58页 |
| ·突变体致病性检灏及互补试验 | 第58-59页 |
| ·ACLUXI缺失突变株AC△LUXI_1的游动性测试 | 第59页 |
| 3.总结与讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
