摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-31页 |
第一章 棉花启动子概述 | 第11-27页 |
1 启动子的概述 | 第11-19页 |
·启动子的概念和特征 | 第11-12页 |
·启动子的结构模型 | 第12-13页 |
·利用PCR技术克隆启动子 | 第13-15页 |
·启动子的分类 | 第15-19页 |
2 棉花纤维发育相关启动子 | 第19-21页 |
·棉纤维发育相关基因的研究进展 | 第19-21页 |
·棉花纤维相关启动子的研究进展 | 第21页 |
3 棉花抗病相关基因启动子 | 第21-23页 |
·GbGLU(β-1,3-葡聚糖酶)基因的研究进展 | 第22-23页 |
·植物抗病相关启动子的研究进展 | 第23页 |
4 BAC文库在启动子克隆上的应用 | 第23-24页 |
·BAC文库的定义 | 第23-24页 |
·棉花品种BAC文库在相关启动子克隆上的应用 | 第24页 |
5 棉花遗传转化方法 | 第24-27页 |
·基因枪法 | 第24-25页 |
·根癌农杆菌介导法 | 第25页 |
·PEG介导法 | 第25-26页 |
·花粉管通道法 | 第26-27页 |
本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
本研究的技术路线 | 第29-31页 |
第二部分 研究报告 | 第31-67页 |
第二章 实验材料和方法 | 第31-45页 |
1 实验材料 | 第31-32页 |
·BAC文库材料 | 第31-32页 |
·菌株和载体 | 第32页 |
2 实验方法 | 第32-45页 |
·BAC文库中含有目的基因的单克隆的筛选 | 第32-33页 |
·BAC文库中目的单克隆质粒DNA的提取 | 第33-34页 |
·TAIL-PCR反应引物的设计及合成 | 第34-35页 |
·TAIL-PCR反应产物的电泳、回收、克隆及测序 | 第35-36页 |
·序列分析 | 第36页 |
·启动子缺失载体的构建 | 第36-39页 |
·启动子缺失载体的基因枪瞬时表达 | 第39-40页 |
·GaMYB7基因的定量分析 | 第40-41页 |
·农杆菌介导的启动子缺失载体的转化 | 第41-44页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第44-45页 |
第三章 结果和分析 | 第45-67页 |
1.GaMYB7基因启动子的筛选和克隆分析 | 第45-57页 |
·BAC文库的筛选 | 第45页 |
·TAIL-PCR | 第45-47页 |
·GaMYB7基因5'上游片段的序列分析 | 第47-50页 |
·GaMYB7基因的定量分析 | 第50-51页 |
·GaMYB7基因启动子缺失载体的构建 | 第51-55页 |
·缺失载体的基因枪瞬时表达研究 | 第55-56页 |
·棉花胚性愈伤的GUS表达 | 第56-57页 |
2 GbGLU基因启动子的筛选和克隆分析 | 第57-64页 |
·BAC文库的筛选 | 第57页 |
·TAIL-PCR | 第57-58页 |
·GbGLU基因5'上游片段的序列分析 | 第58-60页 |
·GbGLU基因启动子的5'端缺失载体的鉴定 | 第60-63页 |
·启动子的5'端缺失载体转化棉花 | 第63-64页 |
·启动子的5'端缺失载体转化烟草 | 第64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
·BAC文库的应用 | 第64-65页 |
·TAIL-PCR扩增 | 第65页 |
·物表达载体的构建 | 第65页 |
·基因枪瞬时表达 | 第65-66页 |
·农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第66页 |
4 后续工作建议 | 第66-67页 |
全文结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
附录 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |