摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
第一章 引言 | 第8-40页 |
1.RNA沉默的研究历史及功能 | 第8-14页 |
·RNA沉默的发现 | 第8-9页 |
·RNA沉默的功能 | 第9-14页 |
·保护机体对抗外部遗传物质入侵 | 第10-12页 |
·调控机体发育分化 | 第12-13页 |
·调控异染色质化 | 第13页 |
·控制可移动遗传因子 | 第13-14页 |
·协助机体应对外部非生物胁迫 | 第14页 |
2.RNA沉默作用机制 | 第14-26页 |
·转录水平RNA沉默 | 第15-16页 |
·转录后水平RNA沉默 | 第16-20页 |
·外源因子诱发的转录后RNA沉默 | 第16-18页 |
·内源因子诱发的转录后RNA沉默 | 第18-20页 |
·RNA沉默位移机制 | 第20-22页 |
·参与RNA沉默的主要细胞因子 | 第22-26页 |
·RdRP | 第22-24页 |
·Dicer | 第24-25页 |
·AGO | 第25-26页 |
3 病毒编码的RNA沉默抑制因子及其作用机制 | 第26-30页 |
·RSS的发现与现状 | 第26-27页 |
·RSS的作用机制 | 第27-30页 |
·TEV HC-Pro | 第27-29页 |
·CMV 2b | 第29页 |
·PVX的p25 | 第29-30页 |
·p19&p21 | 第30页 |
4.研究基因沉默抑制因子的方法 | 第30-32页 |
·植物体系 | 第30-31页 |
·昆虫及动物细胞体系 | 第31-32页 |
5.基因沉默及抑制因子的作用 | 第32-33页 |
·大量表达异源蛋白 | 第32页 |
·鉴定未基因的功能 | 第32-33页 |
6.研究水稻矮缩病毒基因沉默抑制因子的意义 | 第33-40页 |
·水稻矮缩病毒粒子结构 | 第33-34页 |
·水稻矮缩病毒基因组结构及编码的蛋白功能 | 第34-38页 |
·水稻矮缩病毒的侵染和组装 | 第38页 |
·研究水稻矮缩病毒编码的基因沉默抑制因子的意义 | 第38-40页 |
第二章:材料与方法 | 第40-45页 |
1.植物表达载体的获得 | 第40页 |
2.烟草中的瞬时表达农杆菌的渗透注射技术和绿色荧光蛋白(GFP)的观察和照相 | 第40-41页 |
·农杆菌的培养 | 第40-41页 |
·渗透注射菌悬液的制备 | 第41页 |
·渗透注射法 | 第41页 |
·GFP的观察和照相 | 第41页 |
3.植物蛋白提取 | 第41-42页 |
4.植物蛋白的Western blotting检测 | 第42页 |
5.叶片总RNA提取 | 第42-43页 |
6.mRNA的Northern blotting检测 | 第43-45页 |
第三章:结果与讨论 | 第45-55页 |
1.瞬时共表达GFP与各片段以及GFP绿色荧光观察结果 | 第45-54页 |
·RDVP7不能抑制单链GFP引起的本叶基因沉默 | 第46-48页 |
·RDVP7对由单链GFP引起的本页基因沉默无抑制作用 | 第46-47页 |
·结论 | 第47-48页 |
·RDVP9不能抑制单链GFP引起的本叶基因沉默 | 第48-49页 |
·RDVPns12不抑制由单链GFP引起的本叶基因沉默 | 第49-50页 |
·RDVPns6不能抑制由单链GFP引起的本叶基因沉默 | 第50-51页 |
·RDVP2不能抑制由单链GFP引起的本叶基因沉默 | 第51-52页 |
·RDVP8不能抑制由单链GFP引起的本叶基因沉默 | 第52-53页 |
·RDVPns11对由单链GFP引起的本叶基因沉默有较弱的抑制作用 | 第53-54页 |
·RDVPns11对本叶基因沉默的抑制作用 | 第53页 |
·mRNA的分子杂交结果 | 第53-54页 |
2.结论 | 第54-55页 |
第四章 总结 | 第55-56页 |
英文参考文献 | 第56-68页 |
附录:缩写词(ABBREVIATION) | 第68-70页 |
硕士在读期间发表文章 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |