致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 食用菌病毒 | 第10-18页 |
·食用菌病毒的形态 | 第11页 |
·食用菌病毒的基因组及衣壳蛋白 | 第11-14页 |
·双孢蘑菇病毒(Agaricus bisporus virus) | 第11-12页 |
·双孢蘑菇细菌状病毒(mushroom bacilliform virus,MBV) | 第12-13页 |
·蘑菇病毒Ⅹ(mushroom virus Ⅹ,MVⅩ) | 第13页 |
·糙皮侧耳病毒Ⅰ(pleurotus ostreatus virus Ⅰ,PoV Ⅰ) | 第13页 |
·平菇球形病毒(oyster mushroom spherical virus) | 第13页 |
·金针菇病毒(Flammulina veplutipes virus) | 第13-14页 |
·食用菌病毒的症状与危害 | 第14页 |
·食用菌病毒的检测方法 | 第14-15页 |
·电镜法 | 第15页 |
·血清学方法 | 第15页 |
·电泳法 | 第15页 |
·酶联免疫吸附分析法 | 第15页 |
·单克隆抗体检测 | 第15页 |
·dsRNA技术 | 第15页 |
·酶学方法 | 第15页 |
·食用菌病毒的起源与复制 | 第15-16页 |
·食用菌病毒的起源 | 第15-16页 |
·食用菌病毒的复制 | 第16页 |
·食用菌病毒的传播 | 第16-17页 |
·食用菌脱毒 | 第17-18页 |
2 平菇dsRNA病毒研究进展 | 第18-21页 |
·平菇dsRNA病毒 | 第18-19页 |
·dsRNA的空间结构 | 第19-20页 |
·平菇dsRNA病毒研究方法 | 第20-21页 |
·dsRNA技术 | 第20-21页 |
·酶学方法 | 第21页 |
·RT-PCR | 第21页 |
3 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 dsRNA技术在平菇病毒病检测中的应用研究 | 第22-29页 |
1 引言 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-25页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·菌株 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·实验溶液的配制 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-25页 |
·dsRNA的提取 | 第23页 |
·酶切验证 | 第23-24页 |
·病毒颗粒的提取 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-27页 |
·平菇中dsRNA病毒提取和琼脂糖电泳鉴定 | 第25页 |
·平菇dsRNA病毒的酶切鉴定 | 第25-27页 |
·平菇中dsRNA病毒颗粒提取 | 第27页 |
4 结论与讨论 | 第27-29页 |
第三章 平菇dsRNA病毒基因组部分序列的克隆与测序 | 第29-40页 |
1 引言 | 第29页 |
2 材料与方法 | 第29-34页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·培养基 | 第29-30页 |
·主要实验溶液的配制 | 第30页 |
·引物、DNA分子量标记、载体 | 第30-31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·主要实验仪器 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·平菇dsRNA病毒基因组各个片段的回收 | 第31-32页 |
·RT-PCR | 第32-33页 |
·PCR产物的回收纯化 | 第33页 |
·PCR回收产物与克隆载体的连接及转化 | 第33页 |
·质粒的提取 | 第33-34页 |
·载体插入目的片段的验证 | 第34页 |
3 结果与分析 | 第34-39页 |
·平菇dsRNA病毒基因组各个片段的回收 | 第34-35页 |
·RT-PCR反应 | 第35页 |
·双酶切及PCR验证 | 第35-36页 |
·测序及其结果 | 第36-37页 |
·扩增片段序列分析 | 第37-39页 |
·扩增片段556b序列分析 | 第37-39页 |
·扩增片段351片段分析 | 第39页 |
4 结论与讨论 | 第39-40页 |
第四章 脱毒菌株的研究 | 第40-46页 |
1 引言 | 第40页 |
2 材料与方法 | 第40-42页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·菌株 | 第40页 |
·培养基 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·实验仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-42页 |
·脱毒菌种的制备 | 第41页 |
·dsRNA技术检测 | 第41-42页 |
·生长速度的测定 | 第42页 |
·摇瓶培养菌丝生物量的测定 | 第42页 |
·栽培实验 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-45页 |
·菌株脱毒后dsRNA检测结果 | 第42页 |
·平菇菌种脱毒前后生长速度的比较 | 第42-43页 |
·平菇脱毒菌株摇瓶培养菌丝生物量的测定 | 第43-44页 |
·栽培实验 | 第44-45页 |
4 结论与讨论 | 第45-46页 |
第五章 本文主要结论、主要问题分析及对后续研究工作的设想 | 第46-48页 |
1 本文的主要结论 | 第46页 |
2 主要问题分析 | 第46页 |
3 后续研究工作的设想 | 第46-48页 |
·平菇dsRNA病毒基因组的研究 | 第46-47页 |
·脱毒菌株的研究 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
英文摘要 | 第54-56页 |
硕士期间发表的与本文有关的论文和取得的研究成果 | 第56页 |