| 提要 | 第1-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-67页 |
| 第一章 狂犬病毒分子生物学研究进展 | 第15-31页 |
| 第二章 狂犬病研究进展 | 第31-51页 |
| 第三章 狂犬病诊断研究进展 | 第51-67页 |
| 第二篇 研究内容 | 第67-163页 |
| 第一章 狂犬病毒ERA株G和N蛋白基因克隆与序列分析 | 第67-85页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| 2 结果 | 第73-81页 |
| ·G蛋白基因的扩增、克隆与重组质粒pMD-G的鉴定结果 | 第73页 |
| ·N蛋白基因的扩增、克隆与重组质粒pMD-N的鉴定结果 | 第73-74页 |
| ·G蛋白基因核苷酸序列与推导的氨基酸序列分析 | 第74-76页 |
| ·N蛋白基因核苷酸序列与推导的氨基酸序列分析 | 第76-78页 |
| ·G蛋白和N蛋白疏水性、抗原表位和表面极性预测分析 | 第78-81页 |
| 3 讨论 | 第81-84页 |
| ·关于RV G蛋白和N蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第81-83页 |
| ·关于ERA株与其它固定毒株G和N蛋白抗原位点区蛋白的疏水性、抗原表位及表面极性分析 | 第83页 |
| ·关于ERA株与国内部分分离株N蛋白基因核苷酸同源性的比较 | 第83-84页 |
| 4 小结 | 第84-85页 |
| 第二章 狂犬病毒N基因在原核中表达与间接ELISA方法的建立 | 第85-101页 |
| 1 材料与方法 | 第86-92页 |
| 2 结果 | 第92-98页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第92页 |
| ·阳性表达宿主菌筛选与鉴定 | 第92-93页 |
| ·IPTG诱导表达最佳时间的确定 | 第93页 |
| ·重组蛋白表达分析结果 | 第93-95页 |
| ·纯化的表达产物SDS-PAGE检测 | 第95页 |
| ·间接ELISA条件的确定 | 第95-96页 |
| ·血清中抗E.coli抗体的消除 | 第96-97页 |
| ·间接ELISA交叉实验检测结果 | 第97页 |
| ·临床血清样品间接ELISA检测结果及与试剂盒比较 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-100页 |
| ·关于大肠杆菌表达系统的选择 | 第98-99页 |
| ·关于狂犬病毒核蛋白的原核表达 | 第99页 |
| ·关于间接ELISA方法的建立与初步应用 | 第99-100页 |
| 4 小结 | 第100-101页 |
| 第三章 狂犬病毒G基因在杆状病毒表达系统中的表达及反应原性鉴定 | 第101-113页 |
| 1 材料与方法 | 第102-106页 |
| 2 结果 | 第106-110页 |
| ·转移载体的构建及鉴定 | 第106页 |
| ·重组Bacmid的提取及鉴定 | 第106-108页 |
| ·细胞转染与重组病毒的获得 | 第108页 |
| ·重组蛋白表达SDS-PAGE分析与反应原性鉴定 | 第108-109页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第109-110页 |
| 3 讨论 | 第110-112页 |
| ·关于杆状病毒表达系统表达外源蛋白 | 第110页 |
| ·关于昆虫细胞培养和表达条件 | 第110-111页 |
| ·关于G蛋白的表达及其应用 | 第111页 |
| ·关于转染的影响因素 | 第111-112页 |
| 4 小结 | 第112-113页 |
| 第四章 狂犬病毒单克隆抗体的研制与初步应用 | 第113-139页 |
| 1 材料与方法 | 第114-123页 |
| 2 结果 | 第123-132页 |
| ·免疫抗原的制备 | 第124页 |
| ·免疫小鼠血清抗体效价的测定 | 第124-125页 |
| ·细胞融合、杂交瘤细胞的选择性培养及单克隆抗体类型鉴定 | 第125-126页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性鉴定 | 第126-129页 |
| ·腹水中单克隆抗体的纯化和纯度测定 | 第129-131页 |
| ·亲和力测定 | 第131页 |
| ·特异性和交叉性检测 | 第131-132页 |
| ·荧光抗体的制备及初步应用 | 第132页 |
| 3 讨论 | 第132-137页 |
| ·关于小鼠的免疫 | 第132-133页 |
| ·关于细胞融合及培养 | 第133-134页 |
| ·关于杂交瘤细胞株的筛选 | 第134-135页 |
| ·关于杂交瘤细胞的克隆 | 第135-136页 |
| ·关于单克隆抗体的纯化 | 第136页 |
| ·关于单抗亲和力和特异性 | 第136-137页 |
| 4 小结 | 第137-139页 |
| 第五章 狂犬病胶体金免疫层析检测试纸的研制与初步应用 | 第139-163页 |
| 1 材料与方法 | 第140-150页 |
| 2 结果 | 第150-157页 |
| ·狂犬病毒的纯化 | 第150-151页 |
| ·羊抗犬IgG的制备及效价测定 | 第151-152页 |
| ·结合释放垫的准备 | 第152-154页 |
| ·试纸条的特异性检测 | 第154-155页 |
| ·试纸条的敏感性检测 | 第155-156页 |
| ·血清样本检测及与FAVNT检测结果的比较 | 第156-157页 |
| ·储存期和批间检测 | 第157页 |
| 3 讨论 | 第157-162页 |
| ·关于实验材料的性质和选择依据 | 第157-158页 |
| ·关于胶体金的制备与标记 | 第158-160页 |
| ·关于羊抗犬IgG及狂犬病毒和SPA等标记胶体金的问题 | 第160-161页 |
| ·关于胶体金免疫层析技术的应用与展望 | 第161-162页 |
| 4 小结 | 第162-163页 |
| 结论 | 第163-165页 |
| 参考文献 | 第165-181页 |
| 中文摘要 | 第181-185页 |
| 英文摘要 | 第185-189页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其它成果 | 第189-190页 |
| 致谢 | 第190-192页 |
| 导师简介 | 第192-194页 |
| 作者简介 | 第194页 |
