内容提要 | 第1-5页 |
缩写词表 | 第5-11页 |
前言 | 第11-27页 |
1 细胞信号转导概述 | 第11-15页 |
·蛋白质激酶概述 | 第12-13页 |
·蛋白质磷酸酶概述 | 第13-15页 |
2 TC-PTP研究现状 | 第15-24页 |
·TC-PTP概述 | 第15-19页 |
·TC-PTP基因调控 | 第19-20页 |
·TC-PTP在细胞信号转导中的调节作用 | 第20-21页 |
·TC-PTP与疾病的关系 | 第21-24页 |
3 相关癌症简介 | 第24-25页 |
4 本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
实验方案 | 第27-28页 |
第一部分 TC-PTP催化结构域的克隆、表达及分离纯化 | 第28-39页 |
1 实验材料 | 第28-30页 |
·菌种和质粒 | 第28页 |
·试剂 | 第28-29页 |
·仪器 | 第29页 |
·培养基和缓冲液 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-35页 |
·克隆载体的构建 | 第30-33页 |
·表达载体的构建 | 第33-34页 |
·△TC-PTP的表达及分离纯化 | 第34-35页 |
3 实验结果 | 第35-38页 |
·目的片段的扩增 | 第35-36页 |
·克隆载体的构建 | 第36页 |
·表达载体的构建 | 第36-37页 |
·目的蛋白的表达 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38页 |
5 本章小节 | 第38-39页 |
第二部分 anti-△TC-PTP多克隆抗体的制备 | 第39-46页 |
1 实验材料 | 第39页 |
·动物 | 第39页 |
·试剂 | 第39页 |
2 实验方法 | 第39-42页 |
·用△TC-PTP免疫家兔 | 第39-40页 |
·ECL法检测免疫前后血清效价 | 第40页 |
·"PVDF膜固定抗原亲和层析柱"纯化多克隆抗体 | 第40-41页 |
·ECL法检测抗体纯化后的效价 | 第41页 |
·ECL法检测抗体纯化前后的灵敏度 | 第41页 |
·Western Blotting法检测抗体纯化前后的特异性 | 第41-42页 |
3 实验结果 | 第42-44页 |
·ECL法检测免疫后血清效价 | 第42页 |
·ECL法检测纯化后抗体效价 | 第42-43页 |
·ECL法检测纯化前后抗体的抗体灵敏度 | 第43页 |
·Western Blotting法检测抗体纯化前后的特异性 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-45页 |
5 本章小节 | 第45-46页 |
第三部分 TC-PTP在癌组织中表达情况的检测 | 第46-54页 |
1 实验材料 | 第46-47页 |
·组织 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
·仪器 | 第46-47页 |
2 实验方法 | 第47-49页 |
·组织石蜡切片的制备 | 第47-48页 |
·免疫组化检测 | 第48-49页 |
·免疫组化结果判定 | 第49页 |
3 实验结果 | 第49-53页 |
·显微镜检测免疫组化切片 | 第49-51页 |
·TC-PTP在癌组织中阳性表达的分析 | 第51-52页 |
·TC-PTP在不同分化程度的癌组织中的表达 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53页 |
5 本章小节 | 第53-54页 |
结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
中文摘要 | 第62-65页 |
Abstract | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |